Tratamento hipolipêmico na síndrome coronariana aguda (SCA): efeitos antitrombóticos

O estado clínico será avaliado durante a internação e, posteriormente, ambulatorialmente. Todos os eventos cardiovasculares (infarto do miocárdio fatal ou não fatal, angina instável, morte súbita cardíaca, morte por todas as causas, acidente vascular cerebral, AIT) serão registrados e os pacientes submetidos a ICP aguda terão uma angiografia coronária de acompanhamento realizada de acordo com as recomendações atuais. No entanto, a análise clínica não é o principal objetivo deste estudo.

Os investigadores planejam avaliar os seguintes parâmetros:

• Morfologia do sangue total, creatinina, glicose, sódio, potássio, uréia, perfil lipídico, CK, AST, fibrinogênio, usando métodos padrão em laboratório hospitalar.
• Marcadores de inflamação - fibrinogênio (nefelometria, Dade Behring) proteína C-reativa de alta sensibilidade (nefelometria, Dade Behring); interleucina 6 (ELISA, R&D Systems).
• Marcadores de geração de trombina no sangue periférico - complexos trombina-antitrombina [TAT] (ELISA, Dade Behring); fragmentos de protrombina 1+2 [F1+2] (ELISA, Dade Behring).
• Permeação do coágulo de fibrina e susceptibilidade à lise - medição da constante de Darcy (dimensões dos poros na estrutura do coágulo) por medição do volume de tampão (0,05 mol/l Tris HCl com 0,15 mol/l NaCl) penetrando através do gel de fibrina feito em tubos de poliestireno de 1,3 mm de diâmetro, com 100 ul de citrato de plasma e após adição de 1U/ml de trombina humana e 20 mmol/l de cloreto de cálcio em temperatura ambiente em 120 minutos conforme metodologia descrita por Mills et al.
• Turbidimetria em gel de fibrina - plasma misturado com tampão Tris preparado conforme mencionado acima na proporção 2:3, após adição de 1 U/ml de trombina e 16 mmol/l de cloreto de cálcio será analisado no espectrômetro UV (comprimento de onda 405 nm). As seguintes variáveis ​​serão medidas: tempo de iniciação, tempo de aumento da absorção e valor de absorção no platô, aproximadamente 10 minutos após a adição de trombina à mistura. Após 2 horas, será realizada a avaliação espectrofotométrica do coágulo (400 a 800 nm) para medir o tamanho dos poros e a espessura das fibras de fibrina usando a equação de Carr modificada por Wolberg. Em seguida, a fibrinólise do gel de fibrina será medida por meio de turbidimetria. Outro ensaio de lise baseado na medição dos níveis de D-dímero no efluente que flui através de géis de fibrina será realizado de acordo com o método de Collet et al.
• A ativação do sistema de coagulação em modelo de "sangue minimamente modificado" segundo Rand et al. O sangue não anticoagulado será dividido em 10 amostras de 1 ml adicionadas aos tubos com TF e fosfolipídios, e então a coagulação será interrompida por um coquetel de anticoagulantes. Nas amostras sobrenadantes, Western blotting e análise de fibrinopeptídeos por HPLC serão realizadas conforme descrito anteriormente.

Em 40 pacientes alocados aleatoriamente, avaliaremos a ativação do sistema de coagulação usando o modelo de lesão vascular de acordo com um procedimento desenvolvido por nós.

Iremos medir:

• Ativação da protrombina
• Conversão de fibrinogênio em fibrina
• Ativação do fator V e inativação do fator Va
• Ativação do fator XIII
• Ativação do TAFI
• geração de trombina

Análise genética Os pesquisadores irão determinar o polimorfismo PlA1 PlA2 no gene da integrina β3 usando a técnica de PCR em amostras de DNA coletadas de leucócitos de sangue periférico.

Adicionalmente, buscaremos o polimorfismo da região promotora de IL-6/G-174C também por meio de PCR em DNA coletado de leucócitos de sangue periférico, utilizando iniciadores 5'-AAT CTT TGT TGG AGG GTG AG e 5' - ACA TGC CAA GTG CTG AGT CA e endonuclease de restrição Sfa NI em gel de agarose a 2%.