Bewertung der antimikrobiellen photodynamischen Therapie in mehreren Anwendungen als Coadjuvans in der chirurgischen Therapie des Zugangs zur Skalierung

Nicht-chirurgische Parodontaltherapie

Sieben Tage vor der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie werden periapikale Röntgenaufnahmen vom gesamten Mund aller Patienten gemacht. Sie werden entsprechend ihren spezifischen Bedürfnissen in ein Mundhygieneprogramm (OHP) eingestellt. In diesem Programm werden die Patienten über eine effektive, selbst durchgeführte Plaquekontrolle unterwiesen, einschließlich Informationen über die Bass-Technik (Bass, 1954) und die Reinigung der Zahnzwischenräume mit Zahnseide und Interdentalbürsten. Sie werden außerdem motiviert, einmal täglich die dorsale Oberfläche der Zunge zu putzen, und erhalten eine Zahnpasta, die während des gesamten Versuchszeitraums verwendet werden soll (Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Brazil's Kolynos - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, Brasilien). Nach der OHP werden die Probanden der Bewertung der zuvor beschriebenen klinischen parodontalen Parameter unterzogen und die Sammlung von subgingivaler Plaque und GCF an ausgewählten Stellen (Basislinie) wird durchgeführt. In Kürze erhalten die Patienten ein supragingivales Scaling und eine koronale Politur mit Prophy-Cup auf allen in der Mundhöhle vorhandenen Zähnen. Die nicht-chirurgische Parodontaltherapie beginnt 7 Tage nach der OHP und dem initialen supragingivalen Scaling. Innerhalb von 24 Stunden führt ein Spezialist für Parodontologie ein supra- und subgingivales Scaling und eine Wurzelglättung aller Zähne mit parodontaler Beteiligung mit Hand- (Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) und Ultraschallinstrumenten durch. Die Instrumentierung wird an jedem Quadranten durchgeführt, bis eine adäquate Reinigung und Wurzelglättung erreicht ist, die mit einem Dental Explorer überprüft wird. Einzelpersonen erhalten zweiwöchentlich eine professionelle Prophylaxe während drei Monaten nach Ende der nicht-chirurgischen Parodontaltherapie. Bei zweiwöchentlichen Kontrollbesuchen wird die Mitarbeit des Patienten überwacht, indem der Status der Mundhygiene überprüft wird.

Chirurgische Parodontaltherapie

Die Lappenoperationen werden 8 Wochen nach Beginn der Grundpräparation durchgeführt. Patienten werden klinisch überwacht und Stellen mit PS ≥ 5 mm und SS-Präsenz werden einer chirurgischen Therapie unterzogen. Chirurgische Eingriffe werden von einem Spezialisten für Parodontologie durchgeführt. Zunächst werden die Patienten einer extraoralen Antisepsis mit Chlorhexidin 2 % und intraoral durch Mundspülung mit Chlorhexidin 0,12 % unterzogen. Die infiltrativ zu operierende Region erhält eine örtliche Betäubung mit Lidocain 2%iger Lösung und 1:100.000 Epinephrin. Im Folgenden wird eine intrasulkuläre Inzision mit einer Skalpellklinge bei 15 °C durchgeführt, wobei die Stelle mit PS ≥ 5 mm und die angrenzenden Zähne abgedeckt werden. Ein Mukoperiostlappen wird durchgeführt, bis die Freilegung des Knochenkamms und subgingivale Ablagerungen von Kalk- und/oder Granulationsgewebe mit konventionellen Gracey-Küretten mit RAR und Mini Five, Nr. 5/6, 7/8 und 11/12, entfernt werden 13/ 14 (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) und Ultraschallgeräte. Kurz nach Abschluss der RAR beginnt die tfdA der operierten Region in der ausgewählten adjuvanten Therapie für diese Gruppe. Nach abgeschlossener Therapie wird der Lappen an der gleichen Ursprungsstelle positioniert und mit einfachen Nähten durch Draht Vicryl 5-0 stabilisiert. Um schmerzhafte Symptome zu vermeiden, werden Schmerzmittel verschrieben (Paracetamol 750 mg, 01 Tablette alle 6 Stunden für 48 Stunden). Ihnen werden außerdem 14 Tage lang zweimal täglich weiche Mundspülungen mit 0,12 % Chlorhexidindigluconat verschrieben. Die Nähte werden nach 7 Tagen entfernt. Wöchentliche supragingivale Plaquekontrolle im ersten Monat und monatlich bis zum Abschluss von 3 Monaten nach dem chirurgischen Eingriff.

Antimikrobielle photodynamische Therapie

Nach dem chirurgischen Zugang und der Realisierung des RARÎ-Lappens werden die für die TfdA ausgewählten Operationsstellen mit Kochsalzlösung gespült, mit steriler Gaze getrocknet, für einen Zeitraum von 10 Minuten und gewartet, bis keine Blutung mehr auftritt. Kurz darauf wird fotossintentizador Hydrochlorid Phenothiazin, dessen Hauptbestandteil das Toluidinblau ist, in einer Konzentration von 10 mg / ml (Helbo Blue, Helbo Photodynamic Sytems, Grieskirchen, Österreich) aufgetragen, das 3 Minuten lang in Kontakt bleibt. Hinterher wird eine Spülung mit Kochsalzlösung zur Entfernung des überschüssigen fotossensitizador durchgeführt und farbige Bereiche werden mit einer Laserdiode mit einer Wellenlänge von 660 nm, einer maximalen Leistung von 60 mW / cm2 und einer Energiedichte von 0,6 J / cm2 (Helbo therapielaser, Helbo Photodynamic Systems GmbH & Co KG, Grieskirchen, Österreich), für 60 Sekunden pro Standort. Die Behandlung wird an 6 Stellen an den Zähnen durchgeführt, wobei pro Zahn insgesamt sechs Minuten Laserlicht angewendet werden. Zähne mit Furkationsläsion werden mehr als 60 Sekunden in die Läsion hinein wachsen.

