Rolle der Cytomorphometrie und der BRAFV600E -Immunzytochemie mit einer zytologischen Diagnose "misstrauisch für papilläres Schilddrüsenkarzinom"

Schilddrüsenknoten sind häufiger klinischer Befund in der routinemäßigen täglichen medizinischen und chirurgischen Praxis. Sie werden durch Ultraschall bei etwa 70% der klinisch gesunden Personen entdeckt. Schilddrüsenknoten sind bei Frauen viermal häufiger und bis zu 90% der Fälle werden durch gutartige Bedingungen verursacht.

Das Hauptziel des klinischen Managements von Schilddrüsenknoten ist der Ausschluss der Malignität (4-6,5% aller Schilddrüsenknoten), die Bewertung der Drucksymptome und die Bewertung der Schilddrüsenfunktionsstörung.

Viele Risikofaktoren wurden im Zusammenhang mit der Entwicklung von Schilddrüsenknoten identifiziert, einschließlich fortgeschrittenes Alter, Geschlecht, erhöhtes oder verringertes Jod, Familienanamnese oder Polypose und Vorgeschichte von Kopf- und Halsstrahlung. Die häufigsten Schilddrüsenknoten sind Kolloidknoten, Hashimoto -Thyreoiditis, subakute Thyreoiditis, Zysten, follikuläre Adenom und Schilddrüsenkrebs.

In Bezug auf bösartige Schilddrüsentumoren nahm die Inzidenz von Schilddrüsenkrebs in den letzten Jahrzehnten in den USA und international zu. Es ist der siebensthäufigste Krebs in der Allgemeinbevölkerung und der fünfthäufigste bei Frauen. Die Inzidenz von Schilddrüsenkrebs ist bei Frauen etwa dreimal höher als bei Männern und steigt von der Adoleszenz zum mittleren Alter mit dem Höhepunkt von rund 55 Jahren bei Frauen und 65 Jahren bei Männern, die mit dem älteren Alter abnehmen.

Die Erhöhung der Anzahl der Krebsfälle wird durch eine erhöhte Diagnose verursacht, die sich aus der weit verbreiteten Verwendung von diagnostischen Werkzeugen wie Ultraschallbildgebung, feiner Nadelaspirationszytologie, Computertomographie, Magnetresonanztomographie und Fluorodeoxyglucose -Positron -Emissionstomographie ergeben. Zusätzlich zu der Zunahme der Exposition gegenüber den ätiologischen Faktoren als ionisierende Strahlung während der Kindheit und Fettleibigkeit.

Papilläres Schilddrüsenkarzinom (PTC) ist der häufigste histologische Typ von Schilddrüsenkrebserkrankungen, die 90% der Fälle entsprechen. Zu den restlichen 10% gehören follikuläres Schilddrüsenkarzinom 4%, Hurthle -Zellkarzinom 2%, medulläres Thyroidkarzinom 2% und anaplastisches Schilddrüsenkarzinom 1%.

Die Prognose von Schilddrüsenkrebs ist ausgezeichnet, da die meisten Fälle während der Diagnose auf der Schilddrüse in der Schilddrüse lokalisierte Schilddrüsenkarzinome sind. Die 5-Jahres-Überlebensrate beträgt 98,6% insgesamt, 99,9% für lokalisierte, 98,3% für regionale und 54,9% für entfernte Metastasen.

Die Fine-Nadel-Aspiration Cytology (FNAC) der Schilddrüse ist ein genauer diagnostischer Diagnosetest mit Goldstandards, der routinemäßig bei der anfänglichen Bewertung von Schilddrüsenknoten verwendet wird, da sie einfach, sicher, kostengünstig und eine günstige Akzentualität aufweist. Die Empfindlichkeit und Spezifität der Schilddrüsen-FNAC beträgt 68-98% bzw. 56-100%, wobei die Ausfallraten auf die Technik und Erfahrung der Leistung zurückzuführen sind.

Das Bethesda -System zur Berichterstattung über die Schilddrüsenzytopathologie (TBSRTC) wurde erstmals im Jahr 2010 veröffentlicht und mehrmals aktualisiert, um die Berichterstattungsterminologie zu standardisieren und eine bessere Kommunikation zwischen Zytopathologen und Klinikern zu erhalten.

