STAT3 en células T: en la encrucijada de la inflamación y el cáncer

Resumen del protocolo

La actividad constitutiva de STAT3 está implicada en muchas neoplasias malignas, incluido el linfoma cutáneo de células T. También es esencial para la diferenciación de Th17, un subconjunto de células T efectoras CD4, implicadas en afecciones inflamatorias crónicas y posiblemente CTCL. Los inhibidores de HDAC han mostrado actividad en CTCL, pero se desconoce su mecanismo de acción exacto. Se sabe que los inhibidores de HDAC regulan la actividad transcripcional de STAT3 y, por lo tanto, pueden ser potencialmente activos en CTCL a través de la modulación de la ruta de STAT3. La hipótesis es que las citocinas Th17 contribuyen a la iniciación del cáncer al crear un microambiente proinflamatorio que predispone a las células a la transformación neoplásica. Para probar esto, los investigadores compararán las diferencias en la producción de citocinas y la expresión génica en las células T residentes en la piel de pacientes con dermatosis benignas y CTCL, así como en la sangre/linfocitos circulantes de donantes sanos y síndrome de Sezary (SS). Los investigadores también investigarán si los inhibidores de HDAC tienen un impacto directo en el número de células Th17, la producción de citoquinas por parte de estas células y la proteína STAT3 fosforilada en CTCL con ciclos de tratamiento posteriores.

Los objetivos de este estudio son 1. Observar los cambios epigenéticos, transcripcionales y fenotípicos que tienen lugar en las células T durante la transformación maligna 2. Comprender el mecanismo de acción de los inhibidores de HDAC en CTCL.

Métodos: Se obtendrán muestras de biopsia de piel de pacientes con linfoma cutáneo de células T (CTCL) y afecciones cutáneas benignas, como eccema, dermatitis y psoriasis, mediante un procedimiento estándar de biopsia con sacabocados de la lesión cutánea.

Además, se recolectarán 15 ml de sangre periférica de pacientes con LCCT que tienen el síndrome de Sezary (SS) y de pacientes con afecciones benignas de la piel.

A los pacientes con CTCL, que están comenzando el tratamiento con inhibidores de HDAC, a saber, Vorinostat y Romidepsin, se les realizará un total de 3 biopsias de piel y/o extracciones de sangre. El primer procedimiento sería antes de iniciar el tratamiento con cualquiera de estos inhibidores de HDAC. Se realizarán dos biopsias de piel y/o extracciones de sangre más después del primer y segundo ciclo de tratamiento.

Los niveles de citocinas Th17, IL-17, IL-22 y la proteína pSTAT3 se determinarán mediante tinción IHC en la piel y los niveles de citocinas en la sangre se analizarán mediante el método ELISA tipo sándwich. Los investigadores también analizarán los niveles de ARNm de los factores de transcripción. de las diferentes células T efectoras por qPCR.