Direktdiagnose der disseminierten Lyme-Borreliose. (DIALYD)

Die Lyme-Borreliose ist eine multisystemische bakterielle Infektion, die Haut, Gelenke und das Nervensystem befällt. Es hat sich gezeigt, dass die Haut eine wesentliche Schnittstelle als Ort der Bakterieninokulation und -vermehrung ist. Bei Mäusen, die akut mit verschiedenen Borrelia-Arten infiziert waren, haben die Forscher mehrere Proteinmarker einer aktiven Infektion in der Haut durch Discovery Proteomics entdeckt, was es uns ermöglichte, einen anschließenden gezielten Proteomics-Assay zu entwerfen. Die Prüfärzte testeten die gleichen Techniken bei Hautbiopsien von Menschen, die sich mit einem Erythema migrans vorstellten. Die meisten der zuvor in der Haut infizierter Mäuse identifizierten bakteriellen Proteine ​​wurden auch in Biopsien menschlicher Hautläsionen nachgewiesen.

Die Diagnose einer disseminierten Lyme-Borreliose stützt sich derzeit hauptsächlich auf auffällige klinische Symptome zusammen mit einer positiven Borrelien-Serologie. Ein positiver serologischer Test beweist jedoch keine aktive Infektion, sondern spiegelt lediglich die in Endemiegebieten recht häufige Exposition gegenüber dem Erreger wider und hat somit keinen positiven Vorhersagewert. Darüber hinaus mangelt es den direkten bakteriologischen Diagnoseinstrumenten wie Kultur und Nukleinsäureamplifikation (PCR) derzeit an Empfindlichkeit. In der Absicht, die Fähigkeit der Proteomik zur Unterstützung der Diagnose von disseminierter Lyme-Borreliose zu testen, haben wir zunächst ein Modell der späten Infektion bei der Maus entwickelt und die Identifizierung mehrerer bakterieller Proteine ​​als Marker für eine anhaltende Infektion in der Maushaut erreicht.

Die Forscher wollen nun untersuchen, ob die Haut bei anhaltender disseminierter Infektion auch beim Menschen ein Reservoir für diese Bakterien darstellt und ob sie in diesem leicht zugänglichen Gewebe bakterielle Proteine ​​auf die gleiche Weise nachweisen können. Sie werden direkt nach bakteriellen Proteinen durch ausgewählte Reaktionsüberwachungs-Massenspektrometrie (SRM-MS) suchen, die Methode, die erfolgreich im frühen Infektionsumfeld eingesetzt wird. Die Fähigkeit, Borrelienproteine ​​in Synovialflüssigkeit (Patienten mit Lyme-Arthritis), Zerebrospinalflüssigkeit (Patienten mit Lyme-Neuroborreliose) oder Hautläsionen (Patienten mit Acrodermatitis chronica atrophicans) nachzuweisen, wird gegebenenfalls ebenfalls untersucht.

Um den Nachweis von Borrelia-Proteinen in gesund aussehender Haut zu verbessern, wird vorab ein Dermocorticoid für eine kurze 2-tägige Kur aufgetragen, ein Verfahren, das die Forscher bei Mäusen als nützlich und sicher erwiesen haben. Da Zeckenstiche hauptsächlich im unteren Teil des Körpers auftreten, wird der obere Teil des Oberschenkels der Ort der topischen Anwendung von Steroiden und der Hautbiopsie sein.

Die Proteomik-Ausbeute wird mit den beiden anderen Hauptmethoden des direkten Nachweises, d. h. Kultur und PCR, verglichen.