Evaluierung eines LAM FLISA zur Diagnose von Tuberkulose (LAM FLISA)

Tuberkulose ist eine bakterielle Infektion, die weltweit jährlich 1,1 Millionen Todesfälle verursacht. Die Diagnose der Krankheit ist oft zeitaufwändig oder schwierig. Viele Tuberkulosefälle erfordern fortschrittliche und teure Diagnosemethoden, deren Verfügbarkeit in Ländern mit begrenzten Ressourcen, in denen die Tuberkulosebelastung am höchsten ist, eingeschränkt ist. Die Entwicklung einer schnellen Point-of-Care-Diagnostik ist erforderlich.

Lipoarabinomannan (LAM) ist Teil der Bakterienzellwand bei M. tuberculosis. Es wird freigesetzt, wenn sich Bakterien vermehren oder absterben. LAM kann im Urin nachgewiesen werden, da es in den Nieren aus dem Blut gefiltert wird. Der Nachweis von LAM im Urin durch herkömmliche ELISA-Techniken (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) wurde in der Vergangenheit durch eine geringe Empfindlichkeit und mehrere Verarbeitungsschritte erschwert. Kürzlich wurde gezeigt, dass der Fluoreszenz-Immunosorbens-Assay (FLISA) LAM in Konzentrationen nachweist, die um mehrere Größenordnungen niedriger sind als mit ELISA-basierten Methoden. Darüber hinaus erfordert das Verfahren weniger separate Schritte zur Verarbeitung der Probe.

Ziel dieser Studie ist die Validierung des neuen Diagnosetests durch den Vergleich von Patienten mit (a) bestätigter Tuberkulose (n=25), (b) Infektion mit nicht-tuberkulösen Mykobakterien (n=25), (c) Bronchialkarzinom (n=25), (d) Verdacht auf Tuberkulose, aber bestätigte Alternativdiagnose (geschätzte n=20). Einzelne Blut- und Urinproben dieser Gruppen werden verwendet, um die Empfindlichkeit und Spezifität des Tests zu bewerten.

Bei Patienten mit bestätigter Tuberkulose wird der LAM FLISA auch als Biomarker zur Überwachung des Tuberkulose-Behandlungserfolgs bewertet. Zunächst sind in der ersten Woche 2–5 Blut- und Urinproben erforderlich, gefolgt von zweimal wöchentlichen und wöchentlichen Probenahmeintervallen über einen Zeitraum von maximal 12 Wochen. Die Studienteilnahme endet mit der Entlassung des Patienten aus dem Krankenhaus.

Als Teilstudie werden die Blutproben zur Auswertung eines Enzymimmunoassays (ELISA) zum Nachweis von Lipidantigenen verwendet, die für Mycobacterium tuberculosis spezifisch sind.