Hypolipemische behandeling bij acuut coronair syndroom (ACS): antitrombotische effecten

De klinische status zal worden geëvalueerd tijdens de ziekenhuisopname en vervolgens op poliklinische basis. Alle cardiovasculaire voorvallen (fataal of niet-fataal myocardinfarct, onstabiele angina pectoris, plotselinge hartdood, overlijden door alle oorzaken, beroerte, TIA) zullen worden geregistreerd en de patiënten die acute PCI hebben ondergaan, zullen een follow-up coronaire angiografie ondergaan die wordt uitgevoerd volgens de huidige aanbevelingen. De klinische analyse is echter geen belangrijk doel van deze studie.

De onderzoekers zijn van plan de volgende parameters te evalueren:

• Volbloedmorfologie, creatinine, glucose, natrium, kalium, ureum, lipidenprofiel, CK, AST, fibrinogeen, met behulp van standaardmethoden in ziekenhuislaboratorium.
• Ontstekingsmarkers - fibrinogeen (nefelometrie, Dade Behring) hooggevoelig C-reactief proteïne (nefelometrie, Dade Behring); interleukine 6 (ELISA, R&D Systems).
• Trombinegeneratiemarkers in perifeer bloed - trombine-antitrombinecomplexen [TAT] (ELISA, Dade Behring); protrombinefragmenten 1+2 [F1+2] (ELISA, Dade Behring).
• Permeatie van fibrinestolsel en vatbaarheid voor lysis - meting van de constante van Darcy (afmetingen van poriën in de structuur van het stolsel) door meting van het buffervolume (0,05 mol/l Tris HCl met 0,15 mol/l NaCl) dat door de fibrinegel gemaakt in polystyreen buizen, 1,3 mm in diameter, met 100 µl citraatplasma en na toevoeging van 1 U/ml humaan trombine en 20 mmol/l calciumchloride bij kamertemperatuur binnen 120 minuten volgens de methodologie beschreven door Mills en al.
• Fibrinegelturbidimetrie - plasma gemengd met Tris-buffer bereid zoals hierboven vermeld in een verhouding van 2:3, na toevoeging van 1 U/ml trombine en 16 mmol/l calciumchloride zal worden geanalyseerd in de UV-spectrometer (golflengte 405 nm). De volgende variabelen worden gemeten: aanvangstijd, absorptietijd en absorptiewaarde in plateau, ongeveer 10 minuten na toevoeging van trombine aan het mengsel. Na 2 uur zal spectrofotometrische beoordeling van het stolsel worden uitgevoerd (400 tot 800 nm) om de poriegrootte en dikte van fibrinevezels te meten met behulp van de Carr-vergelijking gewijzigd door Wolberg. Vervolgens wordt fibrinolyse van fibrinegel gemeten door middel van turbidimetrie. Een andere lysistest gebaseerd op de meting van D-dimeergehalten in het effluent dat door fibrinegels stroomt, zal worden uitgevoerd volgens de methode van Collet et al.
• Activering van het stollingssysteem in een "minimaal gemodificeerd bloed"-model volgens Rand et al. Niet-ontstold bloed zal worden verdeeld in 10 monsters van 1 ml die aan de buisjes met TF en fosfolipiden worden toegevoegd, waarna de stolling wordt gestopt door een antistollingscocktail. In de bovenstaande monsters zullen Western-blotting en HPLC-analyse van fibrinopeptiden worden uitgevoerd zoals eerder beschreven.

Bij 40 willekeurig toegewezen patiënten zullen we de activering van het stollingssysteem beoordelen met behulp van het vaatletselmodel volgens een door ons ontwikkelde procedure.

We meten:

• Activering van protrombine
• Omzetting van fibrinogeen in fibrine
• Activering van factor V en inactivering van factor Va
• Activering van factor XIII
• Activering van TAFI
• Trombine generatie

Genetische analyse De onderzoekers zullen het PlA1 PlA2-polymorfisme in het integrine β3-gen bepalen met behulp van de PCR-techniek in DNA-monsters van perifere bloedleukocyten.

Daarnaast gaan we zoeken naar polymorfisme van het promotorgebied van IL-6 /G-174C, ook door middel van PCR in DNA dat is verzameld uit perifere bloedleukocyten, met behulp van primers 5'-AAT CTT TGT TGG AGG GTG AG en 5' - ACA TGC CAA GTG CTG AGT CA en restrictie-endonuclease Sfa NI op 2% agarosegel.