Trattamento ipolipemico nella sindrome coronarica acuta (ACS): effetti antitrombotici

Lo stato clinico sarà valutato durante il ricovero e successivamente in regime ambulatoriale. Verranno registrati tutti gli eventi cardiovascolari (infarto miocardico fatale o non fatale, angina instabile, morte cardiaca improvvisa, morte per tutte le cause, ictus, TIA) e i pazienti sottoposti a PCI acuto saranno sottoposti a coronarografia di follow-up secondo le attuali raccomandazioni. Tuttavia, l'analisi clinica non è uno dei principali obiettivi di questo studio.

Gli investigatori intendono valutare i seguenti parametri:

• Morfologia del sangue intero, creatinina, glucosio, sodio, potassio, urea, profilo lipidico, CK, AST, fibrinogeno, utilizzando metodi standard nel laboratorio ospedaliero.
• Marcatori di infiammazione - fibrinogeno (nefelometria, Dade Behring) proteina C-reattiva ad alta sensibilità (nefelometria, Dade Behring); interleuchina 6 (ELISA, R&D Systems).
• Marcatori di generazione di trombina nel sangue periferico - complessi trombina-antitrombina [TAT] (ELISA, Dade Behring); frammenti di protrombina 1+2 [F1+2] (ELISA, Dade Behring).
• Permeazione del coagulo di fibrina e suscettibilità alla lisi - misurazione della costante di Darcy (dimensioni dei pori nella struttura del coagulo) mediante misurazione del volume del tampone (0,05 mol/l Tris HCl con 0,15 mol/l NaCl) che penetra attraverso il gel di fibrina realizzato in tubi di polistirene, 1,3 mm di diametro, con 100 ul di plasma citrato e dopo aggiunta di 1U/ml di trombina umana e 20 mmol/l di cloruro di calcio a temperatura ambiente entro 120 minuti secondo la metodologia descritta da Mills e al.
• Turbidimetria su gel di fibrina - plasma miscelato con tampone Tris preparato come sopra descritto in rapporto 2:3, dopo l'aggiunta di 1 U/ml di trombina e 16 mmol/l di cloruro di calcio saranno analizzati nello spettrometro UV (lunghezza d'onda 405 nm). Verranno misurate le seguenti variabili: tempo di inizio, tempo di aumento dell'assorbimento e valore di assorbimento nel plateau, circa 10 minuti dopo l'aggiunta di trombina alla miscela. Dopo 2 ore, verrà eseguita la valutazione spettrofotometrica del coagulo (da 400 a 800 nm) per misurare la dimensione dei pori e lo spessore delle fibre di fibrina utilizzando l'equazione di Carr modificata da Wolberg. Successivamente verrà misurata la fibrinolisi del gel di fibrina mediante turbidimetria. Un altro saggio di lisi basato sulla misurazione dei livelli di D-dimero nell'effluente che fluisce attraverso i gel di fibrina sarà eseguito secondo il metodo di Collet et al.
• Attivazione del sistema di coagulazione in un modello di "sangue minimamente modificato" secondo Rand et al. Il sangue non anticoagulato sarà suddiviso in 10 campioni da 1 ml aggiunti alle provette con TF e fosfolipidi, quindi la coagulazione verrà bloccata da un cocktail di anticoagulanti. Nei campioni supernatanti, verranno eseguite analisi Western blotting e HPLC dei fibrinopeptidi come descritto in precedenza.

In 40 pazienti assegnati a caso valuteremo l'attivazione del sistema di coagulazione utilizzando il modello di danno vascolare secondo una procedura da noi sviluppata.

Misureremo:

• Attivazione della protrombina
• Conversione del fibrinogeno in fibrina
• Attivazione del fattore V e inattivazione del fattore Va
• Attivazione del fattore XIII
• Attivazione TAFI
• Generazione di trombina

Analisi genetica Gli investigatori determineranno il polimorfismo PlA1 PlA2 nel gene dell'integrina β3 utilizzando la tecnica PCR in campioni di DNA raccolti da leucociti del sangue periferico.

Inoltre, cercheremo il polimorfismo della regione promotrice di IL-6/G-174C anche mediante PCR nel DNA prelevato da leucociti del sangue periferico, utilizzando prim-er 5'-AAT CTT TGT TGG AGG GTG AG e 5' - ACA TGC CAA GTG CTG AGT CA e endonucleasi di restrizione Sfa NI su gel di agarosio al 2%.