Jeder Patient wird mit Alginat abgeformt, um Modelle der Zahnbögen zu erhalten und eine Führungsplatte aus Acetat anzufertigen. Diese Platte wird Rillen aufweisen, die als Referenzen verwendet werden, um das Einführen und Neigen der automatisierten Parodontalsonde (Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, FL, USA) zu standardisieren. Der sichtbare Plaqueindex für jeden Patienten, dichotom bewertet (O'Leary et al. 1972), wird durch den Prozentsatz der Zahnoberflächen mit Plaqueablagerungen bestimmt, die mit der Nachweislösung angefärbt wurden.

Postoperatives Protokoll

Die Behandlung mit TFDa in der Testgruppe behielt das Anwendungsprotokoll in den Zeiträumen von 2, 7 und 14 Tagen nach dem chirurgischen Eingriff bei, wie von (Ramos et al., 2016) beschrieben. Dieses Protokoll unterscheidet sich vom vorherigen durch die Zeit der Laserlichteinwirkung. In dem oben beschriebenen Protokoll beträgt die Expositionszeit 60 Sekunden pro Stelle, was insgesamt 6 Minuten entspricht. Dabei betragen die Anwendungen nur 10 Sekunden pro Stelle an 6 Stellen pro Zahn, insgesamt 1 Minute Einwirkzeit. Zähne mit Bifurkationsläsion hatten zusätzliche 10 Sekunden innerhalb der Läsion.

Klinische Überwachung

Die folgenden klinischen parodontalen Parameter werden an 6 Stellen jedes Zahns beurteilt (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual und disto-lingual): (i) Sondierungstaschentiefe (PPD): Sie wird gemessen vom Zahnfleischsaum bis zum Taschenboden; (ii) gingivale Rezession (GR): sie wird von der Schmelz-Zement-Verbindung bis zum Boden der Tasche gemessen; (iii) Clinical Attachment Level (CAL): wird als PPD + GR gemessen (GR ist immer dann gleich 0, wenn die Zement-Schmelz-Grenze bedeckt ist); (iv) Blutung beim Sondieren (BOP): wird dichotom bewertet: Das Vorhandensein der Blutung wird als positiv betrachtet, wenn sie innerhalb von 30 Sekunden nach dem Einführen der Sonde für die Sondierungstiefe auftritt; (v) Plaqueindex (PI): wird dichotom ausgewertet. BOP, PPD, CAL und GR werden an sechs Stellen pro Zahn gemessen (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, disto-lingual, lingual und mesio-lingual). Alle Sondierungsmessungen werden mit einer automatisierten Parodontalsonde durchgeführt.

Die klinischen parodontalen Parameter und der Plaqueindex jedes Patienten werden zu Studienbeginn (vor der Intervention) sowie +30 und +90 Tage nach der chirurgischen Parodontaltherapie aufgezeichnet. Der Kappa-Index wird verwendet, um die Untersucherkalibrierung bei der Sammlung klinischer parodontaler Parameter zu bewerten, um die Übereinstimmung zwischen den Untersuchern zu berechnen. Gemäß den Diagnosekriterien der Weltgesundheitsorganisation (WHO) muss der akzeptable Kappa-Übereinstimmungsindex größer oder gleich 0,85 sein (WHO, 1997). Dieses Übereinstimmungsniveau wird für die Kalibrierung des Prüfers in diesem Projekt verwendet. Zehn Patienten, von denen jeder mindestens zwei kontralaterale einwurzelige Zahnpaare mit PD ≥ 5 mm an interproximalen Stellen aufweist, werden ausgewählt, um den Untersucher zu kalibrieren. Jeder Patient wird bei zwei verschiedenen Gelegenheiten im Abstand von 48 Stunden bewertet, um die Intra-Untersucher-Zuverlässigkeit durch den Kappa-Index zu erhalten.

Mikrobiologische Überwachung

Zu Studienbeginn und +30 und +90 Tage nach der chirurgischen Parodontaltherapie werden Proben der subgingivalen Plaque von acht interproximalen Stellen jedes Patienten entnommen. Die Proben werden einzeln auf ihren Gehalt an 40 subgingivalen Bakterienarten unter Verwendung der Checkerboard-DNA-DNA-Hybridisierungstechnik analysiert (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b). Die ausgewählten Zähne werden mit sterilen Watterollen isoliert und mit Luftdüsen getrocknet. Anschließend wird die supragingivale Plaque vorsichtig mit einer sterilen Kürette entfernt. Eine weitere sterile Kürette wird verwendet, um die subgingivale Plaque zu sammeln, beginnend am Boden der parodontalen Tasche bis zu ihrem koronalen Teil. Die Proben werden in sterilisierten Eppendorf-Röhrchen gelagert und im Mikrobiologischen Labor der Guarulhos-Universität (UNG, Guarulhos, SP, Brasilien) verarbeitet.

statistische Analyse

Die Normalität und Homoskedastizität der erhaltenen Daten werden überprüft. Vergleiche innerhalb von Gruppen und zwischen Gruppen in unterschiedlichen Zeitintervallen werden durch parametrische oder nicht-parametrische geeignete Tests durchgeführt. Das Signifikanzniveau wird bei allen Tests auf 5 % festgelegt. Alle Berechnungen werden von der SPSS-Software (SPSS, Chicago IL, USA) durchgeführt.