Periimplantitis und MMP-8

Zahnimplantate sind in den letzten Jahrzehnten zu einem festen Bestandteil der modernen Zahnheilkunde geworden. Seit der Entdeckung der Osseointegration (der Prozess der Eingliederung eines Implantats in den Kieferknochen) hat die Implantologie im Laufe der Zeit erhebliche Fortschritte gemacht. Zahnimplantate bestehen aus einem enossalen Teil aus Titan und einem externen prothetischen Teil, der die Rehabilitation zahnloser Patienten unterstützt. Sie bieten Patienten, denen ein oder mehrere Zähne fehlen, die Möglichkeit, maximale funktionelle und ästhetische Ergebnisse zu erzielen, ohne auf den unangenehmen traditionellen Zahnersatz zu verzichten. Die Implantatindustrie wächst allmählich. Insgesamt wurde der globale Markt für Zahnimplantate im Jahr 2016 auf 2,91 Milliarden US-Dollar geschätzt, wobei in den USA jährlich mehr als 8,809 Millionen Implantate eingesetzt wurden (1). Die Prävalenz biologischer Komplikationen bei implantatgetragenen Restaurationen nimmt jedoch in gleichem Maße zu (1).

Der Begriff „Periimplantitis“ wurde 1994 auf dem 1. Europäischen Workshop für Parodontologie eingeführt und seitdem wurden zahlreiche Definitionen vorgeschlagen, um den Knochenverlust zu beschreiben, der die Nachwirkungen der Implantatinsertion charakterisiert (2,3). Periimplantitis und periimplantäre Mukositis werden unter dem Begriff periimplantäre Erkrankungen zusammengefasst und gelten als Analogon zu parodontalen Erkrankungen (4). Derzeit wird Periimplantitis als pathologischer Zustand um Zahnimplantate definiert, der durch eine Entzündung der periimplantären Schleimhaut und fortschreitenden Knochenschwund gekennzeichnet ist und schließlich das Schicksal des Implantats gefährdet (5). Die Zahl der Studien zur Periimplantitis ist laut PubMed in den letzten 30 Jahren von 86 Arbeiten in den 90er Jahren auf insgesamt 1938 Manuskripte bis heute gestiegen (1). Auch die Prävalenz der Periimplantitis zeigt steigende Raten. Zitzman und Berglundh berichteten 2008 in einer systematischen Übersichtsarbeit von einer Prävalenz zwischen 12 und 56 % (3). Neuere Studien zeigen eine Prävalenz von 22 % (1–47 %) (6), 20 % (7), 26 % (8) und 28 % (9). Es sollte darauf hingewiesen werden, dass in den bisherigen Studien die genaue Prävalenz der Krankheit schwer abzuschätzen ist und von mehreren Faktoren abhängt, einschließlich der diagnostischen Kriterien der Krankheit und des für die Bewertung gewählten Zeitpunkts (10). Es ist jedoch offensichtlich, dass Periimplantitis ein wachsendes Problem in der Implantologie ist und sicherlich Gegenstand vieler zukünftiger Studien sein wird.

Für die Behandlung von Periimplantitis wurden mehrere Protokolle vorgeschlagen, darunter nicht-chirurgische Protokolle mit Implantat-Dekontaminationsgeräten und Lasern und chirurgische Protokolle wie die Verwendung von regenerativen Materialien (11,12) . Wenn jedoch eine Periimplantitis bereits etabliert ist, können die vorgeschlagenen Strategien und Empfehlungen für ihre Behandlung immer noch als empirisch angesehen werden. Aus der vorhandenen Evidenz geht hervor, dass eine nichtoperative Therapie nicht wirksam ist, zumindest nicht in fortgeschrittenen Fällen. Möglicherweise sind chirurgische Techniken erforderlich, um uns einen angemessenen Zugang zu verschaffen, um das entzündete Gewebe effektiv zu degranulieren und die Implantatoberfläche zu dekontaminieren (13).

