Effetti del selenio e della melatonina sulla sindrome ischemica oculare

In questo studio retrospettivo, i pazienti che presentavano le caratteristiche cliniche di OIS o che avevano una storia di OIS e che avevano visitato il Dipartimento di Oftalmologia o che erano stati indirizzati dal Dipartimento di Cardiologia sono stati presi in considerazione per l'inclusione. I pazienti di OIS sono stati inclusi secondo i seguenti criteri (26-29) (1) quando la stenosi dell'arteria carotide interna ipsilaterale (verso l'occhio affetto) (ICA) era >50% e la velocità del flusso sanguigno ICA era anormale; (2) sintomi e/o segni oculari anormali che non possono essere spiegati da altre malattie oculari. I sintomi oculari includevano amaurosis fugax, perdita della vista, corpi mobili, metamorfopsia, fosfeni, diplopia e dolore oculare/periorbitale. La maggior parte dei pazienti (88,10%) lamentava sintomi sistemici, come mal di testa, sincope, palpitazioni, emiplegia e claudicatio. I pazienti che soffrivano di altre malattie oculari, tra cui glaucoma primario, uveite, degenerazione maculare senile, retinopatia diabetica proliferativa simmetrica , distacco della coroide, distacco della retina, malattie oculari ereditarie, tumore oculare o trauma oculare, sono stati esclusi. Il consenso informato è stato acquisito da tutti i partecipanti prima della raccolta dei materiali clinici. Lo studio ha aderito ai principi della Dichiarazione di Helsinki.

Tutti i pazienti con OIS sono stati sottoposti a imaging color Doppler (CDI) dell'arteria carotidea e/o angiografia tomografica computerizzata (CTA) per identificare la stenosi dell'ICA. Ad ogni visita di follow-up sono stati eseguiti esami oftalmici dettagliati, tra cui l'acuità visiva corretta (BCVA), la pressione intraoculare (IOP), l'esame con lampada a fessura e il fondo oculare. Sono stati inoltre registrati i sintomi costituzionali e oculari, la storia medica (ipertensione arteriosa, diabete mellito (DM), iperlipidemia (HLP), malattia coronarica, malattia cerebrovascolare e così via), il reparto clinico della prima visita e i trattamenti. Una descrizione statistica è stata generata utilizzando SPSS per Windows, versione 22.0.

Nel nostro studio sono stati reclutati ventotto pazienti con OIS, inclusi 20 maschi (% 71,4) e 8 femmine (% 28,6). L'età di insorgenza variava da 58 a 87 anni (65,10 ± 10,95), con la maggior parte dei pazienti di età compresa tra 61 e 75 anni (69,50%). Nessuna differenza statisticamente significativa è stata trovata per sesso ed età tra i gruppi (p <0,01) Lo studio è stato condotto presso il Trabzon Numune Training and Research Hospital tra maggio 2014 e settembre 2016. È stata ottenuta l'approvazione del Comitato etico del Trabzon Numune Training and Research Hospital. Tutte le procedure eseguite negli studi che coinvolgono partecipanti umani erano conformi agli standard etici del comitato di ricerca istituzionale e/o nazionale e alla dichiarazione di Helsinki del 1964 e ai suoi successivi emendamenti o standard etici comparabili.

I pazienti sono stati divisi in cinque gruppi.

1. Gruppo di controllo: in questo gruppo sono state incluse sette persone sane. Dopo anestesia topica sono stati prelevati circa 0,1 cc di campioni dalla camera anteriore.
2. Gruppo ischemia: sette pazienti con OIS sono stati inclusi in questo gruppo. In anestesia topica, sono stati prelevati campioni da 0,1 cc dall'AC.
3. Gruppo selenio + ischemia: sette pazienti con OIS sono stati inclusi in questo gruppo. I pazienti di questo gruppo sono stati integrati con selenio orale a dosi di 0,1 mg/kg due volte al giorno per un mese. Dopo che il periodo di supplementazione di selenio è stato completato, il campionamento AC come descritto sopra.
4. Gruppo melatonina + ischemia: sette pazienti con OIS sono stati inclusi in questo gruppo. I pazienti di questo gruppo sono stati integrati con dosi orali di melatonina di 0,5 mg/kg/giorno due volte al giorno per un mese. Dopo che l'integrazione è stata completata, il campionamento di 0,1 cc da AC.
5. Gruppo selenio + melatonina + ischemia: sette pazienti con OIS sono stati inclusi in questo gruppo. I pazienti sono stati integrati con selenio e melatonina per un mese come descritto sopra, successivamente prelievo di 0,1 cc da AC.

Per determinare i livelli di AC malondialdeide (MDA), 2,5 ml di 10% TCA (tricholoroessigaurekrist.) sono stati messi in una provetta, sono stati aggiunti 0,1 ml di campione AC dai pazienti. Le provette sono state vorticate e sigillate. L'incubazione è stata applicata per 15 minuti in un bagno d'acqua a 90°C. Sono stati raffreddati in acqua fredda e i loro valori di assorbanza sono stati letti con riferimento al bianco su spettrofotometro a 532 nm. I risultati sono stati presentati come nmol/ml. All'inizio del test, il bianco è stato preparato mettendo la stessa quantità di acqua distillata invece di plasma nella provetta del bianco ed eseguendo le stesse procedure. Per misurare i livelli di glutatione AC (GSH), i campioni AC posti in provette contenenti EDTA sono stati centrifugati a 3000 rpm per 5 minuti. I campioni sono stati lavati 3 volte con soluzione salina allo 0,9% e sono stati ricavati 50 μl di ciascun campione. Successivamente sono stati aggiunti 450μl di acqua distillata e 500μl di acido solfosalicilico al 10%. La miscela è stata raffreddata in ghiaccio per 1 ora e poi centrifugata a 4000 giri per 3 minuti. Successivamente, sono stati derivati ​​200 μl di surnatante e consecutivamente sono stati aggiunti 8 ml di tampone fosfato con pH di 6,8, 78 μl di 1 N NaOH e 100 μl di soluzione di Ellman. Dopo aver atteso 5 minuti, i valori di assorbanza nella provetta del reagente sono stati letti con riferimento all'acqua distillata su spettrofotometro a 412 nm. La soluzione di Ellman è stata preparata sciogliendo 100 mg di acido 5'-5'-ditiobis-2-nitrobenzoico (DTNB) in 100 ml di tampone fosfato pH 7,8. Lo standard di glutatione è stato preparato come 15,34 mg/100 ml sciogliendo 15,34 mg di glutatione ridotto in 100 ml di sodio EDTA 1 nm. I risultati sono stati presentati come mg/dl.