A szelén és a melatonin hatása a szem ischaemiás szindrómára

Ebben a retroprospektív vizsgálatban olyan betegek bevonását fontolgattuk, akiknél az OIS klinikai jellemzői jelentkeztek, vagy akiknek az anamnézisében OIS volt, és akik a Szemészeti Osztályon jártak, vagy akiket a Kardiológiai Osztály utalt be. Az OIS-ben szenvedő betegeket a következő kritériumok szerint (26-29) (1) soroltuk be, ha az ipsilaterális (az érintett szemhez képest) belső nyaki artéria (ICA) szűkülete >50% és az ICA véráramlási sebessége abnormális volt; (2) kóros szemtünetek és/vagy jelek, amelyek nem magyarázhatók más szembetegségekkel. A szemtünetek közé tartozott amaurosis fugax, látásvesztés, lebegés, metamorfózis, foszfének, diplopia és szem/periorbitális fájdalom. A legtöbb beteg (88,10%) olyan alkotmányos tünetekre panaszkodott, mint a fejfájás, ájulás, szívdobogás, hemiplegia és claudicatio. Azok a betegek, akik más szembetegségben szenvedtek, beleértve a primer glaukómát, az uveitist, az életkorral összefüggő makuladegenerációt, a szimmetrikus proliferatív diabéteszes retinopátiát , az érhártya leválás, a retina leválás, az örökletes szembetegségek, a szemdaganat vagy a szem traumája kizárásra került. A klinikai anyagok összegyűjtése előtt minden résztvevőtől tájékozott beleegyezést szereztek. A tanulmány a Helsinki Nyilatkozat alapelveit követte.

Az ICA szűkület azonosítására az összes OIS-betegnél nyaki artéria színes Doppler képalkotást (CDI) és/vagy számítógépes tomográfiás angiográfiát (CTA) végeztek. Részletes szemészeti vizsgálatokat végeztek, beleértve a legjobban korrigált látásélességet (BCVA), az intraokuláris nyomást (IOP), a réslámpás vizsgálatot és a szemfenéki vizsgálatot minden egyes utánkövetési vizit alkalmával. Feljegyezték az alkati és szemészeti tüneteket, a kórelőzményt (arteriális hipertónia, diabetes mellitus (DM), hiperlipidémia (HLP), szívkoszorúér-betegség, cerebrovascularis betegség stb.), az első látogatás klinikai osztályát és a kezeléseket. A statisztikai leírás az SPSS for Windows 22.0-s verziójával készült.

Vizsgálatunkba 28 OIS-beteget vontunk be, köztük 20 férfit (%71,4) és 8 nőt (%28,6). A kezdeti életkor 58 és 87 év között volt (65,10 ± 10,95), a betegek többsége 61 és 75 év közötti (69,50%). Nem találtak statisztikailag szignifikáns különbséget a nem és az életkor tekintetében a csoportok között (p <0,01) A vizsgálatot a Trabzon Numune Training and Research Hospital-ban végezték 2014 májusa és 2016 szeptembere között. Megkapták a Trabzon Numune Képzési és Kutatókórház Etikai Bizottságának jóváhagyását. A humán résztvevők bevonásával végzett vizsgálatokban végzett valamennyi eljárás összhangban volt az intézményi és/vagy nemzeti kutatóbizottság etikai normáival, valamint az 1964-es Helsinki nyilatkozattal és annak későbbi módosításaival, illetve az ehhez hasonló etikai normákkal.

A betegeket öt csoportra osztották.

1. Kontroll csoport: Hét egészséges személy került ebbe a csoportba. Helyi érzéstelenítés után kb. 0,1 cm3 mintát vettünk az elülső kamrából.
2. Ischaemia csoport: Ebbe a csoportba hét OIS-beteg került. Helyi érzéstelenítésben 0,1 cm3-es mintákat vettünk az AC-ból.
3. Szelén + iszkémia csoport: Hét OIS-beteg került ebbe a csoportba. Az ebbe a csoportba tartozó betegek 0,1 mg/ttkg orális szelént kaptak naponta kétszer egy hónapig. A szelénpótlási időszak befejezése után AC mintavétel a fent leírtak szerint.
4. Melatonin + Ischaemia csoport: Hét OIS-beteg került ebbe a csoportba. Az ebbe a csoportba tartozó betegek 0,5 mg/ttkg/nap orális melatonint kaptak naponta kétszer egy hónapig. A kiegészítés befejezése után 0,1 cc mintavétel AC-ból.
5. Szelén + melatonin + ischaemiás csoport: Hét OIS-beteg került ebbe a csoportba. A betegeket a fent leírtak szerint egy hónapig szelénnel és melatoninnal egészítettük ki, majd 0,1 cc mintát vettek AC-ból.

Az AC Malondialdehid (MDA) szintjének meghatározásához kémcsőbe 2,5 ml 10%-os TCA-t (tricholoroessigaurekrist.) helyeztünk, majd a betegektől 0,1 ml AC mintát adtunk hozzá. A csöveket vortexeljük és lezárjuk. Az inkubálást 15 percig 90 °C-os vízfürdőben végeztük. Hideg vízben lehűtöttük, és abszorbanciaértékeiket spektrofotométer vakpróbára vonatkoztatva 532 nm-en olvastuk le. Az eredményeket nmol/ml-ben adtuk meg. A tesztelés kezdetén vakpróbát készítettünk úgy, hogy plazma helyett ugyanannyi desztillált vizet helyeztünk a vakcsőbe, és ugyanezeket az eljárásokat végeztük el. Az AC Glutation (GSH) szintjének mérésére az EDTA-t tartalmazó csövekbe helyezett AC mintákat 3000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 5 percig. A mintákat háromszor mostuk 0,9%-os sóoldattal, és mindegyik mintából 50 μl-t nyertünk. Egymás után 450 μl desztillált vizet és 500 μl 10%-os szulfosalicilsavat adtunk hozzá. Az elegyet 1 órán át jégben hűtöttük, majd 4000 fordulaton 3 percig centrifugáltuk. Ezt követően 200 μl felülúszót vettünk le, és egymás után 8 ml 6,8 pH-jú foszfát puffert, 78 μl 1 N NaOH-t és 100 μl Ellman oldatot adtunk hozzá. 5 perc várakozás után a reagenscsőben leolvastuk az abszorbancia értékeket desztillált vízre vonatkoztatva spektrofotométeren 412 nm-en. Az Ellman-oldatot úgy készítettük, hogy 100 mg 5'-5'-ditiobisz-2-nitrobenzoesavat (DTNB) 100 ml-ben oldottunk. ml 7,8-as pH-jú foszfátpuffert. A glutation standardot 15,34 mg/100 ml-ben állítottuk elő 15,34 mg redukált glutation 100 ml 1 nm-es nátrium-EDTA-ban való feloldásával. Az eredményeket mg/dl-ben adtuk meg.