Das 2023 Bethesda-System zur Berichterstattung über die Schilddrüsenzytopathologie ist ein einfaches kategorybasiertes Berichtssystem für die Zytologie der Feinnadelaspiration (FNAC) der Schilddrüse und wurde zu einer der am häufigsten verwendeten Berichterstattung und diagnostischen Methoden und umfasst 6 Kategorien.

Kategorie (i) nicht diagnostisch mit 13%(5-20) Malignitätsrisiko, Kategorie (II) mit 4%(2-7) Risiko einer Malignität, Kategorie (iii) Atypie unbestimmter Signifikanz mit 22%(13-30) Risiko der Malignität, Kategorie (IV) -Follikuläre Neoplasmas mit 30%(23-2-)-Risiko der Malignitätsklasse mit 30%(23-2. 74%(67-83) Malignes Risiko für Malignität und Kategorie (VI) mit 97%(97-100) Risiko für Malignität.

Die Kategorie der Malignitätsdoppelte wird verwendet, wenn zytomorphologische Merkmale nicht schlüssig sind und einen starken Verdacht auf die Malignität erhöhen, jedoch quantitativ oder qualitativ unzureichend für eine schlüssige Diagnose und das übliche Management in diesem Fall ist molekulare Tests, Lobektomie oder nahezu totale Thyroidenktomie.

The suspicious for malignancy (SFM) according to Bethesda system category includes suspicious for papillary thyroid carcinoma (SPTC) which is the most common subtype (more than 90%) and less frequently suspicious for non-papillary carcinoma which consists of suspicious for medullary thyroid carcinoma, suspicious for malignant lymphoma, suspicious for poorly differentiated carcinoma and suspicious für Malignität nicht sonst angegeben.

Verdächtig für papilläres Schilddrüsenkarzinom wird aufgrund uneinheitlicher Kernveränderungen (unauffällige follikuläre Zellen, die mit Zellen zu Bemühungen von Zellen sind, die Kernvergrößerung, eine Blässe, Groove und feines Chromatin, skant oder fehlende intrankernige Pseudoinklusionen und fehlende Papillenarchitektur, unvollständige nukleare Veränderungen, skernige Nuklearveränderungen (generelle nuklearische Veränderungen, skernige Nuklearveränderungen, sanfende Nuklearveränderungen, generelle Nuklearveränderungen, generelle Nuklearveränderungen, generelle Nuklearveränderungen, diagnostizierte. Kernmembran und intranukleäre Pseudoinklusionen und fehlende papilläre Architektur und Psammomkörper), spärlich zelluläre Probe oder zystische Degeneration (Hintergrund von zystischen Trümmern und Makrophagen, Kernvergrößerung und pallorische Architektur und Pallor -Architektur und Psammytoid -Zellen.

Verdächtig für papilläres Schilddrüsenkarzinom wird bei 2,4-8% der Ergebnisse der Feinnadelaspiration diagnostiziert, und 60-80% von ihnen werden in resezierten Proben als papilläres Schilddrüsenkarzinom bestätigt, und die restlichen Fälle zeigten gutartige Erkrankungen als chronische Lymphozytus-Thyroiditis (Haderoto-Thyroiditis). Die Hashimoto -Thyreoiditis ist einer der häufigsten Faktoren bei falsch positiven papillären Schilddrüsenkarzinom -Diagnose aufgrund der starken Überlappung morphologischer Merkmale zwischen ihnen.

Für Chirurgen und Patienten ist die misstrauische Diagnose des Schilddrüsenkarzinoms verdächtig und erschwert die optimale chirurgische Entscheidung, da die Prävalenz der Malignität in dieser diagnostischen Kategorie hoch ist. Einige Chirurgen gehen für die totale Thyreoidektomie vor, und dies macht etwa 25% der Patienten (falsch positive Fälle) unter Überwechselung und in Notwendigkeit einer Hormonersatztherapie für das Leben leiden. Viele Versuche wurden durchgeführt, um die Genauigkeit der Erkennung von Malignität in dieser Kategorie zu erhöhen und die Möglichkeit einer Überwachung zu verringern. Einige Autoren gaben detaillierte Ultraschallkriterien für Fälle an, die zytologisch für papilläres Schilddrüsenkarzinom diagnostiziert wurden, und berichteten über eine Erhöhung der Genauigkeit von 86% auf 94%, während andere einen intraoperativen gefrorenen Abschnitt und Zusatztests als molekulare Marker durchführten.