Der Konsensbericht der Arbeitsgruppe 4 des World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions 2017 kam zu dem Schluss, dass Periimplantitis ein entzündlicher Prozess mikrobiellen Ursprungs ist, der Knochenschwund verursacht (4). Darüber hinaus wurden mehrere Risikofaktoren als potenzielle Co-Treiber in dieser Entität vorgeschlagen, darunter Parodontitis in der Anamnese, Rauchen, Diabetes und schlechte Plaquekontrolle (5). Auch Faktoren wie die genetische Veranlagung und die Freisetzung von Titanpartikeln wurden als potenzielle Risikofaktoren angegeben (14). Die mikrobielle Beteiligung an der Entstehung und dem Fortschreiten der Periimplantitis wurde nachgewiesen, neuere Studien deuten jedoch darauf hin, dass die Periimplantitis das Ergebnis einer Fremdkörperreaktion sein kann, was die Rolle der Wirtsreaktion bei der Entstehung der Krankheit betont. (15). Mit anderen Worten, die Ätiologie der Krankheit muss noch aufgeklärt werden. Unter Verwendung herkömmlicher DNA-Sonden- und Kulturanalysen wurden jedoch häufige parodontopathogene Bakterien sowohl an gesunden als auch an erkrankten Implantationsstellen isoliert (16), und die Verteilung der nachgewiesenen Arten unterschied sich nicht merklich je nach klinischem Implantationsstatus (17). Im Vergleich zu gesunden Implantationsstellen allein war die Periimplantitis jedoch mit einer höheren Anzahl von Bakterienarten verbunden, die als Parodontalpathogene angesehen werden, darunter Porphyromonas gingivalis und Tannerella forsythia (18). Darüber hinaus haben Beobachtungsstudien gezeigt, dass Periimplantitis häufiger mit opportunistischen Krankheitserregern wie Pseudomonas aeruginosa und Staphylococcus aureus (19,20) Pilzorganismen (z. Candida albicans, Candida boidinii, Penicillum spp., Rhadotorula laryngis, Paelicomyces spp.)(21,22) und Viren (z.B. humanes Cytomegalovirus, Epstein-Barr-Virus), (23), was auf eine ziemlich komplexe und heterogene Infektion hinweist. Daher ist die Erkennung der genauen bakteriellen Zusammensetzung periimplantärer Läsionen von größter Bedeutung.

Eine wichtige Beobachtung bei Implantatversagen ist, dass normalerweise eine kleine Anzahl von Patienten viele Implantate verliert. Dieses Clusterbildungsphänomen wurde in vielen Studien identifiziert (24,25). Weyant und seine Kollegen untersuchten die Überlebensrate von Implantaten bei 598 Patienten und stellten fest, dass mehr als die Hälfte der Fälle, die mehrere Implantate erhielten, mehr als ein Versagen aufwiesen. Sie schätzten, dass Patienten, bei denen ein Implantat verloren ging, mit 1,3-facher Wahrscheinlichkeit weitere Implantate verloren (26). Diese Ergebnisse führten zu der Hypothese, dass Wirtsfaktoren das Implantatüberleben beeinflussen und daher die genetische Veranlagung eine wichtige Rolle bei der Entwicklung einer Periimplantitis spielen könnte. Viele Genpolymorphismen wurden evaluiert. Anfangs bezogen sich die meisten Studien auf Polymorphismen von Zytokinen, die eine Schlüsselrolle in der Immunantwort spielen (27-29), wie die Interleukine IL-1α, IL-1β und ihre Antagonistenproteine ​​IL-1ra, IL-6, IL-10, IL-17, TNF-α und transformierender Wachstumsfaktor-β1 (TGF-β1). Abgesehen von diesen wurden verschiedene andere Gene untersucht, z. Gene, die für CD14 codieren, Rezeptoraktivator des Nuklearfaktor-kappa-B-Liganden (RANKL), microRNAs, knochenmorphogenetische Proteine ​​(BMPs), Fibroblasten-Wachstumsfaktor (FGF), TRAF-Familienmitglied-assoziierter NF-kappa-β-Aktivator (TANK), Serin/Threonin -Proteinkinase B-Raf (BRAF), Calcitonin-Rezeptor (CTR), Haptoglobin. Die Ergebnisse der oben genannten Studien weisen viele Diskrepanzen auf. Einigen gelang es, mögliche Assoziationen zu erkennen, anderen nicht. Ein neuerer Genpolymorphismus, der in genetischen Studien erwähnt wird, ist der der Cyclooxygenase-2 (COX-2). Es wurde gezeigt, dass ein einzelner Nukleotidpolymorphismus von COX-2 die Expression des COX-2-Gens verändert. Mehrere Studien haben einen Zusammenhang zwischen COX-2-Genpolymorphismen und Parodontitis festgestellt (30-32). Im Fall von Periimplantitis sind jedoch Daten rar.

