Indflydelse af OCTN2-varianter på carnitinstatus og plasmatriglycerider

Selvom OCTN2 er ret godt undersøgt i dets forhold til SCD, vides der kun lidt om bærerhyppigheden af ​​sygdomsfremkaldende alleler af OCTN2 eller om mere almindelige funktionelle polymorfier i dette gen. For at løse disse problemer screenede vi for genetiske varianter i OCTN2-kodende region ved direkte sekventering af exonerne og den flankerende introniske region af OCTN2 i en stor prøve (n = 276) af etnisk forskellige emner. Derudover etablerede vi lymfoblastoide cellelinjer fra forsøgspersoner, der var homozygote for hver allel af den tidligere identificerede promotorregionvariant, -207G>C. Vi fandt otte aminosyresekvensvarianter af OCTN2, hvoraf tre (Phe17Leu, Leu144Phe og Pro549Ser) var polymorfe i mindst én etnisk gruppe. Når de blev analyseret for funktionel aktivitet ved ekspression i humane embryonale nyre 293-celler under anvendelse af både det endogene substrat (l-carnitin) og den organiske kation-tetraethylammonium som prober, viste tre varianter funktionelle forskelle fra referencen OCTN2 (Phe17Leu, Tyr449Asp, Val481Phe; 0,05). Yderligere undersøgelser af Phe17Leu-polymorfien viste en reduceret V(max) for l-carnitin-transport til ca. 50% af reference-OCTN2. Konfokale mikroskopiundersøgelser under anvendelse af et OCTN2-GFP-fusionsprotein viste, at Phe17Leu havde en særskilt subcellulær lokalisering fra referencen OCTN2 med diffus cytoplasmatisk retention af Phe17Leu i modsætning til reference OCTN2, som lokaliserede specifikt til plasmamembranen. Lymfoblaster fra forsøgspersoner, der var homozygote for -207G-allelen, viste øget l-carnitin-transport sammenlignet med -207C/C-homozygoterne (p < 0,05). Denne undersøgelse tyder på, at selvom tab af funktionsmutationer i OCTN2 sandsynligvis er sjældne, kan almindelige varianter af OCTN2 fundet i raske populationer bidrage til variation i dispositionen af ​​carnitin og nogle klinisk anvendte lægemidler.