Die zytomorphometrische Analyse wurde als klinisches diagnostisches Instrument verwendet und seit über 30 Jahren in der Literatur diskutiert. Es wurde in vielen Organen wie Nasopharynx, Haut, Harnblase, Dickdarm, Brust und Schilddrüse verwendet. Morphometrie ist computergestütztes Verfahren durch die quantitative Analyse geometrischer Merkmale von Strukturen mit jeder Dimension. Die nukleare Morphometrie von malignen Kernen, einschließlich der Größe, Form und Chromatinmuster, unterscheidet sich von denen von nichtmalignen Zellkern, wodurch die Kernmorphometrie zwischen gutartigen und malignen Fällen unterscheidet. Mit nuklearen Morphometrie können wir eine Reihe von Parametern quantifizieren, wie z. B. solche, die sich auf die Kerngröße und -form beziehen.

Morphometrie kann als Ergänzung zu morphologischen Merkmalen in Schilddrüsenläsionen helfen, wenn sie korrekt mit geeigneten Grenzwerten angewendet werden. Bisher wurden die Mehrheit der Bildanalysestudien an histopathologischen Abschnitten durchgeführt und nur wenige Studien an zytologischen Abstrichen. Es wurde vermutet, dass nukleare morphometrische Parameter wie Kernfläche und Umfangs- und Formfaktoren eine Differenzierung zwischen Schilddrüsenläsionen ermöglichen. Die Anwendung der Morphometrie auf die Zytologie wäre für den Zweck des automatisierten morphometrischen Screenings sowie eine genaue Diagnose von Schilddrüsentumoren nützlich.

Die computergestützte morphometrische Untersuchung von histologischen Schilddrüsen -histologischen Objektträgern identifizierte effiziente morphometrische Parameter, die die Unterschiede zwischen gutartigen und bösartigen Epithelzellen und die zuverlässigen Parameter unterscheiden, Umfang, Länge, Breite, der Grad der Rundheit und die Unregelmäßigkeit der Kernmembrane.

A study revealed that the cytomorphometric image analysis with cytomorphology has the potential for distinguishing not only the benign, follicular neoplasm/suspicious for a follicular neoplasm, malignant thyroid lesions of Bethesda system but also can distinguish nodules with follicular patterns as follicular variant of papillary carcinoma, follicular adenoma and Follikularkarzinom.

Viele analytische Studien auf Molekularbasis haben gezeigt, dass die meisten papillären Schilddrüsenkarzinome durch zwei unterschiedliche Signalmechanismen des MAPK-Signalwegs (Mitogen-aktivierter Proteinkinase) verursacht werden, entweder BRAF-ähnlich oder ras-ähnlich.

Die häufigste Genmutation beim papillären Schilddrüsenkarzinom (60%) ist eine Missense-Mutation im BRAF-Onkogen, Valin (V), die Glutaminsäure (E) an der Aminosäureposition 600 ersetzt, die schließlich die mitogenaktivierte Proteinkinase-Signalübertragung treibt.

Eine systematische Überprüfung und Metaanalyse zeigte, dass die Rezidivrate bei BRAFv600E-mutierten papillären Schilddrüsenkarzinomen (24,9%) zweimal hoch wie wildwildtype papilläre Schilddrüsenkarzinome (12,6%). Das BRAFV600E -mutierte PTCs hat ein höheres Risiko für eine Lymphknotenmetastasierung, eine extrathyroidale Erweiterung und assoziiert mit dem fortschrittlichen AJCC III/IV -Stadium.

Der Zugang zu molekularen Tests hat die Verwendung von therapeutischen Wirkstoffen, die auf spezifische Mutationen als BRAFV600E abzielen, erleichtert.

Die BRAFV600E-Mutation ist bei papillärem Schilddrüsenkarzinom (38-90%) sehr häufig und in gutartigen Schilddrüsenläsionen selten vorhanden, sodass ihre diagnostische Spezifität hoch ist. Es führt zu einer abnormalen Aktivierung des mitogen aktivierten Proteinkinasewegs, der eine wichtige Rolle bei der Entwicklung des papillären Schilddrüsenkarzinoms spielt. Es wurde berichtet, dass die Zytologie der feinen Nadelaspiration in Kombination mit der voroperativen BRAFV600E -Mutationserkennung die diagnostische Leistung für Schilddrüsenknoten im Vergleich zur Zytologie der feinen Nadelaspiration allein verbessern kann.

