Diagnosi diretta della borreliosi di Lyme disseminata. (DIALYD)

La borreliosi di Lyme è un'infezione batterica multisistemica che colpisce la pelle, le articolazioni e il sistema nervoso. È stato dimostrato che la pelle è un'interfaccia essenziale come sito di inoculazione e moltiplicazione dei batteri. Nel topo acutamente infettato da diverse specie di Borrelia, i ricercatori hanno rilevato diversi marcatori proteici di infezione attiva nella pelle mediante scoperta proteomica, che ci ha permesso di progettare un successivo test di proteomica mirato. Gli investigatori hanno testato le stesse tecniche nelle biopsie cutanee di esseri umani che presentavano un eritema migrante. La maggior parte delle proteine ​​batteriche precedentemente identificate nella pelle dei topi infetti sono state rilevate anche nelle biopsie della pelle umana lesionata.

La diagnosi di borreliosi di Lyme disseminata attualmente si basa principalmente su sintomi clinici suggestivi insieme a una sierologia positiva per Borrelia. Tuttavia, un test sierologico positivo non dimostra un'infezione attiva ma riflette semplicemente l'esposizione al patogeno, che è abbastanza comune nelle regioni endemiche e quindi privo di valore predittivo positivo. Inoltre, gli strumenti di diagnosi batteriologica diretta come la coltura e l'amplificazione dell'acido nucleico (PCR) attualmente mancano di sensibilità. Pianificando di testare la capacità della proteomica di assistere nella diagnosi della borreliosi di Lyme disseminata, abbiamo prima sviluppato un modello di infezione tardiva nel topo e ottenuto l'identificazione di diverse proteine ​​​​batteriche come marcatori di infezione in corso nella pelle murina.

I ricercatori ora desiderano indagare se la pelle costituisce anche un serbatoio per questi batteri durante l'infezione disseminata persistente negli esseri umani e se possono rilevare le proteine ​​batteriche in questo tessuto facilmente accessibile con lo stesso approccio. Cercheranno direttamente le proteine ​​​​batteriche mediante spettrometria di massa di monitoraggio della reazione selezionata (SRM-MS), il metodo impiegato con successo nel contesto dell'infezione precoce. Verrà anche studiata la capacità di rilevare le proteine ​​borreliosi nel liquido sinoviale (pazienti con artrite di Lyme), nel liquido cerebrospinale (pazienti con neuroborreliosi di Lyme) o nella pelle lesionata (pazienti con acrodermatite cronica atrofica), a seconda dei casi.

Per migliorare l'individuazione delle proteine ​​di Borrelia in una pelle dall'aspetto sano, un dermocorticoide verrà preliminarmente applicato per un breve corso di 2 giorni, una procedura che i ricercatori hanno dimostrato sia utile che sicura nei topi. Poiché la puntura di zecca si verifica principalmente nella parte inferiore del corpo, la parte superiore della coscia sarà il sito di applicazione di steroidi topici e biopsia cutanea.

La resa proteomica sarà confrontata con i due principali altri metodi di rilevamento diretto, ovvero coltura e PCR.