Tratamiento hipolipémico en el síndrome coronario agudo (SCA): efectos antitrombóticos

El estado clínico se evaluará durante la hospitalización y luego de forma ambulatoria. Se registrarán todos los eventos cardiovasculares (infarto de miocardio fatal o no fatal, angina inestable, muerte súbita cardíaca, muerte por todas las causas, accidente cerebrovascular, AIT) y se realizará una angiografía coronaria de seguimiento a los pacientes que se sometieron a una ICP aguda de acuerdo con las recomendaciones actuales. Sin embargo, el análisis clínico no es un objetivo importante de este estudio.

Los investigadores planean evaluar los siguientes parámetros:

• Morfología de sangre entera, creatinina, glucosa, sodio, potasio, urea, perfil lipídico, CK, AST, fibrinógeno, utilizando métodos estándar en laboratorio hospitalario.
• Marcadores de inflamación - fibrinógeno (nefelometría, Dade Behring) proteína C reactiva de alta sensibilidad (nefelometría, Dade Behring); interleucina 6 (ELISA, R&D Systems).
• Marcadores de generación de trombina en sangre periférica - complejos trombina-antitrombina [TAT] (ELISA, Dade Behring); fragmentos de protrombina 1+2 [F1+2] (ELISA, Dade Behring).
• Permeación del coágulo de fibrina y susceptibilidad a la lisis: medición de la constante de Darcy (dimensiones de los poros en la estructura del coágulo) mediante la medición del volumen de tampón (0,05 mol/l Tris HCl con 0,15 mol/l NaCl) que penetra a través del gel de fibrina elaborado en tubos de poliestireno, de 1,3 mm de diámetro, con 100 ul de plasma de citrato y tras la adición de trombina humana 1U/ml y cloruro cálcico 20 mmol/l a temperatura ambiente en 120 minutos según metodología descrita por Mills y col.
• Turbidimetría en gel de fibrina: plasma mezclado con tampón Tris preparado como se mencionó anteriormente en una proporción de 2:3, después de agregar 1 U/ml de trombina y 16 mmol/l de cloruro de calcio se analizarán en el espectrómetro UV (longitud de onda 405 nm). Se medirán las siguientes variables: tiempo de iniciación, tiempo de aumento de absorción y valor de absorción en meseta, aproximadamente 10 minutos después de la adición de trombina a la mezcla. Después de 2 horas, se realizará una evaluación espectrofotométrica del coágulo (400 a 800 nm) para medir el tamaño de los poros y el grosor de las fibras de fibrina utilizando la ecuación de Carr modificada por Wolberg. Luego se medirá la fibrinólisis del gel de fibrina mediante turbidimetría. Se realizará otro ensayo de lisis basado en la medición de los niveles de dímero D en el efluente que fluye a través de los geles de fibrina según el método de Collet et al.
• Activación del sistema de coagulación en un modelo de "sangre mínimamente modificada" según Rand et al. La sangre no anticoagulada se dividirá en 10 muestras de 1 ml añadidas a los tubos con TF y fosfolípidos, y luego se detendrá la coagulación mediante un cóctel anticoagulante. En las muestras de sobrenadante, se realizarán análisis de transferencia Western y HPLC de fibrinopéptidos como se describió anteriormente.

En 40 pacientes asignados al azar, evaluaremos la activación del sistema de coagulación utilizando el modelo de lesión vascular de acuerdo con un procedimiento desarrollado por nosotros.

Mediremos:

• Activación de la protrombina
• Conversión de fibrinógeno en fibrina
• Activación del factor V e inactivación del factor Va
• Activación del factor XIII
• Activación de TAFI
• Generación de trombina

Análisis genético Los investigadores determinarán el polimorfismo PlA1 PlA2 en el gen de la integrina β3 mediante la técnica de PCR en muestras de ADN recogidas de leucocitos de sangre periférica.

Además, vamos a buscar el polimorfismo de la región promotora de IL-6/G-174C también mediante PCR en ADN extraído de leucocitos de sangre periférica, utilizando cebadores 5'- AAT CTT TGT TGG AGG GTG AG y 5' - ACA TGC CAA GTG CTG AGT CA y endonucleasa de restricción Sfa NI en gel de agarosa al 2%.