Diagnóstico directo de la borreliosis de Lyme diseminada. (DIALYD)

La borreliosis de Lyme es una infección bacteriana multisistémica que afecta a la piel, las articulaciones y el sistema nervioso. Se ha demostrado que la piel es una interfaz esencial como sitio de inoculación y multiplicación de bacterias. En ratones infectados de forma aguda con diferentes especies de Borrelia, los investigadores han detectado varios marcadores proteicos de infección activa en la piel mediante el descubrimiento de proteómica, lo que nos permitió diseñar un ensayo proteómico dirigido posterior. Los investigadores probaron las mismas técnicas en biopsias de piel de humanos que presentaban eritema migratorio. La mayoría de las proteínas bacterianas previamente identificadas en la piel de ratones infectados también se detectaron en biopsias de piel lesionada humana.

Actualmente, el diagnóstico de la borreliosis de Lyme diseminada se basa principalmente en síntomas clínicos evocadores junto con una serología positiva para Borrelia. Sin embargo, una prueba serológica positiva no prueba una infección activa, sino que simplemente refleja la exposición al patógeno, que es bastante común en regiones endémicas y, por lo tanto, carece de valor predictivo positivo. Además, las herramientas de diagnóstico bacteriológico directo, como el cultivo y la amplificación de ácidos nucleicos (PCR), actualmente carecen de sensibilidad. Planeando probar la capacidad de la proteómica para ayudar en el diagnóstico de la borreliosis de Lyme diseminada, primero desarrollamos un modelo de infección tardía en ratones y logramos la identificación de varias proteínas bacterianas como marcadores de infección en curso en la piel murina.

Los investigadores ahora desean investigar si la piel también constituye un reservorio para estas bacterias durante la infección diseminada persistente en humanos, y si pueden detectar proteínas bacterianas en este tejido de fácil acceso mediante el mismo enfoque. Buscarán directamente proteínas bacterianas mediante espectrometría de masas de monitoreo de reacción seleccionada (SRM-MS), el método empleado con éxito en el entorno de infección temprana. También se investigará la capacidad de detectar proteínas borrelias en líquido sinovial (pacientes con artritis de Lyme), líquido cefalorraquídeo (pacientes con neuroborreliosis de Lyme) o piel lesionada (pacientes con acrodermatitis crónica atrófica), según corresponda.

Para mejorar la detección de proteínas de Borrelia en una piel de aspecto saludable, se aplicará previamente un dermocorticoide durante un ciclo corto de 2 días, un procedimiento que los investigadores demostraron que es útil y seguro en ratones. Dado que la picadura de garrapata ocurre principalmente en la parte inferior del cuerpo, la parte superior del muslo será el sitio de aplicación de esteroides tópicos y biopsia de piel.

El rendimiento proteómico se comparará con los otros dos métodos principales de detección directa, es decir, cultivo y PCR.