Metoda ISET (izolace podle velikosti epiteliálních nádorových buněk)

Rakovina plic je celosvětově nejrozšířenějším novotvarem a hlavní příčinou úmrtnosti související s nádory. Navzdory nedávným pokrokům v léčbě resekovaných karcinomů plic (tj. použití adjuvantní terapie) a účinnější léčbě metastatických nádorů (tj. molekulárně cílená činidla), zůstává míra vyléčení pacientů s rakovinou plic nízká (. Histologická klasifikace plicních nádorů rozlišuje malobuněčný (SCLC) a nemalobuněčný karcinom (NSCLC). Většina NSCLC vykazuje tři histologické podtypy: adenokarcinom, spinocelulární karcinom a velkobuněčný karcinom. Prognóza těchto tří podtypů NSCLC je dosti podobná. V tomto ohledu je vývoj a validace nových prognostických/prediktivních biomarkerů z nádorových tkání a biologických tekutin jednou ze slibnějších oblastí v translačním výzkumu rakoviny. Klinický dopad nových biomarkerů však musí být pečlivě validován, včetně NSCLC. Zatímco pTNM staging je v současnosti jediným ověřeným prognostickým faktorem používaným při sledování a léčbě pacientů s NSCLC, 25 % až 50 % pacientů s NSCLC v časném stadiu I vykazuje recidivu tumoru po rozsáhlé resekci tumoru, což ukazuje na naléhavou potřebu citlivějších prognostických markerů. Dále bylo hlášeno, že přítomnost okultního metastatického onemocnění koreluje s recidivou onemocnění u pacientů ve stadiu I NSCLC. Nyní existuje značné množství důkazů, že metastázy by se mohly vyvinout z cirkulujících nádorových buněk (CTC) šířených v krvi před nebo během operace. Citlivá a specifická detekce CTC v krvi je tedy považována za potenciálně relevantní prediktivní biomarker pro pacienty s NSCLC. Hlavním cílem předoperační detekce CTC je skutečně identifikovat pacienty s vysokým rizikem recidivy po operaci, aby bylo možné provést lépe přizpůsobenou terapeutickou strategii. Navzdory několika studiím o detekci CTC, metodologické aspekty týkající se senzitivity, specificity a reprodukovatelnosti zabránily jasnému posouzení jejich klinického dopadu. Zatímco RT-PCR a imunitně zprostředkované metody mohou být velmi citlivé, specifita zůstává pro tyto přístupy kritickým problémem, protože v současnosti není znám žádný transkript nebo antigen, který by specificky rozpoznával nádorové buňky od pevných nádorů. V tomto prostředí je za slibný přístup považována cytopatologická analýza cirkulujících nehematologických buněk (CNHC), epiteliálního (CEC) a endoteliálního (CEN-C) původu, izolovaných podle jejich velikosti (ISET, Isolation by Size of Epithelial Tumor cells). , protože obohacení CNHC je velmi citlivé a buněčná morfologie není poškozena, což umožňuje použít klasická cytopatologická kritéria k identifikaci nádorových buněk. V tomto ohledu byla již dříve hlášena technologie ISET, která umožňuje identifikaci CTC u pacientů s nádory jater a prsu. Metoda ISET však nebyla nikdy použita k detekci CTC u pacientů s NSCLC. Cílem této studie je zjistit diagnostický potenciál metody ISET pro předoperační detekci CTC u pacientů s NSCLC. Za tímto účelem byla skupinou 10 cytologů stanovena cytomorfologická kritéria pro klasifikaci CNHC do 3 skupin: i) CNHC s maligními znaky (CNHC-MF), ii) CNHC s nejistými znaky (CNHC-UMF) a iii) CNHC s benigními rysy (CNHC-BF). Přítomnost a počet těchto cirkulujících buněk jsou pak korelovány s pTNM, histologickým podtypem a procentem nádorových buněk v primárních nádorech.