Diagnóstico Direto da Borreliose de Lyme Disseminada. (DIALYD)

A borreliose de Lyme é uma infecção bacteriana multissistêmica que afeta a pele, as articulações e o sistema nervoso. Foi demonstrado que a pele é uma interface essencial como local de inoculação e multiplicação de bactérias. Em camundongos infectados agudamente com diferentes espécies de Borrelia, os investigadores detectaram vários marcadores proteicos de infecção ativa na pele por descoberta de proteômica, o que nos permitiu projetar um ensaio de proteômica direcionado subsequente. Os investigadores testaram as mesmas técnicas em biópsias de pele de humanos apresentando eritema migratório. A maioria das proteínas bacterianas previamente identificadas na pele de camundongos infectados também foram detectadas em biópsias de pele lesional humana.

Atualmente, o diagnóstico da borreliose de Lyme disseminada baseia-se principalmente em sintomas clínicos evocativos, juntamente com uma sorologia positiva para Borrelia. No entanto, um teste sorológico positivo não prova uma infecção ativa, mas apenas reflete a exposição ao patógeno, que é bastante comum em regiões endêmicas e, portanto, carece de valor preditivo positivo. Além disso, ferramentas de diagnóstico bacteriológico direto, como cultura e amplificação de ácido nucleico (PCR), atualmente carecem de sensibilidade. Planejando testar a capacidade da proteômica para auxiliar no diagnóstico da borreliose de Lyme disseminada, primeiro desenvolvemos um modelo de infecção tardia em camundongos e conseguimos a identificação de várias proteínas bacterianas como marcadores de infecção em andamento na pele murina.

Os pesquisadores agora querem investigar se a pele também constitui um reservatório para essas bactérias durante a infecção disseminada persistente em humanos e se podem detectar proteínas bacterianas nesse tecido facilmente acessível pela mesma abordagem. Eles procurarão diretamente por proteínas bacterianas por espectrometria de massa de monitoramento de reação selecionada (SRM-MS), o método empregado com sucesso no cenário de infecção precoce. A capacidade de detectar proteínas borreliais no líquido sinovial (pacientes com artrite de Lyme), líquido cefalorraquidiano (pacientes com neuroborreliose de Lyme) ou pele lesional (pacientes com acrodermatite crônica atrófica) também será investigada, conforme apropriado.

Para melhorar a detecção de proteínas de Borrelia em pele de aparência saudável, um dermocorticóide será previamente aplicado por um curto período de 2 dias, um procedimento que os investigadores demonstraram ser útil e seguro em camundongos. Como a picada do carrapato ocorre principalmente na parte inferior do corpo, a parte superior da coxa será o local de aplicação de esteroides tópicos e biópsia de pele.

O rendimento proteômico será comparado aos dois principais outros métodos de detecção direta, ou seja, cultura e PCR.