Bezpośrednia diagnostyka rozsianej boreliozy z Lyme. (DIALYD)

Borelioza z Lyme jest wieloukładową infekcją bakteryjną atakującą skórę, stawy i układ nerwowy. Wykazano, że skóra jest istotnym interfejsem jako miejsce inokulacji i namnażania bakterii. U myszy ostro zakażonych różnymi gatunkami Borrelia badacze wykryli kilka markerów białkowych aktywnego zakażenia w skórze za pomocą proteomiki odkrywczej, co pozwoliło nam zaprojektować kolejny ukierunkowany test proteomiczny. Badacze przetestowali te same techniki w biopsjach skóry ludzi z rumieniem wędrującym. Większość białek bakteryjnych zidentyfikowanych wcześniej w skórze zakażonych myszy wykryto również w biopsjach ludzkiej skóry ze zmianami chorobowymi.

Rozpoznanie rozsianej boreliozy z Lyme opiera się obecnie głównie na sugestywnych objawach klinicznych oraz dodatnim wyniku serologicznym w kierunku Borrelii. Jednak pozytywny wynik testu serologicznego nie dowodzi aktywnej infekcji, a jedynie odzwierciedla ekspozycję na patogen, który jest dość powszechny w regionach endemicznych i dlatego nie ma pozytywnej wartości predykcyjnej. Co więcej, narzędzia do bezpośredniej diagnostyki bakteriologicznej, takie jak hodowla i amplifikacja kwasu nukleinowego (PCR), obecnie nie są czułe. Planując przetestować zdolność proteomiki do pomocy w diagnozowaniu rozsianej boreliozy z Lyme, najpierw opracowaliśmy model późnej infekcji u myszy i osiągnęliśmy identyfikację kilku białek bakteryjnych jako markerów trwającej infekcji w mysiej skórze.

Badacze chcą teraz zbadać, czy skóra stanowi również rezerwuar tych bakterii podczas uporczywej, rozsianej infekcji u ludzi i czy mogą wykryć białka bakteryjne w tej łatwo dostępnej tkance za pomocą tego samego podejścia. Będą bezpośrednio poszukiwać białek bakteryjnych za pomocą wybranej spektrometrii mas z monitorowaniem reakcji (SRM-MS), metody z powodzeniem stosowanej we wczesnych fazach infekcji. Zdolność do wykrywania białek borelialnych w płynie maziowym (pacjenci z zapaleniem stawów z Lyme), płynie mózgowo-rdzeniowym (pacjenci z neuroboreliozą z Lyme) lub zmienionej skórze (pacjenci z acrodermatitis chronica atrophicans) będzie również badana, w zależności od potrzeb.

Aby poprawić wykrywanie białek Borrelii w zdrowo wyglądającej skórze, dermokortykosteroid zostanie wstępnie zastosowany na krótki 2-dniowy cykl, co badacze wykazali zarówno jako użyteczną, jak i bezpieczną procedurę na myszach. Ponieważ ugryzienie przez kleszcza występuje głównie w dolnej części ciała, górna część uda będzie miejscem miejscowej aplikacji sterydów i biopsji skóry.

Wydajność proteomiki zostanie porównana z dwoma innymi głównymi metodami detekcji bezpośredniej, tj. hodowlą i PCR.