Tutkimus cfDNA:n havaitsemisesta munuaissiirron jälkeisen akuutin hyljintäreaktion varhaisen vaiheen diagnoosia varten

Munuaisensiirtoteknologian ja immunosuppressiivisten hoitojen kehittymisen myötä munuaisensiirtoa saavien loppuvaiheen munuaissairauspotilaiden määrä on kasvanut. Akuutti hyljintä (AR) on yksi tärkeimmistä munuaisensiirron komplikaatioista, ja AR on tärkein syy siirteen eloonjäämisasteen alentamiseen ja siirteen toimintahäiriöön, joten AR:n oikea-aikainen havaitseminen ja varhaiset interventiot ovat ratkaisevan tärkeitä. Nykyisiä kliinisiä toimenpiteitä AR:n havaitsemiseksi ovat patologinen pistotesti ja hematuria-biomarkkerin havaitseminen. Patologiset testit ovat kuitenkin invasiivisia, ja ne rajoittuvat näytteenottovirheisiin ja olemassa oleviin havainnointieroihin tarkkailijoiden välillä, ja niihin liittyy muita haittoja, kuten kalleus, potilaan huono hoitomyöntyvyys ja niihin liittyvät komplikaatiot. Hematuria-biomarkkerin havaitseminen on hidasta vastetta, ja sen herkkyys ja spesifisyys on alhainen heijastamaan elinten metabolista indeksiä akuutin hyljintävaurion diagnoosissa. Vaikka immunosuppressiivisten lääkkeiden, immuunimolekyylien ja sytokiinien seuranta verenkierrossa voi molemmat tarjota tiettyä arvoa potilaan immuunitilan arvioimiselle elinsiirron jälkeen, nämä tekijät eivät ole hyviä indikaattoreita allograftivaurion varhaisen vaiheen diagnoosille. Luovuttajaperäistä soluvapaata DNA:ta (dd-cfDNA) käytetään "nestebiopsian" mittana, se on helppokäyttöinen, vähemmän invasiivisesti ja se voi heijastaa liittyviä tiloja oikea-aikaisesti jne. Tämä mitta voi havaita allograftin vaurioasteen, ja indeksi nousee ennen oireyhtymän ja siihen liittyvien laboratorioindeksien vaihtelua, mikä on ratkaisevan tärkeää allograftin akuutin hylkimisreaktion varhaisen vaiheen diagnosoinnissa ja allograftivaurion ehkäisemisessä. Sillä välin dd-cfDNA olettaa korkean käyttöarvon immunosuppressiivisten tilojen seurannassa ja antaa siten ohjeita immunosuppressiivisen hoidon optimointiin.

Allekirjoitetun tietoisen suostumuksen ehdolla tutkimusprotokollat ​​ajoitettiin seuraavasti:

Itsekontrollitutkimusprotokolla:

20 munuaissiirtopotilasta satunnaistetaan, itsekontrollitutkimusprotokollaa käytetään jokaiselle potilaalle seuraavasti.

Ennen munuaisensiirtoleikkausta kerätään 1 ml perifeeristä EDTA-antikoagulanttia vastaanottajilta ja 1 ml perifeeristä EDTA-antikoagulanttia luovuttajilta.

Viikon, 2 viikon ja 3 viikon kuluttua munuaisensiirtoleikkauksista kerätään 8 - 10 ml perifeeristä verta vastaanottajilta käyttämällä cfDNA-verenkeräysputkia ja 10 - 15 ml keskivirtavirtsaa.

Sisällyttämiskriteerit:

*Potilaat sopivat munuaisensiirtoleikkauksiin.

Poissulkemiskriteerit:

• Potilaat ovat epäonnistuneet elinsiirtoleikkauksissa.
• Potilailla ei ole virtsaa 1 viikko elinsiirtoleikkauksen jälkeen.
• Potilailla on vakavia infektiokomplikaatioita elinsiirtoleikkausten jälkeen. b, Tapausryhmä: 20 potilaasta, joilla on todettu akuutti hylkimisreaktio ensimmäisillä käyntikerroilla, kerätään 8-10 ml EDTA-antikoagulanttia, 10-15 ml keskivirtausvirtsaa, 5 ml sylkeä ennen hoitoa, 1 viikko ja 2 Viikkoa hylkimistä estävän hoidon säätämisen jälkeen kerätään vastaavasti 8 - 10 ml verta käyttämällä cfDNA-verenkeräysputkia, 10 - 15 ml keskivirran virtsaa ja 5 ml sylkeä.

Sisällyttämiskriteerit:

Kontrolliryhmä:

• Allograftin munuaiset toimivat normaalisti.
• Allograftin munuaisten hylkiminen on suljettu pois.
• Potilailla ei ole tarttuvia komplikaatioita.

Tapausryhmä:

• On selvää näyttöä allograftin munuaisten akuutista hylkimisestä.
• Potilailla ei ole tarttuvia komplikaatioita.

Poissulkemiskriteerit:

• Potilailla on tarttuvia komplikaatioita.
• Potilailla on kasvaimia.
• Potilaat ovat raskaana.