Die Empfindlichkeit und Spezifität des BRAFV600E -Mutationstests allein für papilläres Schilddrüsenkarzinom betrug 76,71% bzw. 100% und stieg in Kombination mit der Zytologie auf 96,62% bzw. 88,03%. Die Kombination zwischen feiner Nadelaspirationszytologie und BRAFV600E -Mutationstests hat die falsch negativen Negative in der Diagnose der papillären Schilddrüsenkarzinom verringert.

Ziel der Studie:

• Bewertung des Malignitätsrisikos in TNs, die von FNAC als SPTC diagnostiziert wurden.
• Die unterschiedlichen morphometrischen Parameter in Fällen zu charakterisieren, diagnostiziertes diagnostiziertes zytologisch als SPTC.
• Bewertung der immunzytochemischen Expression von BRAFV600E in Fällen diagnostiziertes zytologisch als SPTC.
• Bewertung des Nutzens der zytomorphometrischen Analyse und der BRAFV600E-Immunfärbung allein oder in Kombination bei der Verbesserung der diagnostischen Genauigkeit von SPTC-Fällen.

Material und Methoden:

Eine retrospektive deskriptive Studie wird über einen Zeitraum von sechs Jahren (2018-2025) an FNA-Abstrichen von Schilddrüsenknoten durchgeführt. In der Studie werden Papanicolaou (PAP) und Hämatoxylin & Eosin (H & E) gefärbte Abstriche von 45 Patienten mit Schilddrüsenknoten (Bethesda V) in Kombination mit den histopathologischen Daten ihrer resezierten Thyroid -Spezifischen von 45 Patienten mit Schilddrüsenknoten (H & E) untersucht, die als misstrauisch diagnostiziert wurden.

Einschlusskriterien:

Nur Papanicolaou (PAP) und Hämatoxylin & Eosin (H & E) färbten FNAC-Abstriche mit gut erhaltener Kernmorphologie, die als misstrauisch für papilläre Schilddrüsenkarzinom diagnostiziert wurden, in die Studie einbezogen.

Ausschlusskriterien:

• FNAC -Abstriche ohne histopathologische Bestätigung.
• Abstrichen mit umfangreicher nuklearer Überlappung und schlechter Morphologie.
• Abstriche, die durch Entzündung, Blut oder Schleimhaut verdeckt sind.
• Abstriche mit zellulären degenerativen Veränderungen oder Trocknungsartefakten.
• Jeder Patient mit fehlenden Daten. Alle klinischen, radiologischen und pathologischen Daten werden aus Krankenakten gesammelt.

Persönliche Daten einschließlich Alter und Geschlecht, klinische Daten als Anzahl der Schilddrüsenknoten und deren Größe sowie das Vorhandensein oder Fehlen von Hals-Lymphknotenvergrößerung und Drucksymptomen und radiologische Daten als Schilddrüsenbildgebungsberichterstattung und Datensystem (TI-Rad), die Komposition, Echogenität, Rand und beachtete, werden gesammelt.

Morphometrische Studie:

Für jeden Fall werden 50 Kerne aus follikulären Zellen innerhalb der verdächtigen zellulären Gruppe mit gut erhaltener Morphologie ausgewählt. Kerne, die überlappend sind, durch Entzündung, Blut oder Mucin verdeckt werden oder degenerative Veränderungen aufweisen, die ausgeschlossen werden. Es werden isolierte Kerne oder solche, die sich nur berühren, ohne Überlappung mit sauberem Hintergrund eingeräumt. Jeder ausgewählte Kern, der sich auf die Verwendung einer 1000 -fachen Öleintauchungsobjektivlinse konzentriert, wird mit einer Digitalkamera abgebildet und mit der Bildanalyse -Software analysiert. Die Software weist jedem Kern im Bild eine spezifische Zahl zu und quantifiziert ihre morphometrischen Parameter.

Immunzytochemische Studie:

Die BRAFV600E -Immunzytochemie wird nach der Entschlossenheit auf die Abstriche angewendet.

Abstriche werden mit BRAFV600E -Antikörpern mit Immunoperoxidase -Färbung als Visualisierungsmethode gefärbt.

Die Ausdehnung und Inkubationszeit werden gemäß den Anweisungen des Herstellers durchgeführt.

Korrelation zwischen den Ergebnissen zytomorphometrischer Studien, der Ergebnisse von BRAFV600E -Mutationstests und den Ergebnissen histopathologischer Objektträger werden durchgeführt.