Die Diagnose einer Periimplantitis basiert auf traditionellen klinischen Indizes, ähnlich der Beurteilung einer Parodontitis. Insbesondere wird die Diagnose durch das Vorhandensein von Blutungen und/oder Eiterungen bei vorsichtiger Sondierung, einer erhöhten Sondierungstiefe im Vergleich zu früheren klinischen Untersuchungen und dem Vorhandensein von Knochenverlust über Veränderungen des krestalen Knochenniveaus hinaus, die aus dem anfänglichen Knochenumbau resultieren, gestellt (4). Jüngste Studien stellen jedoch die diagnostische Genauigkeit klinischer Indizes als solche in Frage und unterstützen, dass die Diagnose der Krankheit weitaus komplexer ist (33). In dieser Hinsicht wurden neue diagnostische Methoden verwendet, um eine frühe und korrekte Diagnose der Krankheit zu erreichen (34). Ein Biomarker oder biologischer Marker ist ein messbarer Indikator für einen biologischen Zustand oder Zustand. Biomarker werden häufig gemessen und ausgewertet, um normale biologische Prozesse, pathogene Prozesse oder pharmakologische Reaktionen auf einen therapeutischen Eingriff zu untersuchen, und sind bei der Diagnose und Prognose einer Krankheit nützlich. Im Fall von Periimplantitis wurden mehrere biologische Moleküle als potenzielle Biomarker zur Unterstützung der Diagnose der Krankheit bewertet. Moleküle wie TNF-a, IL-1, RANKL wurden in einer Vielzahl von Studien mit Periimplantitis in Verbindung gebracht (34). In letzter Zeit hat die Matrix-Metalloproteinase 8 (MMP-8), insbesondere in ihrer aktiven Form (aMMP-8), viel Aufmerksamkeit auf sich gezogen, da sie ein vielversprechender Biomarkerkandidat für die Diagnose und Beurteilung des Fortschreitens und Verlaufs dieser episodischen oralen entzündlichen gewebezerstörenden und degenerativen Erkrankungen wurde ( 35,36).

Alles in allem ist die Periimplantitis eine komplizierte Erkrankung mit hoher Prävalenz in der Bevölkerung. Zudem sind die aktuellen Daten zur Ätiologie und Diagnose der Erkrankung umstritten.

ZIELE DES VORSCHLAGS, STAND DER TECHNIK UND HERAUSFORDERUNGEN

1. Die Beziehung zwischen Periimplantitis und COX-2-Genpolymorphismen ansprechen, da es keine ähnlichen Studien in der Literatur gibt.
2. Identifizierung der pathogenen Mikrobiota, die mit der Krankheit assoziiert sind, unter Verwendung neuartiger bakterieller Identifizierungsmethoden.
3. Bewertung der diagnostischen Genauigkeit eines aMMP-8 Point-of-Care Chair-Side-Tests bei Periimplantitis.

Die Gründe für die Untersuchung jedes der untersuchten Ziele werden in einem separaten Abschnitt analysiert.

- Polymorphismen des COX-2-Gens. Die genetische Veranlagung gilt wie bereits erwähnt als potenzieller Risikofaktor für eine Periimplantitis. Ein Einzelnukleotidpolymorphismus (SNP) ist eine einzelne Nukleotidvariation an einer bestimmten Position des Genoms. Jede Variation tritt in einem nennenswerten Ausmaß innerhalb einer Population auf. SNPs können innerhalb von kodierenden und nichtkodierenden Gensequenzen oder in den intergenischen Regionen vorkommen. In Anbetracht der Degeneration des genetischen Codes kann SNP innerhalb einer codierenden Sequenz die Aminosäuresequenz des codierenden Polypeptids (nicht-synonymes SNP) verändern oder die Proteinsequenz nicht beeinflussen (synonymes SNP). SNPs außerhalb der proteinkodierenden Regionen können die Genexpression dennoch regulieren, indem sie die Transkriptionsfaktorbindung, das Genspleißen, den mRNA-Abbau oder die Sequenz nichtkodierender RNA beeinflussen. Daher unterliegen SNPs Unterschieden in unserer Anfälligkeit für Krankheiten. SNPs von entzündlichen Zytokin-Genen können ihre Expressionsniveaus oder Aminosäuresequenz und folglich die Entzündungsreaktion des Wirts beeinflussen.

