Direkt diagnos av disseminerad borrelia. (DIALYD)

Lyme borrelios är en multisystemisk bakteriell infektion som påverkar huden, leden och nervsystemet. Det har visat sig att huden är ett viktigt gränssnitt som en plats för inokulering och förökning av bakterier. Hos mus som är akut infekterade med olika Borrelia-arter har forskarna upptäckt flera proteinmarkörer för aktiv infektion i huden genom upptäcktsproteomik, vilket gjorde det möjligt för oss att utforma en efterföljande målinriktad proteomikanalys. Invcestigators testade samma tekniker i hudbiopsier av människor som uppvisar en erythema migrans. De flesta av de bakteriella proteiner som tidigare identifierats i huden på infekterade möss detekterades också i biopsier av mänsklig lesional hud.

Diagnosen av spridd borrelia bygger för närvarande huvudsakligen på suggestiva kliniska symtom tillsammans med en positiv Borrelia-serologi. Ett positivt serologiskt test bevisar dock inte en aktiv infektion utan återspeglar bara exponering för patogenen, som är ganska vanlig i endemiska regioner och därför saknar positivt prediktivt värde. Dessutom saknar direkta bakteriologiska diagnosverktyg som odling och nukleinsyraamplifiering (PCR) för närvarande känslighet. Planerar att testa förmågan hos proteomik att hjälpa till vid diagnosen av spridd borrelios, har vi först utvecklat en modell för sen infektion hos mus, och uppnått identifieringen av flera bakteriella proteiner som markörer för pågående infektion i murin hud.

Utredarna vill nu undersöka om huden också utgör en reservoar för dessa bakterier vid ihållande spridd infektion hos människor, och om de kan upptäcka bakteriella proteiner i denna lättillgängliga vävnad med samma tillvägagångssätt. De kommer direkt att leta efter bakteriella proteiner genom utvald reaktionsövervakning-masspektrometri (SRM-MS), metoden som framgångsrikt används i tidig infektionsmiljö. Förmågan att upptäcka borrelialproteiner i ledvätska (patienter med borrelia-artrit), cerebrospinalvätska (patienter med borrelia-neuroborrelios) eller lesional hud (patienter med acrodermatitis chronica atrophicans) kommer också att undersökas, allt efter behov.

För att förbättra upptäckten av Borrelia-proteiner i frisk hud, kommer en dermokortikoid att appliceras i förväg för en kort 2-dagars kurs, en procedur som utredarna visade både användbar och säker på möss. Eftersom fästingbett huvudsakligen förekommer i den nedre delen av kroppen, kommer den övre delen av låret att vara platsen för lokal applicering av steroider och hudbiopsi.

Utbytet av proteomik kommer att jämföras med de två huvudsakliga andra metoderna för direkt detektion, dvs odling och PCR.