抗菌光动力疗法在多种应用中的评估作为辅助治疗的手术治疗

非手术牙周治疗

在非手术牙周治疗前 7 天，将从所有患者的整个口腔拍摄根尖周 X 光片。 他们将根据自己的具体需要参加口腔卫生计划 (OHP)。 在此计划中，将指导患者如何有效地自行控制牙菌斑，包括有关 Bass 技术（Bass，1954 年）的信息以及使用牙线和牙间刷进行邻间清洁的信息。 他们还将被激励每天刷一次舌背表面，并会收到在整个实验期间使用的牙粉（Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Brazil's Kolynos - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, 巴西)。 在 OHP 之后，受试者将接受先前描述的临床牙周参数评估，并在选定部位（基线）收集龈下菌斑和 GCF。 不久，患者将在口腔中的所有牙齿上接受牙龈上刮治和使用预防杯进行冠状抛光。 非手术牙周治疗将在 OHP 和初始龈上刮治后 7 天开始。 在 24 小时内，牙周病专家将使用手（Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA）和超声波仪器对所有涉及牙周的牙齿进行龈上和龈下刮治和根面平整。 仪器将在每个象限上执行，直到实现充分的清洁和根面平整，这将由牙科探查器验证。 在非手术牙周治疗结束后的三个月内，个人将每两周接受一次专业预防。 在每两周一次的随访中，将通过验证口腔卫生状况来监测患者的合作情况。

外科牙周治疗

皮瓣手术在基础准备开始后 8 周进行。 将对患者进行临床监测，出现 PS ≥ 5mm 和 SS 存在的部位将接受手术治疗刮零售。 外科手术将由牙周病专家进行。 最初，患者将接受 2% 洗必泰的口腔外消毒，并通过含 0.12% 洗必泰的漱口水进行口腔内消毒。 浸润性手术区域用2%利多卡因溶液和1：100,000肾上腺素局部麻醉。 下面用手术刀片在15℃覆盖PS≥5mm的部位和邻牙进行沟内切开。 将进行粘骨膜瓣，直到暴露骨嵴和龈下沉积物和/或肉芽组织，用带有 RAR 和迷你五号、5/6、7/8 和 11/12 号的传统 Gracey 刮匙去除 13/ 14（Hu-Friedy，美国伊利诺伊州芝加哥）和超声波设备。 在完成 RAR 后不久开始 tfdA 在为该组选择的辅助治疗中的手术区域。 完成治疗后，皮瓣将被定位在同一个位置，并通过 Vicryl 5-0 线进行简单缝合来稳定。 为了避免疼痛症状，将开止痛药（扑热息痛 750mg，每 6 小时 01 片，持续 48 小时）。 他们还将使用含 0.12% 氯己定二葡萄糖酸盐的软口腔冲洗液，每天 2 次，持续 14 天。 7天后拆线。 在第一个月和每月进行一次每周牙龈上菌斑控制，直到完成手术干预后的 3 个月。

抗菌光动力疗法

在手术通路和皮瓣 RARε 实现后，选择接受 TfdA 的手术部位将用盐水冲洗，用无菌纱布擦干，等待 10 分钟，直到不再出血。 不久之后，将应用 fotossintentizador 盐酸盐吩噻嗪，其主要成分是浓度为 10mg/mL 的甲苯胺蓝（Helbo Blue，Helbo Photodynamic Sytems，Grieskirchen，Austria），接触 3 分钟。 之后，将使用盐水溶液进行冲洗以去除多余的光敏剂，并使用波长为 660 nm、最大功率为 60 mW / cm2 和能量密度为 0,6J / cm2 的激光二极管照射有色区域（Helbo therapielaser，Helbo Photodynamic Systems GmbH & Co KG, Grieskirchen, Austria)，每个站点 60 秒。 治疗在牙齿上的 6 个部位进行，每颗牙齿总共使用激光 6 分钟。 有分叉病变的牙齿会增加更多的 60 秒进入病变。

每个患者都会对海藻酸盐印象深刻，以获得牙弓模型并制作由醋酸盐制成的导板。 该板将呈现凹槽，这些凹槽将用作标准化自动牙周探针（Florida Probe System，Florida Probe Corporation，Gainesville，FL，USA）的插入和倾斜的参考。 每位患者的可见菌斑指数，采用二分法评级（O'Leary 等人，1972 年），将由牙齿表面沉积有被显示溶液染色的菌斑沉积物的百分比来确定。

手术后协议

如（Ramos 等人，2016 年）所述，在手术干预后 2、7 和 14 天期间，测试组中使用 TFDa 的治疗维持了应用方案。 该协议在暴露于激光时不同于之前的协议。 在上述协议中，曝光时间为每个站点 60 秒，共 6 分钟。 在这种情况下，每颗牙齿 6 个部位的每个部位的应用仅需 10 秒，总共暴露 1 分钟。 涉及分叉病变的牙齿在病变内有额外的 10 秒。

临床监测

以下临床牙周参数将在每颗牙齿的 6 个部位（近中颊、颊侧、远颊、近中舌、舌侧和远侧舌）进行评估：(i) 探诊袋深度 (PPD)：将测量从龈缘到袋底； (ii) 牙龈退缩 (GR)：从牙釉质接合处到袋底进行测量； (iii) 临床附着水平 (CAL)：它将被测量为 PPD + GR（当牙骨质连接处被覆盖时，GR 将等于 0）； (iv) 探诊出血 (BOP)：将进行二分法评估：在探头插入探诊深度后 30 秒内出现出血将被视为阳性； (v) 菌斑指数（PI）：采用二分法评价。 BOP、PPD、CAL 和 GR 将在每颗牙齿的六个位置（近颊、颊、远颊、远舌、舌侧和近中舌）进行测量。 所有探测测量都将使用自动牙周探针进行。

每位患者的临床牙周参数和菌斑指数将在基线（干预前）以及牙周外科治疗后 +30 和 +90 天时记录。 Kappa 指数将用于评估检查者对临床牙周参数收集的校准，以计算检查者内部一致性。 根据世界卫生组织（WHO）的诊断标准，可接受的Kappa一致性指数必须大于或等于0.85（WHO，1997）。 该协议级别将用于校准此项目中的审查员。 将选择 10 名患者，每名患者至少显示两对对侧单根牙齿，邻间位置 PD ≥ 5 mm，以校准检查者。 每位患者将在相隔 48 小时的两个不同场合进行评估，以便通过 Kappa 指数获得检查者内部的可靠性。

微生物监测

在基线以及手术牙周治疗后+30 和+90 天时，将从每位患者的八个邻间部位获取龈下菌斑样本。 将使用棋盘 DNA-DNA 杂交技术（Socransky 等人，2004a；Socransky 等人，2004b）分别分析样本中 40 种龈下细菌的含量。 选定的牙齿将用无菌棉卷隔离并用空气喷射器干燥。 然后，使用无菌刮匙小心去除龈上菌斑。 将使用另一个无菌刮匙收集龈下菌斑，从牙周袋底部开始到其冠状部分。 样品将储存在经过消毒的 Eppendorf 管中，并将在 Guarulhos 大学（UNG，Guarulhos，SP，巴西）的微生物实验室进行处理。

统计分析

将检查所获得数据的正态性和同方差性。 组内和组间在不同时间间隔的比较将通过参数或非参数适当测试进行。 在所有测试中，显着性水平将设置为 5%。 所有计算将由 SPSS 软件（SPSS，美国伊利诺伊州芝加哥）执行。