Trojitá terapie versus terapie založená na levofloxacinu pro eradikaci Helicobacter Pylori v Mexiku.

Tato studie fáze IIIb je prospektivní, otevřená, randomizovaná studie s paralelními skupinami non-inferiority účinnosti a bezpečnosti. Bude probíhat na čtyřech ambulancích ve dvou městech v Mexiku (Mexico City a město Toluca). Studie byla schválena ústřední etickou komisí a COFEPRIS (mexická federální komise pro ochranu sanitárních rizik) a bude provedena v souladu s Helsinskou deklarací na ochranu lidských subjektů a se směrnicemi správné klinické praxe.

Po podepsání informovaného souhlasu bude do studie zařazeno dvě stě třicet subjektů ve věku 18 až 65 let s infekcí HP prokázanou endoskopickou biopsií a dosud neléčenou. Budou náhodně rozděleni do jedné ze dvou skupin: Skupina 1 bude dostávat klarithromycin 500 mg dvakrát denně (bid), amoxicilin 1 g dvakrát denně a lansoprazol 30 mg dvakrát denně (Pylopac®, Medix SA de CV, Mexiko); Skupina 2 bude dostávat azithromycin 500 mg jednou denně (od) (Truxa®, Laboratorios Monte Verde SA, Argentina), levofloxacin 500 mg jednou denně (Laboratorios Asofarma de México SA de CV, Mexiko) a pantoprazol 80 mg jednou denně (Zoltum®, Laboratorio Monte Verde SA, Argentina). Obě skupiny dostanou léčbu po dobu 10 dnů. Antibiotika budou předepisována po jídle, zatímco inhibitor protonové pumpy bude užíván nalačno. Do konce léčby nebudou povoleny žádné další léky.

Subjekty budou hodnoceny pomocí dechového testu 13C-urea (13C-UBT) čtyři týdny po eradikační léčbě HP. Eradikace H. pylori bude definována jako negativní 13C-UBT. Během čtyř týdnů před 13C-UBT nebude povolena žádná další medikace.

Pokud jde o posouzení bezpečnosti, vzorky krve budou odebírány v centrální laboratoři po podpisu informovaného souhlasu a před zahájením léčby. Na konci léčby každé skupině bude odebrán další vzorek krve pro srovnání s počátečními výsledky. Compliance pacienta a nežádoucí účinky související s léčbou budou posouzeny na konci léčby (kromě toho, zda je AE závažná, v takovém případě bude okamžitě hlášena a v té době bude rozhodnuto o vhodných opatřeních).

Všechny biopsie budou přezkoumány centrálním patologem. Endoskopické biopsie budou okamžitě fixovány v 10% pufrovacím formalínu, zalité v parafínu, nakrájeny na řezy (tloušťka řezu 4 mm) a dehydratovány v sérii zvyšujících se koncentrací ethanolu/xylolu. Každý řez bude obarven hematoxylinem a eosinem (H&E). Diagnóza gastritidy bude stanovena v souladu s aktualizovaným systémem Sydney10. Fluorescenční in situ hybridizace (FISH) bude provedena u všech biopsií. Stručně řečeno, 4mm tkáňové řezy fixované v parafínu zalité ve formalínu budou naneseny na sklíčka potažená poly-L-lysinem a zpracována hexanem a ethanolem. Hybridizace bude provedena pomocí komerčně dostupné kombinované sady BACTfish H pylori (Izinta Trading Co. Ltd., Maďarsko). Sonda pro identifikaci H. pylori (Hpy 1) (5'CACACCTGACTGACTATCCCG-3') bude označena fluorescein isothiokyanátem (FITC), který poskytuje zelený signál, a sondy, které detekují tři nejrozšířenější mutace rezistence na clarithromycin (ClaR1 ( A2143G) 5'CGGGGTCTTCCCGTCTt-3', ClaR2 (A2144G) 5'CGGGGCTCTCCGTCTT-3' a ClaR3 (A21443C) 5-CGGGGTCTTGCCGTCTT-3') budou označeny červeným fluorochromem (Cy3). Po hybridizaci po dobu 90 minut při 46 °C se řezy dvakrát promyjí promývacím pufrem při 46 °C po dobu 15 minut. Na vzduchu vysušené řezy budou obarveny 4', 6' diamino-2-fenylindolem (DAPI). Sklíčka budou hodnocena pomocí fluorescenčního mikroskopu Nikon Eclipse 80i. Snímky budou pořízeny fotoaparátem Nikon DS-Fi1 a zpracovány pomocí softwaru NIS-Elements 2.1.

Spojité proměnné budou popsány pomocí průměrů a směrodatné odchylky. Analýza účinnosti bude založena na míře eradikace H. pylori u subjektů, které dokončily léčbu podle protokolu. S ohledem na přístup non-inferiority nebude skupina 2 považována za horší než skupina 1, pokud je horní hranice 95% intervalu spolehlivosti (CI) pro rozdíl v míře eradikace mezi oběma skupinami nižší než předem stanovená non-inferiorita marže 5 = 0,12 %. Takové rozpětí bylo vybráno v souladu s dříve publikovanými studiemi provedenými s referenční kombinací.

Chí-kvadrát test a Studentův t-test budou použity k porovnání obou skupin, pokud jde o výchozí data, míru eradikace, nežádoucí účinky a biochemické výsledky pro analýzu bezpečnosti. Hodnota P < 0,05 bude považována za významnou. K provedení statistické analýzy bude použit IBM SPSS 21.