COX-2 wandelt Arachidonsäure in Prostaglandin H2 um, das die Vorstufe von Prostaglandin E2 ist. Prostaglandin E2, das in vielen Geweben proinflammatorische und antiinflammatorische Reaktionen vermittelt (37), ist auch mitverantwortlich für die aktivierenden Prozesse bei der Resorption des Alveolarknochens während der Pathogenese der Parodontitis. Assoziationen des Cyclooxygenase-2(COX-2)-Gens mit Parodontitis wurden zuerst in taiwanesischen und chinesischen Fall-Kontroll-Populationen identifiziert (30,31) und anschließend in einer nordwesteuropäischen Population validiert. Studien mit dem COX-2-Gen als solche wurden bei Periimplantitis noch nicht durchgeführt. Jüngste Studien zur Genexpression haben jedoch eine erhöhte Aktivität des COX-2-Signalwegs im Fall von Periimplantitis gezeigt (38,39), was impliziert, dass COX-2 eine wichtige Rolle bei der Pathogenese von Periimplantitis spielen könnte. Die Assoziation von Periimplantitis mit bestimmten Genpolymorphismen wird ein besseres Verständnis der Krankheit ermöglichen und zu effektiveren Präventions- und Behandlungsstrategien führen.

• Mit Periimplantitis assoziierte mikrobielle Faktoren Aktuelle Daten bestätigen, dass periimplantäre Infektionen von gramnegativen Bakterien dominiert werden, ähnlich wie parodontale Infektionen, aber einige Fälle können eine unterschiedliche Mikrobiota beherbergen (20,40,41). Obwohl frühe Berichte Ähnlichkeiten zwischen der periimplantären und parodontalen Flora zeigten, zeigten spätere Studien, dass Periimplantitis-Läsionen nicht nur parodontale Pathogene, sondern auch opportunistische Mikroorganismen wie S. aureus, S. anaerobius, Escherichia coli, Candida und Streptokokken enthalten können spp (18). Darüber hinaus haben Sequenzierungsmethoden auch andere nicht kultivierbare Mikroorganismen entdeckt, die mit periimplantären Erkrankungen assoziiert sind. Asaccharolytische anaerobe grampositive Stäbchen (AAGPR) wie Eubacterium nodatum, Eubacterium brachy, Slackia exigua, Gemella sanguinis und anaerobe gramnegative Stäbchen (OGNR) wie Mitsuokella sp., Treponema lecithinolyticum wurden identifiziert (42). Die Diskrepanzen zwischen diesen Studien können sich aus den unterschiedlichen Methoden ergeben, die für die mikrobiologische Probenahme und Verarbeitung verwendet werden (43). Das mikrobiologische Profil periimplantärer Erkrankungen bleibt ein Thema von Interesse, und es wurden viele Untersuchungen und Übersichten durchgeführt, um festzustellen, ob sich die Mikrobiota von der einer Parodontitis unterscheidet; Es bestehen jedoch weiterhin Kontroversen. Die neuesten Studien kommen zu dem Schluss, dass es keine ausreichenden Beweise gibt, um die unterschiedliche Mikrobiota zwischen periimplantären und parodontalen Erkrankungen zu unterstützen (44,45), während andere angeben, dass es sich in Bezug auf das mikrobiologische Profil um unterschiedliche Einheiten handeln könnte (43). Daher müssen weitere Studien durchgeführt werden, um das mikrobiologische Profil von periimplantären Geweben zu definieren. Neueste Technologien wie die Shotgun-Sequenzierung des gesamten Genoms von Bakterien, die an Periimplantitis beteiligt sind, wären für diesen Zweck sehr nützlich, aber bisher wurden keine derartigen Forschungsergebnisse veröffentlicht. Daher wird in dieser Studie Next Generation Sequencing verwendet, um die eitrigsten Mikrobiota zu identifizieren, die mit der Krankheit in Verbindung gebracht werden. Die 16s-rRNA-Sequenzierung wird die Charakterisierung der gesamten taxonomischen Identität der periimplantären Läsionen ermöglichen.
• Diagnostische Genauigkeit des ImplantSafe MMP-8 Biomarker-Tests. Neutrophilen-Kollagenase, auch als Matrix-Metalloproteinase (MMP)-8, polymorphkernige (PMN) Leukozyten-Kollagenase oder Kollagenase-2 bezeichnet, wurde als ein wichtiges kollagenolytisches Enzym identifiziert und charakterisiert, das bei Parodontitis und Parodontitis eine aktive parodontale und periimplantäre Degeneration (APD) verursacht Periimplantitis (46,47). MMP-8 kann entzündliche und immunologische Kaskaden auflösen und regulieren, indem es bioaktive Nicht-Matrix-Substrate wie Chemokine, Zytokine, Serpine und Komplementkomponenten verarbeitet. Physiologische Spiegel von MMP-8 können schützende und defensive entzündungshemmende Eigenschaften ausüben (48). Erhöhte Konzentrationen von besonders aktivem MMP-8 (aMMP-8), aber nicht der latenten, inaktiven Proform, wurden in von Parodontitis und Periimplantitis betroffenen Mundflüssigkeiten (Speichel, Mundspülung, Gingiva-Crevicular-Flüssigkeit (GCF) und periimplantäre Sulkusflüssigkeit (PISF)) (49). Ein Schlüsselmerkmal aktiver parodontaler und periimplantärer Erkrankungen ist die anhaltende pathologische Erhöhung und Aktivierung von aMMP-8 in parodontalen und periimplantären Geweben, die sich in oralen Flüssigkeiten widerspiegeln (50). Folglich ist aMMP-8 ein vielversprechender Biomarkerkandidat für die Diagnose und Beurteilung des Fortschreitens und Verlaufs dieser episodischen oralen entzündlichen gewebezerstörenden und degenerativen Erkrankungen (46). Noch wichtiger ist, dass aMMP-8 in Mundflüssigkeiten auch als prädiktives und präventives ergänzendes biotechnologisches Instrument dienen kann, um präventive Interventionen (Sekundärprävention oder unterstützende parodontale/periimplantäre Therapie (51,52) anzuzeigen (49,50) und zu hemmen oder zu reduzieren die Umwandlung von Gingivitis und Mukositis in Parodontitis bzw. Periimplantitis.

