Studio sulla rilevazione del cfDNA per la diagnosi precoce del rigetto acuto post-trapianto renale

Con il crescente sviluppo delle tecnologie di trapianto di rene e delle terapie immunosoppressive, il numero di pazienti con malattia renale allo stadio terminale sottoposti a trapianto di rene è in aumento. Il rigetto acuto (AR) è una delle principali complicanze del trapianto di rene e l'AR è la ragione principale per l'abbassamento del tasso di sopravvivenza dell'innesto e per il malfunzionamento dell'innesto, quindi il rilevamento tempestivo dell'AR e gli interventi precoci sono cruciali. Le attuali misure cliniche per il rilevamento di AR includono il test di puntura patologica e il rilevamento del biomarcatore dell'ematuria. Eppure i test patologici sono invasivi, limitati agli errori di campionamento e alle differenze di percezione esistenti tra gli osservatori, e con altri svantaggi come il costo, la scarsa compliance del paziente e le complicazioni correlate. Il rilevamento del biomarcatore dell'ematuria è lento nella risposta e basso nella sensibilità e specificità per riflettere l'indice metabolico degli organi nella diagnosi di danno da rigetto acuto. Sebbene il monitoraggio dei farmaci immunosoppressori, delle molecole immunitarie e delle citochine nella circolazione sanguigna possa entrambi fornire un certo valore per la valutazione dello stato immunitario dei pazienti dopo il trapianto di organi, questi fattori non sono buoni indicatori per la diagnosi in fase iniziale della lesione dell'allotrapianto. Il DNA libero da cellule derivate da donatore (dd-cfDNA) viene utilizzato come misura per la "biopsia liquida", è facile da usare, con minore invasività e può riflettere le condizioni correlate in modo tempestivo, ecc. Questa misura può rilevare il grado di lesione per l'allotrapianto e l'indice aumenterà prima del riflesso di fluttuazione della sindrome e dei relativi indici di laboratorio, che è cruciale per la diagnosi in fase molto precoce del rigetto acuto dell'allotrapianto e l'ulteriore prevenzione della lesione dell'allotrapianto. Nel frattempo, dd-cfDNA assume un elevato valore di utilizzo per il monitoraggio delle condizioni immunosoppressive, e quindi fornendo istruzioni per l'ottimizzazione del trattamento immunosoppressivo.

Sotto la condizione del consenso informato firmato, i protocolli di studio sono stati programmati come segue:

Protocollo di studio di autocontrollo:

20 pazienti sottoposti a trapianto di rene vengono randomizzati, il protocollo dello studio di autocontrollo viene utilizzato per ciascun paziente come segue.

Prima dell'intervento chirurgico di trapianto di rene, vengono raccolti 1 ml di anticoagulante EDTA periferico dai riceventi e 1 ml di anticoagulante EDTA periferico dai donatori.

In 1 settimana, 2 settimane, 3 settimane dopo gli interventi chirurgici di trapianto di rene, vengono raccolti rispettivamente da 8 a 10 ml di sangue periferico dai riceventi utilizzando provette per la raccolta del sangue cfDNA e da 10 a 15 ml di urina midstream.

Criterio di inclusione:

*I pazienti sono idonei per interventi chirurgici di trapianto di rene.

Criteri di esclusione:

• I pazienti hanno fallito negli interventi chirurgici di trapianto.
• I pazienti non hanno urina 1 settimana dopo gli interventi chirurgici di trapianto.
• I pazienti hanno gravi complicazioni infettive dopo gli interventi chirurgici di trapianto. b, Gruppo di casi: per 20 pazienti a cui è stato diagnosticato un rigetto acuto alle prime visite, prima del trattamento vengono raccolti da 8 a 10 ml di anticoagulante EDTA, da 10 a 15 ml di urina del flusso medio, 5 ml di saliva, 1 settimana e 2 settimane dopo l'aggiustamento del trattamento anti-rigetto, vengono raccolti rispettivamente da 8 a 10 ml di sangue utilizzando provette per la raccolta del sangue cfDNA, da 10 a 15 ml di urina midstream, 5 ml di saliva.

Criterio di inclusione:

Gruppo di controllo:

• I reni dell'allotrapianto funzionano normalmente.
• Il rigetto dei reni allotrapianti è escluso.
• I pazienti non hanno complicanze infettive.

Gruppo caso:

• Esistono prove evidenti di rigetto acuto dei reni allotrapiantati.
• I pazienti non hanno complicanze infettive.

Criteri di esclusione:

• I pazienti hanno complicazioni infettive.
• I pazienti hanno tumori.
• Le pazienti sono incinte.