Badanie w wykrywaniu cfDNA we wczesnej fazie diagnozy ostrego odrzucenia po przeszczepie nerki

Wraz z rosnącym rozwojem technologii przeszczepiania nerek i terapii immunosupresyjnych, rośnie liczba pacjentów ze schyłkową niewydolnością nerek otrzymujących przeszczep nerki. Ostre odrzucenie (AR) jest jednym z głównych powikłań przeszczepu nerki, a AR jest główną przyczyną obniżenia wskaźnika przeżywalności przeszczepu i nieprawidłowego działania przeszczepu, dlatego kluczowe znaczenie ma wczesne wykrycie AR i wczesna interwencja. Obecne metody kliniczne wykrywania ANN obejmują patologiczny test nakłuwania i wykrywanie biomarkerów krwiomoczu. Jednak testy patologiczne są inwazyjne, ograniczone do błędów pobierania próbek i istniejących różnic w postrzeganiu wśród obserwatorów, a także z innymi wadami, takimi jak kosztowność, słaba współpraca pacjenta i związane z tym powikłania. Wykrywanie biomarkerów krwiomoczu jest powolne w odpowiedzi i ma niską czułość i specyficzność w odzwierciedlaniu wskaźnika metabolicznego narządów w diagnostyce urazu ostrego odrzucenia. Chociaż monitorowanie leków immunosupresyjnych, cząsteczek immunologicznych i cytokin w krwioobiegu może zapewnić pewną wartość do oceny statusu immunologicznego pacjentów po przeszczepie narządu, czynniki te nie są dobrymi wskaźnikami we wczesnym stadium diagnozy uszkodzenia alloprzeszczepu. DNA pochodzące z komórek dawcy (dd-cfDNA) jest wykorzystywane jako środek do „płynnej biopsji”, jest łatwe w obsłudze, mniej inwazyjne i może odzwierciedlać powiązane warunki w odpowiednim czasie itp. Ta miara może wykryć stopień uszkodzenia alloprzeszczepu, a wskaźnik wzrośnie przed odbiciem fluktuacji zespołu i powiązanych wskaźników laboratoryjnych, co ma kluczowe znaczenie dla bardzo wczesnego rozpoznania ostrego odrzucenia alloprzeszczepu i dalszego zapobiegania uszkodzeniom alloprzeszczepu. W międzyczasie dd-cfDNA przyjmuje wysoką wartość użytkową do monitorowania stanów immunosupresyjnych, a tym samym dostarcza wskazówek do optymalizacji leczenia immunosupresyjnego.

Pod warunkiem podpisania świadomej zgody, protokoły badań zostały zaplanowane jak poniżej:

Protokół badania samokontrolnego:

20 pacjentów otrzymujących przeszczep nerki jest randomizowanych, dla każdego pacjenta stosuje się protokół badania samokontroli w następujący sposób.

Przed zabiegiem przeszczepu nerki pobiera się 1 ml obwodowego antykoagulantu EDTA od biorców i 1 ml obwodowego antykoagulantu EDTA od dawców.

W ciągu 1 tygodnia, 2 tygodni, 3 tygodni po operacji przeszczepu nerki pobiera się odpowiednio 8 do 10 ml krwi obwodowej od biorców do probówek do pobierania krwi z cfDNA oraz 10 do 15 ml moczu ze środkowego strumienia.

Kryteria przyjęcia:

*Pacjenci kwalifikują się do operacji przeszczepu nerki.

Kryteria wyłączenia:

• Pacjenci ponieśli porażkę w operacjach przeszczepów.
• Pacjenci nie mają moczu 1 tydzień po operacji przeszczepu.
• Pacjenci mają ciężkie powikłania infekcyjne po operacjach przeszczepów. b, Grupa przypadków: Od 20 pacjentów, u których na pierwszych wizytach zdiagnozowano ostre odrzucanie, pobiera się 8 do 10 ml antykoagulantu EDTA, 10 do 15 ml środkowego strumienia moczu, 5 ml śliny przed leczeniem, 1 tydzień i 2 tygodni po dostosowaniu leczenia zapobiegającego odrzuceniu, pobiera się odpowiednio 8 do 10 ml krwi do probówek do pobierania krwi cfDNA, 10 do 15 ml moczu ze środkowego strumienia, 5 ml śliny.

Kryteria przyjęcia:

Grupa kontrolna:

• Nerki alloprzeszczepowe funkcjonują normalnie.
• Odrzucenie alloprzeszczepu nerek jest wykluczone.
• Pacjenci nie mają powikłań infekcyjnych.

Grupa przypadków:

• Istnieją oczywiste dowody na ostre odrzucenie przeszczepionej nerki.
• Pacjenci nie mają powikłań infekcyjnych.

Kryteria wyłączenia:

• Pacjenci mają powikłania infekcyjne.
• Pacjenci mają guzy.
• Pacjentki są w ciąży.