Vurdering af intranasal glukagon på endogen glukoseproduktion

Femten sunde, magre, ikke-diabetiske mænd og kvinder vil gennemgå to undersøgelser hver (enkelt blindet crossover), i tilfældig rækkefølge, med 4-6 ugers mellemrum.

Undersøgelse A. Intranasal placeboadministration med måling af endogen glucoseproduktion under pancreas-klemmebetingelser.

Undersøgelse B. Intranasal glukagon (glucagon, Eli Lilly, Canada) administration med måling af endogen glucoseproduktion under pancreas-klemmebetingelser. Hver undersøgelsesdeltager vil blive indlagt på Metabolic Test Center på Toronto General Hospital dagen før undersøgelsen kl. 12.00. De vil blive forsynet med en standardiseret middag (bestående af 7 Kcal/kg; 50 % kulhydrat, 30 % fedt og 20 % protein) og vil derefter blive bedt om at faste i 12 timer natten over (kan have vand, men ingen anden mad eller drikkevarer ).

Kl. 07.00 (t=0) den næste dag vil vi begynde en klargjort, konstant intravenøs infusion af [6,6-2H2]glukose (D2 glucose; Cambridge Isotope Laboratories, MA; en stabil isotop af glucose, hvis berigelse kan måles ved GC/MS, hvilket giver os mulighed for at beregne endogene glucoseproduktionshastigheder). Infusionen fortsætter i 8 timer.

Samtidig (7 om morgenen) vil en pancreas-klemme blive startet i 8 timer for at undertrykke bugspytkirtelhormonsekretionen med somatostatin og samtidig give basale infusioner af pancreashormoner og væksthormon ved intravenøs infusion. Denne metode vil tillade os at studere virkningen af ​​intranasal glukagon på hepatisk glukose- og TRL-produktion uden de forvirrende virkninger, det kan have på udskillelsen af ​​pancreashormon. En samtidig infusion af somatostatin (Sandostatin, Novartis Pharma, Miss, ON 30mcg/time), insulin (Humulin R, Eli Lilly, Scarborough, ON, 0,05mU/kg/min), glukagon (Eli Lilly, Miss, ON 0,325ng/ kg/min) og væksthormon (Humatrope, Eli Lilly, Mississauga, ON 3ng/kg/min) startes og fortsættes under hele undersøgelsen. Alle hormoner blev fortyndet i 1 liter normalt saltvand og infunderet med en sprøjtepumpe (B. Braun Medical Inc., Bethlehem, PA). Autologt serum (3 ml), frisk fremstillet fra individets blod, blev tilsat til saltvandet som bærer før hormonfortynding.

En undersøgelsessygeplejerske og/eller læge vil være ved sengen under hele klemmen og vil overvåge deltagerens blodsukker hvert 30. minut efter starten af ​​klemmen og hvert 10. minut efter administration af glukagon (hvis det er klinisk indiceret, kan prøvetagning være hyppigere ) for at sikre, at deltagerne ikke udvikler hypo/hyperglykæmi. Blodprøver vil blive analyseret med et glukometer for øjeblikkelige blodsukkermålinger. Hvis intranasal glukagon reducerer endogen glucoseproduktion, er en reduktion i plasmaglucose sandsynlig. 20 % dextrose vil blive administreret, hvis det er nødvendigt for at opretholde euglykæmi. Kl. 9 om morgenen (+120 minutter) vil der blive administreret intranasal placebo eller glukagon. Glukagon (Eli Lily, Canada) og placebo (fortynder) overføres til en afmålt næseanordning (Pharmasystems, Markham, Ontario UPC: 063636 802721, vare 10271) umiddelbart før brug. Denne enhed dispenserer 0,1 ml (0,1 mg) pr. pust. Maksimalt 15 x 0,1 ml pust/hætteglas (7 i 1 næsebor og 8 i det andet næsebor) vil blive administreret med en hastighed på 2 (én i hvert næsebor) hvert 60. sekund. Denne dosis kan titreres ned, hvis det er nødvendigt for at reducere perifer spildover.

Blodprøver tages hvert 30. minut efter start af klemmen og hvert 10. minut efter administration af intranasal glukagon eller placebo (i alt 400 ml). Blodprøverne vil blive opsamlet i afkølede sterile rør indeholdende 0,1 % EDTA og konserveringsmiddel (aprotinin, natriumazid) og behandlet som angivet nedenfor.

For at matche perifere glukagonkoncentrationer mellem undersøgelsesbesøg vil en lille dosis glucagon sandsynligvis skulle administreres intravenøst ​​kl. 9.00 under studiets placeboarm. Baseret på farmakokinetikken af ​​glukagon, vil vi sandsynligvis administrere 0,00625mg-0,025mg, selvom yderligere dosistitrering kan være nødvendig (maksimal dosis 0,1 mg). Frie fedtsyrer, triglycerider, insulin, glucagon, C-peptid, glucagon-lignende peptid-1 (GLP-1) og GIP, samt glucose isotopberigelse vil blive målt.