Evaluering av antimikrobiell fotodynamisk terapi i flere applikasjoner som en koadjuvans i kirurgisk terapi for tilgang til skalering

Ikke-kirurgisk periodontal terapi

Syv dager før den ikke-kirurgiske periodontale terapien vil det bli tatt periapikale røntgenbilder fra hele munnen til alle pasienter. De vil bli satt i et munnhygieneprogram (OHP) i henhold til deres spesifikke behov. I dette programmet vil pasientene bli instruert om en effektiv selvutført plakkkontroll, inkludert informasjon om Bass Technique (Bass, 1954) og interproksimal rengjøring med tanntråd og interdentale børster. De vil også bli motivert til å børste den dorsale overflaten av tungen en gang om dagen og vil motta et tannpleiemiddel som skal brukes gjennom hele forsøksperioden (Colgate Total®, Anakol Ind. Com Ltda - Brasils Kolynos - Colgate Palmolive Co., Sao Bernardo do Campo, SP, Brasil). Etter OHP vil forsøkspersonene gjennomgå vurdering av kliniske periodontale parametere tidligere beskrevet og innsamling av subgingival plakk og GCF på utvalgte steder (baseline) vil bli utført. Om kort tid vil pasienter få supragingival avskalling og koronal polering med prophy cup på alle tennene i munnhulen. Den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen vil starte 7 dager etter OHP og initial supragingival skalering. Innen 24 timer vil en spesialist i periodonti utføre supra og subgingival skalering og rotplaning av alle tenner med periodontal involvering, ved hjelp av hånd (Gracey Curettes, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) og ultralydinstrumenter. Instrumenteringen vil bli utført på hver kvadrant inntil en tilstrekkelig rengjøring og rotplaning er oppnådd, som vil bli verifisert med en dental explorer. Enkeltpersoner vil motta profesjonell profylakse annenhver uke i løpet av tre måneder etter slutten av den ikke-kirurgiske periodontale behandlingen. Ved oppfølgingsbesøk annenhver uke vil pasientens samarbeid overvåkes ved å verifisere status for munnhygiene.

Kirurgisk periodontal terapi

Klaffoperasjonene utføres 8 uker etter start av grunnpreparatet. Pasienter vil bli overvåket klinisk og steder som presenterer PS ≥ 5 mm og SS-tilstedeværelse vil gjennomgå kirurgisk skraping. Kirurgiske inngrep vil bli utført av spesialist i periodonti. Pasienter vil i utgangspunktet bli utsatt for ekstraoral antisepsis med klorheksidin 2 % og intraoralt gjennom munnvann med klorheksidin 0,12 %. Regionen som skal opereres infiltrativt mottar lokalbedøvelse med lidokain 2 % løsning, og 1: 100 000 adrenalin. Følgende vil bli utført intra-sulkulært snitt med et skalpellblad ved 15C som dekker stedet med PS ≥ 5 mm og de tilstøtende tennene. En mucoperiosteal klaff vil bli utført inntil eksponeringen av benkammen og subgingivale avleiringer av kalkulasjons- og/eller granulasjonsvev er fjernet med konvensjonelle Gracey-kyretter med RAR og Mini Five, nummer 5/6, 7/8 og 11/12 13/ 14 (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) og ultralydenheter. Kort tid etter fullføring av RAR begynner å tfdA den opererte regionen i den valgte adjuvante terapien for denne gruppen. Fullført terapi vil klaffen plasseres på samme opprinnelsessted og stabiliseres med enkle suturer gjennom wire Vicryl 5-0. For å unngå smertefulle symptomer vil det bli foreskrevet smertestillende (Paracetamol 750mg, 01 tablett hver 6. time i 48 timer). De vil også bli foreskrevet myke munnskyllinger med 0,12 % klorheksidindiglukonat, 2 ganger daglig i 14 dager. Suturene fjernes etter 7 dager. Utføres ukentlig supragingival plakkkontroll i den første måneden og månedlig inntil 3 måneder etter kirurgisk inngrep er fullført.

Antimikrobiell fotodynamisk terapi

Etter kirurgisk tilgang og realisering av klaff RARÎ, vil operasjonssteder som er valgt for å motta TfdA bli vannet med saltvann, tørkes med sterilt gasbind, en periode på 10 minutter og ventet til det ikke er mer blødning. Like etter, vil bli brukt fotossintentizador hydroklorid phenothiazine, hvis hovedkomponent er toluidin blått i en konsentrasjon på 10mg / ml (Helbo Blue, Helbo Photodynamic Sytems, Grieskirchen, Østerrike), som vil være i kontakt i 3 minutter. I etterkant vil vanning utføres med saltvann for fjerning av overflødig fotossensitizador og fargede områder bestråles med en laserdiode med bølgelengde 660 nm, maksimal effekt 60 mW/cm2 og en energitetthet på 0,6J/cm2 (Helbo therapielaser, Helbo Photodynamic Systems GmbH & Co KG, Grieskirchen, Østerrike), i 60 sekunder per sted. Behandlingen utføres på 6 steder på tennene, totalt seks minutters påføring av laserlys per tann. Tenner med furkasjonslesjon vil øke mer 60 sekunder inn i lesjonen.

