Vurdering av intranasal glukagon på endogen glukoseproduksjon

Femten sunne, magre, ikke-diabetiske menn og kvinner vil gjennomgå to studier hver (enkelt blindet crossover), i tilfeldig rekkefølge, med 4-6 ukers mellomrom.

Studie A. Intranasal placeboadministrasjon med måling av endogen glukoseproduksjon under pankreasklemmeforhold.

Studie B. Intranasal glukagon (glukagon, Eli Lilly, Canada) administrasjon med måling av endogen glukoseproduksjon under pankreasklemmeforhold. Hver studiedeltaker vil bli innlagt på Metabolic Test Center ved Toronto General Hospital dagen før studien kl. 12.00. De vil få en standardisert middag (bestående av 7 kcal/kg; 50 % karbohydrat, 30 % fett og 20 % protein) og vil deretter bli pålagt å faste i 12 timer over natten (kan ha vann, men ingen annen mat eller drikke). ).

Kl. 07.00 (t=0) neste dag vil vi starte en klargjort, konstant intravenøs infusjon av [6,6-2H2]glukose (D2-glukose; Cambridge Isotope Laboratories, MA; en stabil isotop av glukose, hvis anrikning kan måles ved GC/MS, slik at vi kan beregne endogene glukoseproduksjonshastigheter). Infusjonen vil fortsette i 8 timer.

Samtidig (07.00) vil en bukspyttkjertelklemme startes i 8 timer for å undertrykke sekresjon av bukspyttkjertelhormon med somatostatin, samtidig som det gis basale infusjoner av bukspyttkjertelhormoner og veksthormon ved intravenøs infusjon. Denne metoden vil tillate oss å studere effekten av intranasal glukagon på hepatisk glukose- og TRL-produksjon uten de forvirrende effektene det kan ha på bukspyttkjertelhormonsekresjonen. En samtidig infusjon av somatostatin (Sandostatin, Novartis Pharma, Miss, ON 30mcg/time), insulin (Humulin R, Eli Lilly, Scarborough, ON, 0,05mU/kg/min), glukagon (Eli Lilly, Miss, ON 0,325ng/ kg/min) og veksthormon (Humatrope, Eli Lilly, Mississauga, ON 3ng/kg/min) vil startes og fortsettes gjennom hele studien. Alle hormoner ble fortynnet i 1 liter vanlig saltvann og infundert med en sprøytepumpe (B. Braun Medical Inc., Bethlehem, PA). Autologt serum (3 ml), nylaget fra forsøkspersonens blod, ble tilsatt saltvannet som bærer før hormonfortynning.

En studiesykepleier og/eller lege vil være ved sengen under hele klemmen og vil overvåke deltakerens blodsukker hvert 30. minutt etter start av klemmen og hvert 10. minutt etter administrering av glukagon (hvis det er klinisk indisert, kan prøvetakingen være hyppigere ) for å sikre at deltakerne ikke utvikler hypo/hyperglykemi. Blodprøver vil bli analysert med et glukometer for umiddelbare blodsukkeravlesninger. Hvis intranasal glukagon reduserer endogen glukoseproduksjon, er en reduksjon i plasmaglukose sannsynlig. 20 % dekstrose vil bli administrert om nødvendig for å opprettholde euglykemi. Klokken 9 (+120 minutter) vil intranasal placebo eller glukagon bli administrert. Glukagonet (Eli Lily, Canada) og placebo (fortynningsmiddel) vil bli overført til et målt neseapparat (Pharmasystems, Markham, Ontario UPC: 063636 802721, vare 10271) umiddelbart før bruk. Denne enheten dispenserer 0,1 ml (0,1 mg) per drag. Maksimalt 15 x 0,1 ml drag/hetteglass (7 i 1 nesebor og 8 i det andre neseboret) vil bli administrert med en hastighet på 2 (ett i hvert nesebor) hvert 60. sekund. Denne dosen kan titreres ned om nødvendig for å redusere perifer spillover.

Blodprøver vil bli tatt hvert 30. minutt etter start av klemmen og hvert 10. minutt etter administrering av intranasal glukagon eller placebo (totalt 400 ml). Blodprøvene vil bli samlet inn i avkjølte sterile rør som inneholder 0,1 % EDTA og konserveringsmiddel (aprotinin, natriumazid) og behandlet som angitt nedenfor.

For å matche perifere glukagonkonsentrasjoner mellom studiebesøk, vil en liten dose glukagon sannsynligvis måtte administreres intravenøst ​​kl. 09.00 under placebo-armen av studien. Basert på farmakokinetikken til glukagon, vil vi sannsynligvis administrere 0,00625mg-0,025mg, selv om ytterligere dosetitrering kan være nødvendig (maksimal dose 0,1 mg). Frie fettsyrer, triglyserider, insulin, glukagon, C-peptid, glukagon-lignende peptid-1 (GLP-1) og GIP, samt glukose isotopanriking vil bli målt.