Bestemmelse af fosfatidsyres muskelanabolske egenskaber. (PA-AGE)

Efterforskerne vil rekruttere 16 raske (ikke-overvægtige, ikke-diabetiske, ikke-rygere) ældre mænd i alderen 65-80 år til at gennemføre en dobbeltblindet, paralleldesignet undersøgelse, hvor de vil blive tilfældigt tildelt en fosfatidinsyre (N) = 8; PA) eller placebo (N=8; PL) behandlingsgruppe, nøje matchet for antropometriske karakteristika. Deltagerne vil være rekreativt aktive, men ikke involveret i struktureret træningstræning. Alle undersøgelsesprocedurer vil blive tydeligt forklaret og skriftligt samtykke indhentet før undersøgelsesdeltagelse.

Foreløbige vurderinger Efter forklaring af undersøgelsen og opnåelse af informeret samtykke vil deltagerne rapportere til vores laboratorium kl. 0800 i fastetilstand natten over og have afstået fra anstrengende fysisk aktivitet i >24 timer. Deltagerne bliver vejet på en digital vægt til nærmeste 0,1 kg i let tøj. En dobbelt røntgenabsorptiometri (DXA) scanning vil blive udført for at bestemme kropssammensætning (fedt og fedtfri masse). Efter DXA-scanning vil en-bens en gentagelses maksimal styrke (1RM) blive bestemt for træningsmaskiner til knæforlængelse og benpres. Udvælgelse af det lem, der skal trænes (dominant eller ikke-dominant), vil blive randomiseret.

Eksperimentelle forsøg Mellem 4 og 14 dage efter de foreløbige vurderinger vil deltagerne rapportere til laboratoriet kl. 0700 efter en natfaste, efter at have afholdt sig fra anstrengende fysisk aktivitet i 72 timer tidligere. Et kateter vil blive indsat i en underarmsvene i begge arme til hyppig blodprøvetagning (~80 ml i alt) og en kontinuerlig infusion af en stabil isotop-aminosyresporstof (L-[ring] 13C6 phenylalanin). Deltagerne forbliver i liggende stilling under hele forsøget med undtagelse af træningskampen. Efter 150 minutters steady-state sporstofinfusion vil der blive udtaget en muskelbiopsi fra vastus lateralis quadriceps-muskelen i et tilfældigt udvalgt ben under lokalbedøvelse (1 % lidokain) ved brug af Bergström biopsinåleteknikken. Derefter vil deltagerne udføre en omgang enkeltbens modstandsøvelse på det modsatte ben. Øvelsen vil bestå af 6 sæt knæudvidelsesmodstandsøvelser på 75 % af den forudbestemte 1RM; en protokol designet til at fremkalde 8-12 gentagelser pr. sæt før starten af ​​frivillig træthed. Umiddelbart efter træning vil deltagerne indtage 750 mg PA eller placebo (begge i ikke-identificerbar kapselform) med vand og yderligere 750 mg PA eller placebo 60 minutter efter træning. Derefter vil deltagerne ligge i liggende stilling i resten af ​​forsøget. En person uden direkte undersøgelsesinvolvering vil administrere behandlinger på en dobbeltblind måde. Efterforskere vil blive afblændet til behandlingsarme efter afslutning af dataanalyse. 150 og 300 minutter efter behandlingsforbrug vil der blive udtaget muskelbiopsier fra begge ben. Der vil således blive opnået i alt 5 invasive muskelbiopsier under forsøget, hvilket udelukker brugen af ​​et crossover-design hos ældre individer. Hver biopsi vil blive taget fra et separat snit med en afstand på ~3 cm fra hinanden. Denne model for undersøgelsesdesign vil tillade os at bestemme hastigheder for muskelproteinsyntese i den postabsorptive tilstand og over det tidlige (0-2,5 timer), sene (2,5-5 timer) og samlede (0-5 timer) tidsforløb.

Dataanalyser For at beregne muskelproteinsyntese vil efterforskerne anvende sofistikerede massespektrometriteknikker til at bestemme berigelse af isotopiske sporstoffer i biopsi-isolerede muskelproteiner og plasma. Intramuskulære "anabolske signaler" (i det mekanistiske mål for rapamycin-vejen, en nøgleregulator af cellestørrelse) vil blive bestemt via Western Blot (en teknik til at påvise indholdet af specifikke phospho-proteiner). Plasmainsulinkoncentrationer vil blive målt ved immunoassay og plasmalipidprofiler ved gaskromatografi massespektrometri.