Hver pasient vil bli imponert over alginat for å få modeller av tannbuene og utarbeide en styreplate laget av acetat. Denne platen vil presentere spor som vil bli brukt som referanser for å standardisere innsetting og tilt av den automatiserte periodontale proben (Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, FL, USA). Den synlige plakkindeksen for hver pasient, vurdert dikotomisk (O'Leary et al. 1972), vil bli bestemt av prosentandelen av tannoverflater med avleiringer av plakk farget med avslørende løsning.

Post-kirurgisk protokoll

Behandling med TFDa i testgruppen opprettholdt applikasjonsprotokollen i periodene 2, 7 og 14 dager etter kirurgisk inngrep som beskrevet av (Ramos et al., 2016). Denne protokollen er forskjellig fra den forrige ved eksponering for laserlys. I protokollen beskrevet ovenfor er eksponeringstiden 60 sekunder per sted, totalt 6 minutter. I dette er applikasjonene bare 10 sekunder per sted ved 6 steder per tann, totalt 1 minutts eksponering. Tenner som involverte bifurkasjonslesjon hadde ytterligere 10 sekunder inne i lesjonen.

Klinisk overvåking

Følgende kliniske periodontale parametere vil bli vurdert på 6 steder av hver tann (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual og disto-lingual): (i) sonderingslommedybde (PPD): den vil bli målt fra tannkjøttkanten til bunnen av lommen; (ii) gingival resesjon (GR): den vil bli målt fra emaljeringskrysset til bunnen av lommen; (iii) klinisk tilknytningsnivå (CAL): det vil bli målt som PPD + GR (GR vil være lik 0 når sementenamelkrysset er dekket); (iv) blødning ved sondering (BOP): det vil bli evaluert dikotomt: tilstedeværelsen av blødningen vil bli ansett som positiv når den oppstår innen 30 sekunder fra innsettingen av sonden for sonderingsdybde; (v) Plakkindeks (PI): den vil bli evaluert dikotomisk. BOP, PPD, CAL og GR vil bli målt på seks steder per tann (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, disto-lingual, lingual og mesio-lingual). Alle sonderingsmålinger vil bli utført ved hjelp av en automatisert periodontalsonde.

De kliniske periodontale parametrene og plakkindeksen til hver pasient vil bli registrert ved baseline (pre-intervensjon), samt +30 og +90 dager etter den kirurgiske periodontale behandlingen. Kappa-indeksen vil bli brukt til å evaluere undersøkerens kalibrering på innsamling av kliniske periodontale parametere for å beregne intra-eksaminatoravtalen. I henhold til Verdens helseorganisasjons (WHO) kriterier for diagnose, må den akseptable Kappa-indeksen for enighet være større enn eller lik 0,85 (WHO, 1997). Dette samsvarsnivået vil bli brukt for kalibrering av sensor i dette prosjektet. Ti pasienter, som hver viser minst to par kontralaterale enkeltrotede tenner med PD ≥ 5 mm på interproksimale steder, vil bli valgt til å kalibrere undersøkeren. Hver pasient vil bli evaluert ved to separate anledninger med 48 timers mellomrom for å oppnå intra-undersøkerens pålitelighet gjennom Kappa-indeksen.

Mikrobiologisk overvåking

Ved baseline og +30 og +90 dager etter den kirurgiske periodontale behandlingen, vil prøver av subgingival plakk bli tatt fra åtte interproksimale steder for hver pasient. Prøver vil bli individuelt analysert for deres innhold av 40 subgingivale bakteriearter ved bruk av sjakkbrett DNA-DNA hybridiseringsteknikk (Socransky et al., 2004a; Socransky et al., 2004b). De valgte tennene vil bli isolert med sterile bomullsruller og tørket med luftstråler. Deretter vil supragingival plakk fjernes forsiktig med en steril kyrett. En annen steril kyrett vil bli brukt til å samle opp den subgingivale plakk, fra bunnen av periodontallommen til dens koronale del. Prøvene vil bli lagret i steriliserte Eppendorf-rør og vil bli behandlet ved Microbiology Laboratory ved Guarulhos University (UNG, Guarulhos, SP, Brasil).

Statistisk analyse

Normaliteten og homoskedastisiteten til de innhentede dataene vil bli kontrollert. Sammenligninger innen grupper og mellom grupper ved forskjellige tidsintervaller vil bli utført gjennom parametriske eller ikke-parametriske passende tester. Signifikansnivået vil bli satt til 5 % i alle tester. Alle beregninger vil bli utført av SPSS programvare (SPSS, Chicago IL, USA).