Wpływ selenu i melatoniny na zespół niedokrwienny oka

W tym retrospektywnym badaniu uwzględniono pacjentów, u których wystąpiły objawy kliniczne OIS lub którzy mieli OIS w wywiadzie i którzy odwiedzili Oddział Okulistyczny lub zostali skierowani przez Oddział Kardiologii. Pacjenci z OIS zostali włączeni zgodnie z następującymi kryteriami (26-29) (1) gdy zwężenie tętnicy szyjnej wewnętrznej (ICA) po tej samej stronie (do chorego oka) wynosiło >50%, a prędkość przepływu krwi przez ICA była nieprawidłowa; (2) nieprawidłowe objawy i/lub oznaki oczne, których nie można wytłumaczyć innymi chorobami oczu. Objawy oczne obejmowały amaurosis fugax, utratę wzroku, męty, metamorfopsję, fosfeny, podwójne widzenie i ból oka/okołooczodołowy. Większość pacjentów (88,10%) skarżyła się na objawy ogólne, takie jak ból głowy, omdlenia, kołatanie serca, porażenie połowicze i chromanie. Pacjenci cierpieli na inne choroby oczu, w tym jaskrę pierwotną, zapalenie błony naczyniowej oka, zwyrodnienie plamki żółtej związane z wiekiem, symetryczną proliferacyjną retinopatię cukrzycową , odwarstwienie naczyniówki, odwarstwienie siatkówki, dziedziczne choroby oczu, guz oka lub uraz oka zostały wykluczone. Świadoma zgoda została uzyskana od wszystkich uczestników przed zebraniem materiałów klinicznych. Badanie było zgodne z założeniami Deklaracji Helsińskiej.

U wszystkich pacjentów z OIS wykonano obrazowanie tętnicy szyjnej metodą kolorowego dopplera (CDI) i/lub angiografię tomografii komputerowej (CTA) w celu wykrycia zwężenia ICA. Podczas każdej wizyty kontrolnej wykonywano szczegółowe badania okulistyczne, w tym najlepszą skorygowaną ostrość wzroku (BCVA), ciśnienie wewnątrzgałkowe (IOP), badanie w lampie szczelinowej i badanie dna oka. Rejestrowano również objawy ogólnoustrojowe i oczne, historię medyczną (nadciśnienie tętnicze, cukrzyca (DM), hiperlipidemia (HLP), choroba niedokrwienna serca, choroba naczyń mózgowych itd.), oddział kliniczny pierwszej wizyty i leczenie. Opis statystyczny został wygenerowany przy użyciu SPSS dla Windows, wersja 22.0.

Do naszego badania włączono 28 pacjentów z OIS, w tym 20 mężczyzn (%71,4) i 8 kobiet (%28,6). Wiek zachorowania wahał się od 58 do 87 lat (65,10 ± 10,95), przy czym większość pacjentów była w wieku od 61 do 75 lat (69,50%). Nie stwierdzono statystycznie istotnej różnicy dla płci i wieku pomiędzy grupami (p <0,01) Badanie przeprowadzono w Trabzon Numune Training and Research Hospital w okresie od maja 2014 do września 2016. Uzyskano zgodę Komisji ds. Etyki Szpitala Szkoleniowo-Badawczego Trabzon Numune. Wszystkie procedury przeprowadzone w badaniach z udziałem ludzi były zgodne ze standardami etycznymi instytucji i/lub krajowego komitetu badawczego oraz z Deklaracją Helsińską z 1964 r. i jej późniejszymi poprawkami lub porównywalnymi standardami etycznymi.

Pacjentów podzielono na pięć grup.

1. Grupa kontrolna: W tej grupie znalazło się 7 zdrowych osób. Po znieczuleniu miejscowym pobrano około 0,1 cm3 próbek z komory przedniej.
2. Grupa z niedokrwieniem: Do tej grupy włączono siedmiu pacjentów z OIS. W znieczuleniu miejscowym z AC pobrano próbki o objętości 0,1 cm3.
3. Grupa Selen + niedokrwienie: Do tej grupy włączono siedmiu pacjentów z OIS. Pacjenci z tej grupy otrzymywali doustną suplementację selenu w dawce 0,1 mg/kg dwa razy dziennie przez jeden miesiąc. Po zakończeniu okresu suplementacji selenem pobieranie próbek AC zgodnie z powyższym opisem.
4. Grupa Melatonina + niedokrwienie: Do tej grupy włączono siedmiu pacjentów z OIS. Pacjenci z tej grupy otrzymywali doustne dawki melatoniny 0,5 mg/kg/dzień dwa razy dziennie przez jeden miesiąc. Po zakończeniu suplementacji pobrano próbkę 0,1 cm3 z AC.
5. Grupa Selen + Melatonina + Niedokrwienie: Do tej grupy włączono siedmiu pacjentów z OIS. Pacjentom podawano selen i melatoninę przez jeden miesiąc, jak opisano powyżej, a następnie pobierano próbki 0,1 cm3 z AC.

W celu oznaczenia poziomu AC dialdehydu malonowego (MDA), do probówki wlano 2,5 ml 10% TCA (trichloroessigaurekrist.), dodano 0,1 ml próbki AC od pacjentów. Probówki worteksowano i szczelnie zamknięto. Inkubację prowadzono przez 15 minut w łaźni wodnej o temperaturze 90ºC. Ochłodzono je w zimnej wodzie i odczytano ich wartości absorbancji w odniesieniu do próby ślepej na spektrofotometrze przy 532 nm. Wyniki przedstawiono jako nmol/ml. Na początku testu przygotowano ślepą próbę, umieszczając tę ​​samą ilość wody destylowanej zamiast osocza w ślepej probówce i wykonując te same procedury. W celu zmierzenia poziomów glutationu AC (GSH), próbki AC umieszczone w probówkach zawierających EDTA wirowano przy 3000 obr./min przez 5 minut. Próbki przemyto 3 razy 0,9% roztworem soli fizjologicznej i uzyskano po 50 μl każdej próbki. Kolejno dodano 450 μl wody destylowanej i 500 μl 10% kwasu sulfosalicylowego. Mieszaninę schładzano w lodzie przez 1 godzinę, a następnie wirowano przy 4000 obr./min przez 3 minuty. Następnie pobrano 200 μl supernatantu i kolejno dodano 8 ml buforu fosforanowego o pH 6,8, 78 μl 1 N NaOH i 100 μl roztworu Ellmana. Po odczekaniu 5 minut odczytano wartości absorbancji w probówce z odczynnikiem w odniesieniu do wody destylowanej na spektrofotometrze przy 412 nm. Roztwór Elmana przygotowano rozpuszczając 100 mg kwasu 5'-5'-ditiobis-2-nitrobenzoesowego (DTNB) w 100 ml buforu fosforanowego o pH 7,8. Standard glutationu przygotowano jako 15,34 mg/100 ml przez rozpuszczenie 15,34 mg zredukowanego glutationu w 100 ml 1 nm sodowego EDTA. Wyniki przedstawiono w mg/dl.