Eine randomisierte, multizentrische, offene, paarweise kontrollierte Crossover-In-vivo-Studie

Für jede der beiden Studienspendenperioden umfasst diese Studie die folgenden Verfahren: Sammlung von Blutplättchen in Einzel- oder Doppeldosis durch Apherese, Pathogeninaktivierung mit der Behandlung mit dem INTERCEPT Blood System, Lagerung für 6 oder 7 Tage (je nach Zeitraum und Randomisierungsschema) bei 20 °C bis 24 °C unter Rühren, Sammlung „frischer“ autologer Blutplättchen, radioaktive Markierung, Infusion frischer und gelagerter, mit dem INTERCEPT Blood System behandelter radioaktiv markierter autologer Blutplättchen und Entnahme von Blutproben zur Beurteilung der Blutplättchenwiederherstellung und des Überlebens (Lebensdauer). Zwischen den beiden Studienperioden liegt eine Auswaschphase von mindestens zwei Wochen.

Apherese-Blutplättchen werden mit dem Amicus-Separator gesammelt und 6 oder 7 Tage lang (je nach Zeitraum und Randomisierungsschema) in 35 % Plasma/65 % InterSol gelagert.

Die Verfahren sind wie folgt: Am Tag 0 werden jedem gesunden freiwilligen Probanden Apherese-Blutplättchen entnommen. Die Behandlung mit dem INTERCEPT Blood System beginnt entweder am Tag der Spende (Tag 0) oder am Tag nach der Spende (Tag 1) und wird innerhalb von 24 Stunden nach der Entnahme abgeschlossen. Die Blutplättchen werden dann nach der Entnahme 6 oder 7 Tage lang (je nach Zeitraum und Randomisierungsschema) bei 22 °C ±2 °C unter Rühren gelagert. Aliquots für die In-vitro-Thrombozytenfunktion werden am Tag 0/1 vor der Behandlung mit dem INTERCEPT Blood System und am Tag 6 oder 7 entnommen. Am Tag 6 oder 7 kehren gesunde Freiwillige zum Standort zurück und es werden 43 ml Blut entnommen Spritze mit 9 ml gerinnungshemmender Citrat-Dextrose-Lösung, Formel A (ACD-A). Aus dieser Probe werden frische Blutplättchen hergestellt. Ein Aliquot (10–20 ml) des gelagerten INTERCEPT Blood Systems für Blutplättchen wird aseptisch aus dem Testbehälter jedes Probanden entnommen.

Zuvor gelagerte (Test) und frische (Kontroll-) Blutplättchen werden entsprechend der Randomisierungszuordnung entweder mit Chrom-51 (51Cr) (≤20 μCi) als Natriumradiochromat (Na251CrO4) oder Indium-111 (111In) (≤15 μCi) radioaktiv markiert Indiumoxin gemäß den von der Biomedical Excellence for Safer Transfusion (BEST) Collaborative beschriebenen Kennzeichnungs- und Waschverfahren. Die Isotopenmarkierungen werden nach dem Zufallsprinzip mit der gleichen Wahrscheinlichkeit zugewiesen, dass frische Blutplättchen und gelagerte Blutplättchen im INTERCEPT Blood System mit jedem Isotop markiert werden. Außerdem wird für beide Spendeperioden für dasselbe Subjekt die gleiche Randomisierungszuordnung von Isotopenmarkierungen verwendet. Aliquots der frischen und gelagerten Blutplättchen werden mit den Standardtechniken in Röhrchen radioaktiv markiert. Nach der radioaktiven Markierung wird dem Probanden gleichzeitig das autologe, frische und gelagerte INTERCEPT Blood System für Blutplättchen infundiert (ca. 10–30 ml). Bei Frauen im gebärfähigen Alter ist vor der Infusion ein negativer Schwangerschaftstest erforderlich.

Blutproben für Radioaktivitätsmessungen werden unmittelbar vor der Infusion und etwa 0, 0,5, 1 und 2 Stunden nach der Infusion entnommen. Anschließend werden 6 weitere Proben am 1., 2., 3., 4. (oder 6.), 7. und 11 ± 1 Tage nach der Infusion, ungefähr zur gleichen Tageszeit, zu der die radioaktiv markierte Blutplättcheninfusion verabreicht wurde (± 4 Stunden).

Die Patienten werden vom Beginn der Studie bis 10 Tage nach der Infusion radioaktiv markierter Blutplättchen in Periode 2 auf Sicherheit (unerwünschte Ereignisse) überwacht.

Radioaktivitätsmessungen: Vor der Infusion werden Proben aus dem radioaktiv markierten frischen und gelagerten INTERCEPT Blood System für Blutplättchen entnommen und als radioaktiver Standard verwendet. Durch Messung des infundierten Volumens wird die Gesamtdosis der infundierten Radioaktivität berechnet. Die In-vitro-Elution der Markierung aus den transfundierten Blutplättchen wird durch die BEST-Elutionsbewertungsmethode bestimmt, ebenso wie die In-vivo-Elution der Radioaktivität aus den seriellen Blutproben, die nach der Infusion der markierten Blutplättchen entnommen werden.

Sowohl die Standard- als auch die Vollblutproben des Probanden werden hinsichtlich der Elution und auch hinsichtlich der Restaktivität in der Zellfraktion einen Tag nach der Infusion korrigiert. Datenpunkte 24 Stunden nach der Infusion werden verwendet, um die In-vivo-Erholung zu berechnen, nachdem alle radioaktiven Korrekturen vorgenommen wurden. Die Radioaktivität der Proben wird mit einem Gammazähler bestimmt. Um das Überleben der radioaktiv markierten Blutplättchen abzuschätzen, wird ein Multiple-Hit-Modell verwendet.