内因性グルコース産生に対する鼻腔内グルカゴンの評価

15 人の健康で痩せた非糖尿病の男女が、ランダムな順序で 4 ～ 6 週間間隔で、それぞれ 2 つの研究 (単一盲検クロスオーバー) を受けます。

研究 A. 膵臓クランプ条件下での内因性グルコース産生の測定による鼻腔内プラセボ投与。

研究Ｂ．鼻腔内グルカゴン（グルカゴン、イーライリリー、カナダ）投与と膵臓クランプ条件下での内因性グルコース産生の測定 各研究参加者は、研究の前日の午後１２時にトロント総合病院の代謝試験センターに入院する。 標準化された夕食 (7 Kcal/kg、炭水化物 50%、脂肪 30%、タンパク質 20%) が提供され、その後、一晩 12 時間絶食する必要があります (水は摂取できますが、他の食べ物や飲み物は摂取できません)。 ）。

翌日の午前 7 時 (t=0) に、プライミングされた [6,6-2H2] グルコース (D2 グルコース; マサチューセッツ州ケンブリッジアイソトープ研究所; グルコースの安定同位体) のプライミングされた一定の静脈内注入を開始します。 GC/MS で測定することで、内因性グルコース産生率を計算できます)。 注入は8時間続きます。

同時に（午前７時）、ソマトスタチンで膵臓ホルモンの分泌を抑制し、静脈内注入により膵臓ホルモンと成長ホルモンの基礎注入を行うために、膵臓クランプを８時間開始する。 この方法により、鼻腔内グルカゴンが膵臓ホルモン分泌に及ぼす可能性のある交絡効果なしに、肝臓のグルコースおよびTRL産生に及ぼす影響を研究することができます. ソマトスタチン (Sandostatin、Novartis Pharma、Miss、ON 30mcg/hr)、インスリン (Humulin R、Eli Lilly、Scarborough、ON、0.05mU/kg/min)、グルカゴン (Eli Lilly、Miss、ON 0.325ng/hr) の同時注入kg/分) および成長ホルモン (Humatrope、Eli Lilly、Mississauga、ON 3ng/kg/分) を開始し、研究全体を通じて継続します。 すべてのホルモンは 1 リットルの生理食塩水で希釈し、シリンジ ポンプで注入しました (B. Braun Medical Inc.、ペンシルバニア州ベツレヘム)。 被験者の血液から新たに調製した自己血清（3mL）を、ホルモン希釈の前に担体として生理食塩水に添加した。

研究看護師および/または医師は、クランプ全体を通してベッドサイドにいて、クランプの開始後30分ごと、およびグルカゴンの投与後10分ごとに参加者の血糖を監視します（臨床的に示されている場合は、サンプリングがより頻繁になる場合があります） ) 参加者が低/高血糖を発症しないようにする。 血液サンプルはグルコメーターで分析され、瞬時に血糖値が読み取られます。 鼻腔内グルカゴンが内因性グルコース産生を減少させる場合、血漿グルコースの減少が起こりやすい. 必要に応じて、正常血糖を維持するために20%ブドウ糖を投与する。午前9時(+120分)に鼻腔内プラセボまたはグルカゴンを投与する。 グルカゴン（Eli Lily、カナダ）およびプラセボ（希釈剤）は、使用直前に計量鼻装置（Pharmasystems、Markham、Ontario UPC: 063636 802721、Item 10271）に移されます。 このデバイスは、1回のパフで0.1ml（0.1mg）を分配します。 最大 15 X0.1 ml パフ/バイアル (一方の鼻孔に 7 個、もう一方の鼻孔に 8 個) を、60 秒ごとに 2 回 (各鼻孔に 1 回) の割合で投与します。 この用量は、必要に応じて、末梢への波及を減らすために滴定することができます。

血液サンプルは、クランプの開始後 30 分ごと、および鼻腔内グルカゴンまたはプラセボの投与後 10 分ごとに収集されます (合計 400 ml)。 血液サンプルは、0.1% EDTA および保存剤 (アプロチニン、アジ化ナトリウム) を含む冷却滅菌チューブに収集され、以下に示すように処理されます。

研究訪問間で末梢グルカゴン濃度を一致させるために、研究のプラセボアーム中に、グルカゴンの少量を午前9時に静脈内投与する必要がある可能性があります. グルカゴンの薬物動態に基づいて、0.00625mg-0.025mgを投与する可能性があります。 ただし、さらに用量調節が必要な場合があります (最大用量 0.1mg)。 遊離脂肪酸、トリグリセリド、インスリン、グルカゴン、C-ペプチド、グルカゴン様ペプチド-1 (GLP-1)、GIP、およびグルコース同位体濃縮が測定されます。