O Método ISET (Isolamento por Tamanho de Células Tumorais Epiteliais)

O câncer de pulmão é a neoplasia mais prevalente e a principal causa de mortalidade relacionada a tumores em todo o mundo. Apesar dos avanços recentes no manejo de cânceres de pulmão ressecados (ou seja, o uso de terapia adjuvante) e tratamentos mais eficazes de tumores metastáticos (ou seja, agentes moleculares direcionados), a taxa de cura de pacientes com câncer de pulmão permanece baixa (. A classificação histológica dos tumores pulmonares distingue os cânceres pulmonares de células pequenas (CPPC) e não pequenas (NSCLC). A maioria dos NSCLC exibe três subtipos histológicos: adenocarcinoma, carcinoma de células escamosas e carcinoma de grandes células. O prognóstico desses três subtipos de NSCLC é bastante semelhante. Nesse sentido, o desenvolvimento e a validação de novos biomarcadores prognósticos/preditivos de tecidos tumorais e fluidos biológicos é um dos domínios mais promissores na pesquisa translacional do câncer. No entanto, o impacto clínico de novos biomarcadores deve ser cuidadosamente validado, inclusive para NSCLC. Embora o estadiamento pTNM seja atualmente o único fator prognóstico validado usado no acompanhamento e tratamento de pacientes com NSCLC, 25% a 50% dos pacientes com NSCLC em estágio inicial I apresentam recorrência tumoral após extensa ressecção tumoral, indicando a necessidade urgente de marcadores prognósticos mais sensíveis. Além disso, foi relatado que a presença de doença metastática oculta se correlaciona com a recorrência da doença em pacientes com NSCLC em estágio I. Existe agora um corpo considerável de evidências de que as metástases podem se desenvolver a partir de células tumorais circulantes (CTC) espalhadas no sangue antes ou durante a cirurgia. Assim, a detecção sensível e específica de CTC no sangue é considerada um biomarcador preditivo potencialmente relevante para pacientes com NSCLC. De fato, o principal objetivo da detecção pré-operatória de CTC é identificar pacientes com alto risco de recorrência após a cirurgia, a fim de realizar uma estratégia terapêutica mais adaptada. Apesar de vários estudos relatados sobre a detecção de CTC, aspectos metodológicos relativos à sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade têm impedido uma avaliação clara de seu impacto clínico. Embora a RT-PCR e os métodos imunomediados possam ser muito sensíveis, a especificidade continua sendo uma questão crítica para essas abordagens, pois nenhum transcrito ou antígeno é conhecido no momento, reconhecendo especificamente células tumorais de tumores sólidos. Neste cenário, a análise citopatológica de células circulantes não hematológicas (CNHC), de origem epitelial (CEC) e endotelial (CEN-C), isoladas de acordo com seu tamanho (ISET, Isolation by Size of Epithelial Tumor cells) é considerada uma abordagem promissora , pois o enriquecimento de CNCC é muito sensível e a morfologia celular não é danificada, permitindo a aplicação de critérios citopatológicos clássicos para identificar células tumorais. A este respeito, a tecnologia ISET foi previamente relatada para permitir a identificação de CTC em pacientes com tumores de fígado e mama. No entanto, o método ISET nunca foi usado para detectar CTC em pacientes com NSCLC. O objetivo deste estudo é determinar o potencial diagnóstico do método ISET para detecção pré-operatória de CTC em pacientes com NSCLC. Para este fim, critérios citomorfológicos foram estabelecidos por um grupo de 10 citologistas para classificar o CNHC em 3 grupos: i) CNHC com características malignas (CNHC-MF), ii) CNHC com características incertas (CNHC-UMF) e, iii) CNHC com características benignas (CNHC-BF). A presença e o número dessas células circulantes são então correlacionados com pTNM, subtipo histológico e porcentagem de células tumorais nos tumores primários.