CfDNA检测早期诊断肾移植后急性排斥反应的研究

随着肾移植技术和免疫抑制疗法的不断发展，接受肾移植的终末期肾病患者越来越多。 急性排斥反应(acute rejection, AR)是肾移植的主要并发症之一，AR是导致移植物存活率降低和移植物功能障碍的主要原因，因此及时发现AR并进行早期干预至关重要。 目前临床检测AR的手段包括病理穿刺试验和血尿生物标志物检测。 然而，病理测试是侵入性的，仅限于抽样误差和观察者之间存在的感知差异，以及其他缺点，如昂贵、患者依从性差和相关并发症。 血尿生物标志物检测反应缓慢，反映器官代谢指标在急性排斥损伤诊断中的敏感性和特异性较低。 虽然监测血液循环中的免疫抑制药物、免疫分子和细胞因子都可以为评估器官移植后患者的免疫状态提供一定的价值，但这些因素并不是早期诊断同种异体移植损伤的良好指标。 供体来源的细胞游离DNA（dd-cfDNA）作为“液体活检”的衡量标准，具有操作简便、创伤小、能及时反映相关情况等特点。 该方法可检测同种异体移植物的损伤程度，该指标会先于证候及相关实验室指标的波动而上升，这对早期诊断同种异体移植物急性排斥反应、进一步预防同种异体移植物损伤具有重要意义。 同时，dd-cfDNA在监测免疫抑制状态方面具有很高的利用价值，因此可以为免疫抑制治疗的优化提供指导。

在签署知情同意书的情况下，研究方案安排如下：

自我控制研究协议：

20 名接受肾移植的患者被随机分配，每个患者使用以下自我对照研究方案。

肾移植手术前采集受者外周血EDTA抗凝液1ml，供体外周血EDTA抗凝液1ml。

在肾移植手术后1周、2周、3周时间分别使用cfDNA采血管采集受者外周血8～10ml，中段尿10～15ml。

纳入标准：

*适合肾移植手术的患者。

排除标准：

• 移植手术失败的患者。
• 患者在移植手术后 1 周没有尿液。
• 患者在移植手术后会出现严重的感染并发症。 b、病例组：初诊确诊为急性排斥反应的患者20例，治疗前收集EDTA抗凝剂8～10ml，中段尿10～15ml，唾液5ml，1周和2抗排斥治疗调整后数周，分别用cfDNA采血管采血8～10ml，中段尿液10～15ml，唾液5ml。

纳入标准：

控制组：

• 同种异体移植肾功能正常。
• 同种异体移植肾的排斥被排除在外。
• 患者无感染并发症。

案例组：

• 同种异体移植肾有急性排斥反应的明显证据。
• 患者无感染并发症。

排除标准：

• 患者有感染并发症。
• 患者有肿瘤。
• 病人怀孕了。