Účinky selenu a melatoninu na oční ischemický syndrom

V této retroprospektivní studii byli zvažováni k zařazení pacienti, kteří vykazovali klinické příznaky OIS nebo kteří měli OIS v anamnéze a kteří navštívili Oční kliniku nebo byli doporučeni Kardiologickou klinikou. Pacienti s OIS byli zařazeni podle následujících kritérií (26-29) (1), když stenóza ipsilaterální (k postiženému oku) vnitřní krkavice (ICA) byla >50 % a rychlost průtoku krve ICA byla abnormální; (2) abnormální oční příznaky a/nebo příznaky, které nelze vysvětlit jinými očními chorobami. Mezi oční symptomy patřily amaurosis fugax, ztráta zraku, plováky, metamorfopsie, fosfeny, diplopie a oční/periorbitální bolest. Většina pacientů (88,10 %) si stěžovala na konstituční symptomy, jako je bolest hlavy, synkopa, bušení srdce, hemiplegie a klaudikace. Pacienti, kteří trpěli jinými očními chorobami, včetně primárního glaukomu, uveitidy, věkem podmíněné makulární degenerace, symetrické proliferativní diabetické retinopatie , odchlípení cévnatky, odchlípení sítnice, dědičné oční choroby, oční nádor nebo oční trauma byly vyloučeny. Před odběrem klinických materiálů byl od všech účastníků získán informovaný souhlas. Studie se držela zásad Helsinské deklarace.

Všichni pacienti s OIS podstoupili barevné dopplerovské zobrazení karotid (CDI) a/nebo počítačovou tomografickou angiografii (CTA) k identifikaci stenózy ICA. Při každé následné návštěvě byla provedena podrobná oční vyšetření, včetně nejlépe korigované zrakové ostrosti (BCVA), nitroočního tlaku (IOP), vyšetření štěrbinovou lampou a funduskopie. Dále byly zaznamenány konstituční a oční příznaky, anamnéza (arteriální hypertenze, diabetes mellitus (DM), hyperlipidémie (HLP), ischemická choroba srdeční, cerebrovaskulární onemocnění atd.), klinické oddělení první návštěvy a léčebné postupy. Statistický popis byl vygenerován pomocí SPSS pro Windows, verze 22.0.

Do naší studie bylo zařazeno 28 pacientů s OIS, včetně 20 mužů (% 71,4) a 8 žen (% 28,6). Věk nástupu se pohyboval od 58 do 87 let (65,10 ± 10,95), přičemž většina pacientů byla ve věku 61 až 75 let (69,50 %). Nebyl nalezen žádný statisticky významný rozdíl pro pohlaví a věk mezi skupinami (p <0,01) Studie byla provedena v Trabzon Numune Training and Research Hospital mezi květnem 2014 a zářím 2016. Byl získán souhlas Etického výboru nemocnice Trabzon Numune Training and Research. Všechny postupy provedené ve studiích zahrnujících lidské účastníky byly v souladu s etickými standardy institucionálního a/nebo národního výzkumného výboru a Helsinskou deklarací z roku 1964 a jejími pozdějšími dodatky nebo srovnatelnými etickými standardy.

Pacienti byli rozděleni do pěti skupin.

1. Kontrolní skupina: Do této skupiny bylo zahrnuto sedm zdravých osob. Po topické anestezii bylo odebráno přibližně 0,1 cm3 vzorků z přední komory.
2. Skupina ischemie: Do této skupiny bylo zahrnuto sedm pacientů s OIS. V topické anestezii byly z AC odebrány vzorky o objemu 0,1 cm3.
3. Skupina selen + ischemie: Do této skupiny bylo zahrnuto sedm pacientů s OIS. Pacientům v této skupině byl podáván perorálně selen v dávkách 0,1 mg/kg dvakrát denně po dobu jednoho měsíce. Poté, co byla dokončena perioda doplňování selenu, odběr AC, jak je popsáno výše.
4. Skupina melatonin + ischemie: Do této skupiny bylo zahrnuto sedm pacientů s OIS. Pacienti v této skupině byli suplementováni perorálním melatoninem v dávkách 0,5 mg/kg/den dvakrát denně po dobu jednoho měsíce. Po dokončení suplementace 0,1 cc odběru z AC.
5. Skupina selen + melatonin + ischemie: Do této skupiny bylo zahrnuto sedm pacientů s OIS. Pacienti byli suplementováni selenem a melatoninem po dobu jednoho měsíce, jak je popsáno výše, následně 0,1 cc odběru z AC.

Pro stanovení hladin AC malondialdehydu (MDA) bylo do zkumavky vloženo 2,5 ml 10% TCA (tricholoroessigaurekrist.), přidáno 0,1 ml vzorku AC od pacientů. Zkumavky byly vortexovány a utěsněny. Inkubace byla aplikována po dobu 15 minut ve vodní lázni o teplotě 90 °C. Byly ochlazeny ve studené vodě a jejich hodnoty absorbance byly odečteny s odkazem na slepý pokus na spektrofotometru při 532 nm. Výsledky byly prezentovány jako nmol/ml. Na začátku testování byl slepý vzorek připraven umístěním stejného množství destilované vody místo plazmy do slepé zkumavky a provedením stejných postupů. Za účelem měření hladin AC glutathionu (GSH) byly vzorky AC umístěné ve zkumavkách obsahujících EDTA centrifugovány při 3000 ot./min. po dobu 5 minut. Vzorky byly promyty 3x 0,9% fyziologickým roztokem a bylo získáno 50 μl každého vzorku. Následně bylo přidáno 450 μl destilované vody a 500 μl 10% kyseliny sulfosalicylové. Směs byla chlazena v ledu po dobu 1 hodiny a poté centrifugována při 4000 otáčkách po dobu 3 minut. Následně bylo získáno 200 μl supernatantu a postupně bylo přidáno 8 ml fosfátového pufru o pH 6,8, 78 μl 1N NaOH a 100 μl Ellmanova roztoku. Po 5 minutách čekání byly hodnoty absorbance v reagenční zkumavce odečteny s ohledem na destilovanou vodu na spektrofotometru při 412 nm. Ellmanův roztok byl připraven rozpuštěním 100 mg kyseliny 5'-5'-dithiobis-2-nitrobenzoové (DTNB) ve 100 ul. ml fosfátového pufru o pH 7,8. Glutathionový standard byl připraven jako 15,34 mg/100 ml rozpuštěním 15,34 mg redukovaného glutathionu ve 100 ml 1 nm sodné soli EDTA. Výsledky byly prezentovány jako mg/dl.