Estudo na detecção de cfDNA para o diagnóstico em estágio inicial de rejeição aguda pós-transplante renal

Com o crescente desenvolvimento de tecnologias de transplante renal e terapias imunossupressoras, o número de pacientes com doença renal terminal que recebem transplante renal tem aumentado. A rejeição aguda (RA) é uma das principais complicações do transplante renal, e a RA é a principal razão para diminuir a taxa de sobrevivência do enxerto e para o mau funcionamento do enxerto, portanto, a detecção oportuna da RA e as intervenções precoces são cruciais. As medidas clínicas atuais para a detecção de RA incluem teste de punção patológica e detecção de biomarcador de hematúria. No entanto, os testes patológicos são invasivos, limitados a erros de amostragem e às diferenças de percepção existentes entre os observadores, e com outras desvantagens, como custo, baixa adesão do paciente e complicações relacionadas. A detecção do biomarcador de hematúria é lenta na resposta e baixa na sensibilidade e especificidade para refletir o índice metabólico dos órgãos no diagnóstico de lesão aguda por rejeição. Embora o monitoramento de drogas imunossupressoras, moléculas imunes e citocinas na circulação sanguínea possam fornecer algum valor para a avaliação do estado imunológico dos pacientes após o transplante de órgãos, esses fatores não são bons indicadores para o diagnóstico em estágio inicial de lesão do enxerto. O DNA livre de células derivadas de doadores (dd-cfDNA) é utilizado como uma medida para "biópsia líquida", é fácil de operar, com menos invasividade e pode refletir condições relacionadas em tempo hábil, etc. Essa medida pode detectar o grau de lesão do aloenxerto, e o índice aumentará antes do reflexo da flutuação da síndrome e dos índices laboratoriais relacionados, o que é crucial para o diagnóstico em estágio inicial da rejeição aguda do aloenxerto e a prevenção adicional de lesão do aloenxerto. Nesse meio tempo, o dd-cfDNA assume alto valor de utilização para o monitoramento de condições imunossupressoras e, portanto, fornecendo instruções para a otimização do tratamento imunossupressor.

Sob a condição de consentimento informado assinado, os protocolos do estudo foram agendados conforme abaixo:

Protocolo de estudo de autocontrole:

20 pacientes para receber transplante de rim são randomizados, o protocolo de estudo de autocontrole é utilizado para cada paciente como o seguinte.

Antes da cirurgia de transplante renal, são coletados 1ml de anticoagulante EDTA periférico dos receptores e 1ml de anticoagulante EDTA periférico dos doadores.

Em 1 semana, 2 semanas, 3 semanas após as cirurgias de transplante renal, são coletados 8 a 10 ml de sangue periférico dos receptores usando tubos de coleta de sangue cfDNA e 10 a 15 ml de urina intermediária, respectivamente.

Critério de inclusão:

*Os pacientes são adequados para cirurgias de transplante renal.

Critério de exclusão:

• Os pacientes falharam nas cirurgias de transplante.
• Os pacientes não têm urina 1 semana após as cirurgias de transplante.
• Os pacientes apresentam complicações infecciosas graves após as cirurgias de transplante. b, Grupo caso: Para 20 pacientes que foram diagnosticados com rejeição aguda nas primeiras visitas, 8 a 10 ml de anticoagulante EDTA, 10 a 15 ml de jato médio de urina, 5 ml de saliva são coletados antes do tratamento, 1 semana e 2 semanas após o ajuste do tratamento anti-rejeição, 8 a 10 ml de sangue usando tubos de coleta de sangue cfDNA, 10 a 15 ml de urina de jato médio, 5 ml de saliva são coletados respectivamente.

Critério de inclusão:

Grupo de controle:

• Os rins do aloenxerto funcionam normalmente.
• A rejeição de rins aloenxertados é excluída.
• Os pacientes não apresentam complicações infecciosas.

Grupo de caso:

• Há evidências óbvias de rejeição aguda dos rins transplantados.
• Os pacientes não apresentam complicações infecciosas.

Critério de exclusão:

• Os pacientes têm complicações infecciosas.
• Os pacientes têm tumores.
• As pacientes estão grávidas.