Влияние селена и мелатонина на глазной ишемический синдром

В этом ретроспективном исследовании для включения рассматривались пациенты с клиническими признаками OIS или с OIS в анамнезе, которые посещали отделение офтальмологии или были направлены отделением кардиологии. Пациентов с ОИС включали в соответствии со следующими критериями (26-29): (1) при стенозе ипсилатеральной (по отношению к пораженному глазу) внутренней сонной артерии (ВСА) >50% и скорости кровотока по ВСА была аномальной; (2) аномальные глазные симптомы и/или признаки, которые нельзя объяснить другими глазными заболеваниями. Глазные симптомы включали амавроз фугакса, потерю зрения, плавающие помутнения, метаморфопсию, фосфены, диплопию и глазную/периорбитальную боль. Большинство пациентов (88,10%) предъявляли жалобы на конституциональные симптомы, такие как головная боль, обморок, сердцебиение, гемиплегия, хромота. Пациенты, перенесшие другие глазные заболевания, в том числе первичную глаукому, увеит, возрастную макулодистрофию, симметричную пролиферативную диабетическую ретинопатию , отслойка хориоидеи, отслойка сетчатки, наследственные заболевания глаз, опухоль глаза или травма глаза были исключены. Перед сбором клинических материалов от всех участников было получено информированное согласие. Исследование придерживалось принципов Хельсинкской декларации.

Всем пациентам с OIS выполняли цветную допплеровскую визуализацию сонных артерий (CDI) и/или компьютерную томографическую ангиографию (CTA) для выявления стеноза ВСА. Подробные офтальмологические обследования, в том числе острота зрения с максимальной коррекцией (BCVA), внутриглазное давление (ВГД), осмотр с помощью щелевой лампы и офтальмоскопия проводились при каждом последующем посещении. Также регистрировались конституциональные и глазные симптомы, анамнез (артериальная гипертензия, сахарный диабет (СД), гиперлипидемия (ГЛП), ишемическая болезнь сердца, цереброваскулярные заболевания и т. д.), клиническое отделение первого визита и лечение. Статистическое описание было сгенерировано с помощью SPSS для Windows версии 22.0.

В нашем исследовании приняли участие 28 пациентов с ОИС, в том числе 20 мужчин (71,4%) и 8 женщин (28,6%). Возраст дебюта колебался от 58 до 87 лет (65,10 ± 10,95), при этом большинство пациентов были в возрасте от 61 до 75 лет (69,50%). Статистически значимых различий по полу и возрасту между группами обнаружено не было (p <0,01). Исследование проводилось в учебно-исследовательском госпитале Trabzon Numune в период с мая 2014 г. по сентябрь 2016 г. Было получено одобрение Комитета по этике учебного и научно-исследовательского госпиталя Trabzon Numune. Все процедуры, выполненные в исследованиях с участием людей, соответствовали этическим стандартам институционального и/или национального исследовательского комитета, а также Хельсинкской декларации 1964 г. и ее более поздним поправкам или сопоставимым этическим стандартам.

Больные были разделены на пять групп.

1. Контрольная группа: В эту группу вошли семь здоровых человек. После местной анестезии из передней камеры было взято около 0,1 см3 образцов.
2. Группа ишемии: в эту группу были включены семь пациентов с OIS. Под местной анестезией из АЦ были получены образцы объемом 0,1 мл.
3. Группа селен + ишемия: в эту группу были включены семь пациентов с OIS. Пациенты в этой группе принимали перорально селен в дозе 0,1 мг/кг два раза в день в течение одного месяца. После завершения периода приема селена отбирают пробы AC, как описано выше.
4. Группа мелатонин + ишемия: в эту группу были включены семь пациентов с OIS. Пациенты в этой группе получали пероральный прием мелатонина в дозе 0,5 мг/кг/сут два раза в день в течение одного месяца. После того, как добавка была завершена, отбирали 0,1 куб. см из AC.
5. Группа селен + мелатонин + ишемия: в эту группу были включены семь пациентов с OIS. Пациентам дополнительно вводили селен и мелатонин в течение одного месяца, как описано выше, а затем брали пробу 0,1 см3 из АЦ.

Для определения уровня АЦ малонового диальдегида (МДА) в пробирку помещали 2,5 мл 10% ТХУ (трихолороэссигаурекрист.), добавляли 0,1 мл пробы АЦ от больных. Пробирки встряхивали и герметизировали. Инкубацию проводили в течение 15 минут на водяной бане при 90°С. Их охлаждали в холодной воде и считывали значения их оптической плотности относительно холостого опыта на спектрофотометре при 532 нм. Результаты были представлены в нмоль/мл. В начале тестирования готовили контрольную пробу, помещая такое же количество дистиллированной воды вместо плазмы в пробирку контрольной пробы и выполняя те же процедуры. Для измерения уровней глутатиона АЦ (GSH) образцы АЦ, помещенные в пробирки с ЭДТА, центрифугировали при 3000 об/мин в течение 5 минут. Образцы промывали 3 раза 0,9% солевым раствором и получали по 50 мкл каждого образца. Последовательно добавляли 450 мкл дистиллированной воды и 500 мкл 10% сульфосалициловой кислоты. Смесь охлаждали на льду в течение 1 часа и затем центрифугировали при 4000 об/мин в течение 3 минут. Затем отбирали 200 мкл супернатанта и последовательно добавляли 8 мл фосфатного буфера с рН 6,8, 78 мкл 1 н. NaOH и 100 мкл раствора Эллмана. После ожидания в течение 5 минут значения оптической плотности в пробирке с реагентом считывали относительно дистиллированной воды на спектрофотометре при 412 нм. Раствор Эллмана готовили путем растворения 100 мг 5'-5'-дитиобис-2-нитробензойной кислоты (ДТНБ) в 100 мкл. мл фосфатного буфера с рН 7,8. Стандарт глутатиона был приготовлен в виде 15,34 мг/100 мл путем растворения 15,34 мг восстановленного глутатиона в 100 мл 1 нМ натрия ЭДТА. Результаты были представлены в мг/дл.