Il metodo ISET (Isolamento per dimensione delle cellule tumorali epiteliali)

Il cancro del polmone è la neoplasia più diffusa e la principale causa di mortalità correlata al tumore in tutto il mondo. Nonostante i recenti progressi nella gestione dei tumori polmonari resecati (cioè l'uso della terapia adiuvante) e trattamenti più efficaci dei tumori metastatici (cioè agenti molecolari mirati), il tasso di guarigione dei pazienti con cancro del polmone rimane basso (. La classificazione istologica dei tumori polmonari distingue i tumori polmonari a piccole cellule (SCLC) e non a piccole cellule (NSCLC). La maggior parte dei NSCLC mostra tre sottotipi istologici: adenocarcinoma, carcinoma a cellule squamose e carcinoma a grandi cellule. La prognosi di questi tre sottotipi di NSCLC è abbastanza simile. A questo proposito, lo sviluppo e la validazione di nuovi biomarcatori prognostici/predittivi da tessuti tumorali e fluidi biologici è uno dei domini più promettenti nella ricerca traslazionale sul cancro. Tuttavia, l'impatto clinico dei nuovi biomarcatori deve essere attentamente convalidato, anche per il NSCLC. Mentre la stadiazione pTNM è attualmente l'unico fattore prognostico convalidato utilizzato nel follow-up e nel trattamento dei pazienti con NSCLC, dal 25% al ​​50% dei pazienti con NSCLC in stadio I iniziale mostra recidiva tumorale dopo un'ampia resezione tumorale, indicando l'urgente necessità di marcatori prognostici più sensibili. Inoltre, è stato riportato che la presenza di malattia metastatica occulta è correlata alla recidiva della malattia nei pazienti con NSCLC in stadio I. Esiste ora un considerevole numero di prove che le metastasi potrebbero svilupparsi da cellule tumorali circolanti (CTC) diffuse nel sangue prima o durante l'intervento chirurgico. Pertanto, il rilevamento sensibile e specifico di CTC nel sangue è considerato un biomarcatore predittivo potenzialmente rilevante per i pazienti con NSCLC. In effetti, l'obiettivo principale per il rilevamento preoperatorio di CTC è identificare i pazienti ad alto rischio di recidiva dopo l'intervento chirurgico, al fine di eseguire una strategia terapeutica più adatta. Nonostante numerosi studi riportati sulla rilevazione di CTC, gli aspetti metodologici riguardanti la sensibilità, la specificità e la riproducibilità hanno impedito una chiara valutazione del loro impatto clinico. Mentre RT-PCR e metodi immuno-mediati possono essere molto sensibili, la specificità rimane un problema critico per questi approcci poiché al momento non è noto alcun trascritto o antigene che riconosca specificamente le cellule tumorali da tumori solidi . In questo contesto, l'analisi citopatologica delle cellule circolanti non ematologiche (CNHC), di origine epiteliale (CEC) ed endoteliale (CEN-C), isolate in base alla loro dimensione (ISET, Isolation by Size of Epithelial Tumor cells) è considerata un approccio promettente , poiché l'arricchimento di CNHC è molto sensibile e la morfologia cellulare non è danneggiata, consentendo di applicare criteri citopatologici classici per identificare le cellule tumorali. A questo proposito, la tecnologia ISET è stata precedentemente segnalata per consentire l'identificazione di CTC in pazienti con tumori al fegato e al seno. Tuttavia, il metodo ISET non è mai stato utilizzato per rilevare CTC in pazienti con NSCLC. Lo scopo di questo studio è determinare il potenziale diagnostico del metodo ISET per il rilevamento preoperatorio di CTC nei pazienti con NSCLC. A questo scopo sono stati stabiliti criteri citomorfologici da un gruppo di 10 citologi per classificare il CNHC in 3 gruppi: i) CNHC con caratteristiche maligne (CNHC-MF), ii) CNHC con caratteristiche incerte (CNHC-UMF) e, iii) CNHC con caratteristiche benigne (CNHC-BF). La presenza e il numero di queste cellule circolanti sono quindi correlate con pTNM, sottotipo istologico e percentuale di cellule tumorali nei tumori primari.