Kürzlich wurden Lateral-Flow Point-of-Care (PoC)/Chair-Side-Tests (PerioSafe und ImplantSafe), die in Finnland entdeckt und in Deutschland weiterentwickelt wurden (53), entwickelt, basierend auf zuvor beschriebenen Technologien und monoklonalen Antikörpern (53, 54). Die Tests PerioSafe und ImplantSafe sowie das Lesegerät (ORALyser) wurden von Medix Biochemica Ltd (Espoo, Finnland) und Dentognostics GmbH (Jena, Deutschland) entwickelt und hergestellt und sind im Handel von Dentognostics GmbH (Jena, Deutschland) erhältlich. Tatsächlich ähneln die PoC/Chair-Side-aMMP-8-Lateral-Flow-Immuntests den klassischen Schwangerschafts- und/oder kürzlich beschriebenen HIV-PoC-Tests (55). Die aMMP-8 Mundflüssigkeitstests können gemäß den Anweisungen des Herstellers verwendet werden (47). PerioSafe misst und analysiert die Werte von aMMP-8 in Mundspülungen und ImplantSafe in PISF und GCF; daher ist PerioSafe patientenspezifisch und ImplantSafe ortsspezifisch (47,53). PerioSafe- und ImplantSafe-Teststäbchen können mit dem ORALyser-Lesegerät in 5 min PoC/am Behandlungsstuhl quantifiziert werden. PerioSafe und ImplantSafe mit ORALyser-Quantifizierung sind zuverlässige, quantitative, nicht-invasive, sichere und kostengünstige ergänzende Point-of-Care-Diagnoseinstrumente für Diagnose, Screening, Überwachung und Prävention von parodontalen und periimplantären Erkrankungen (47). Eine Pilot-Fall-Kontroll-Periimplantitis-Studie zeigt sowohl 100 % Sensitivität als auch Spezifität für den ImplantSafe-Test (56).

Methodik und Umsetzung:

Um die vorangegangenen Ziele zu erreichen, wurde eine Fallkontrollstudie entworfen und wird in der Abteilung für Parodontologie und Implantatbiologie, Zahnmedizinische Fakultät, Aristoteles-Universität Thessaloniki durchgeführt.

Es wird eine Studienstichprobe von mindestens 100 Patienten rekrutiert, die die postgraduale Klinik für Parodontologie und Implantatbiologie der zahnmedizinischen Fakultät der Aristoteles-Universität Thessaloniki für eine parodontale oder periimplantäre Behandlung besuchen. Bei Patienten sollte eine Periimplantitis gemäß den neuesten Kriterien (2017)(4) diagnostiziert werden. Das Studienprotokoll wird der Ethikkommission der Fakultät für Zahnmedizin der Aristoteles-Universität Thessaloniki zur Genehmigung vorgelegt, und alle Patienten werden gebeten, ihre Einverständniserklärung zu unterzeichnen.

