Studie detekce cfDNA pro časnou diagnostiku akutní rejekce po transplantaci ledvin

S rostoucím rozvojem technologií transplantace ledvin a imunosupresivních terapií roste počet pacientů v konečném stádiu onemocnění ledvin, kteří podstupují transplantaci ledviny. Akutní rejekce (AR) je jednou z hlavních komplikací transplantace ledviny a AR je hlavním důvodem pro snížení míry přežití štěpu a pro poruchu funkce štěpu, proto je zásadní včasná detekce AR a včasná intervence. Současná klinická opatření pro detekci AR zahrnují patologický punkční test a detekci biomarkerů hematurie. Přesto jsou patologické testy invazivní, omezené na chyby při odběru vzorků a existující rozdíly ve vnímání mezi pozorujícími as dalšími nevýhodami, jako je cena, špatná kompliance pacienta a související komplikace. Detekce biomarkerů hematurie má pomalou odezvu a nízkou senzitivitu a specificitu pro vyjádření metabolického indexu orgánů v diagnóze akutního rejekčního poškození. Ačkoli monitorování imunosupresiv, imunitních molekul a cytokinů v krevním oběhu může poskytnout určitou hodnotu pro hodnocení imunitního stavu pacientů po transplantaci orgánu, tyto faktory nejsou dobrými indikátory pro včasnou diagnózu poškození aloštěpu. Bezbuněčná DNA odvozená od dárce (dd-cfDNA) se používá jako měřítko pro „tekutou biopsii“, je snadno ovladatelná, s menší invazivitou a může včas odrážet související stavy atd. Toto měření může detekovat stupeň poranění aloštěpu a index se zvýší před fluktuací odrazem syndromu a souvisejících laboratorních indexů, což je klíčové pro velmi časnou diagnózu akutní rejekce aloštěpu a další prevenci poranění aloštěpu. Mezitím má dd-cfDNA vysokou užitnou hodnotu pro monitorování imunosupresivních stavů, a proto poskytuje návod pro optimalizaci imunosupresivní léčby.

Pod podmínkou podepsaného informovaného souhlasu byly protokoly studie naplánovány takto:

Protokol sebekontrolní studie:

20 pacientů s transplantací ledviny je randomizováno, protokol sebekontrolní studie je použit pro každého pacienta následovně.

Před operací transplantace ledviny se odebere 1 ml periferního antikoagulantu EDTA od příjemců a 1 ml periferního antikoagulantu EDTA od dárců.

Za 1 týden, 2 týdny, 3 týdny po operacích transplantace ledviny se odebere 8 až 10 ml periferní krve od příjemců pomocí zkumavek pro odběr krve cfDNA a 10 až 15 ml střední moči.

Kritéria pro zařazení:

*Pacienti jsou vhodní pro operace transplantace ledvin.

Kritéria vyloučení:

• Pacienti selhali v transplantačních operacích.
• Pacienti nemají moč 1 týden po transplantačních operacích.
• Pacienti mají po transplantačních operacích závažné infekční komplikace. b, Případová skupina: U 20 pacientů, u kterých byla při prvních návštěvách diagnostikována akutní rejekce, se před léčbou odebere 8 až 10 ml antikoagulantu EDTA, 10 až 15 ml střední moči, 5 ml slin, 1 týden a 2 týdnů po úpravě antirejekční léčby se odebere 8 až 10 ml krve pomocí cfDNA odběrových zkumavek, 10 až 15 ml střední moči, 5 ml slin resp.

Kritéria pro zařazení:

Kontrolní skupina:

• Aloštěp ledviny fungují normálně.
• Odmítnutí aloštěpu ledvin je vyloučeno.
• Pacienti nemají žádné infekční komplikace.

Skupina případů:

• Existují zřejmé důkazy pro akutní odmítnutí aloštěpu ledvin.
• Pacienti nemají žádné infekční komplikace.

Kritéria vyloučení:

• Pacienti mají infekční komplikace.
• Pacienti mají nádory.
• Pacientky jsou těhotné.