- Arbeitspakete: i. COX-2-Genpolymorphismen: Von allen in die Studie eingeschlossenen Patienten wird ein Wangenabstrich entnommen. Nach der DNA-Extraktion wird eine Polymerase-Kettenreaktion (PCR) durchgeführt, um die vorgeschlagenen Polymorphismen zu identifizieren, wobei kommerzielle Primer verwendet werden, die für das Gen spezifisch sind. Die Genpolymorphismusanalysen und die entsprechenden Laborverfahren werden in Zusammenarbeit mit der Fakultät für Biologie der Fakultät für Naturwissenschaften der Aristoteles-Universität Thessaloniki durchgeführt. Genauer gesagt werden die Proben von Ioannis Fragkioudakis (Postgraduiertenstudent der Abteilung für Parodontologie und Implantatbiologie, Abteilung für Zahnmedizin, Aristoteles-Universität Thessaloniki) gesammelt und bis zur weiteren Verarbeitung bei -80 °C gelagert. Die Proben werden in Zusammenarbeit mit der Fakultät für Biologie der Aristoteles-Universität Thessaloniki unter der Leitung von Professor Minas Arsenakis analysiert. Der Prozess wird von Ioannis Fragkioudakis und der Doktorandin Symela Koutounidou durchgeführt. Die Auswahl dieses kooperierenden Organismus basiert auf der bisherigen Erfahrung von Professor Minas Arsenakis in der Analyse von Genpolymorphismen und dem voll ausgestatteten Labor, das sich im Fachbereich Biologie AUTh befindet. Darüber hinaus erklärt der PI erfolgreiche bisherige Kooperationen mit den Mitgliedern der ausgewählten Organisation.

ii. Pathogene Mikrobiota-Proben werden von den ausgewählten Implantaten durch Einführen von sterilen endodontischen Papierspitzen in jede periimplantäre Spalte entnommen. Genauer gesagt werden die Proben von Ioannis Fragkioudakis (Postgraduiertenstudent der Abteilung für Parodontologie und Implantatbiologie, Abteilung für Zahnmedizin, Aristoteles-Universität Thessaloniki) gesammelt und bis zur weiteren Verarbeitung bei -80 °C gelagert. Die Proben werden analysiert Sequenzierung der nächsten Generation (NGS). Genauer gesagt werden 16S-rRNA-Sequenzierung und HOMINGS verwendet, um die gesamte in den Proben enthaltene Mikrobiota zu identifizieren, wodurch die Charakterisierung aller taxonomischen Ebenen von Bakterien ermöglicht wird. Die NGS wird in Zusammenarbeit mit der Abteilung für Mikrobiologie der Medizinischen Fakultät der A.U.Th. Die Auswahl des kooperierenden Organismus und der Mitglieder basiert auf der Verfügbarkeit der benötigten Laborausrüstung (Zugang wird von der assoziierten Professorin Lemonia Skoura bereitgestellt) im allgemeinen AHEPA-Universitätskrankenhaus von Thessaloniki. Darüber hinaus werden die erforderlichen Laborarbeiten von Fani Chatzopoulou (Doktorand), der mit den Prozessen vertraut ist, unter der Leitung des außerordentlichen Professors Dimitrios Chatzidimitriou durchgeführt.

iii. MMP-8-Analyse ImplantSafe-aMMP8-Analyse-Schnelltests werden zur Bewertung der MMP-8-Spiegel in den ausgewählten Implantaten verwendet. Das Verfahren sieht wie folgt aus: Matrix-Metalloproteinase (MMP)-8 (Neutrophilen-Kollagenase-2)-Spiegel in ihrer aktiven Form (aMMP-8) werden mit Hilfe der mitgelieferten Papierstreifen aus der periimplantären Crevicular-Flüssigkeit gesammelt der Test. Anschließend werden die Proben quantitativ mit dem digitalen Lesegerät ORALyzer® gemäß den Anweisungen des Herstellers analysiert, was eine sofortige Quantifizierung der aMMP-8-Spiegel ermöglicht. Der ORALyzer ist seit 2019 im Besitz der Klinik für Parodontologie. Alle Proben werden von Ioannis Fragkioudakis gesammelt und analysiert.