STAT3 nelle cellule T: all'incrocio tra infiammazione e cancro

Sommario del protocollo

L'attività costitutiva di STAT3 è implicata in molte neoplasie incluso il linfoma cutaneo a cellule T. È anche essenziale per la differenziazione Th17, un sottogruppo di cellule T effettrici CD4, implicate in condizioni infiammatorie croniche e possibilmente CTCL. Gli inibitori dell'HDAC hanno mostrato attività nel CTCL ma il loro esatto meccanismo d'azione non è noto. È noto che gli inibitori dell'HDAC regolano l'attività trascrizionale di STAT3 e quindi possono essere potenzialmente attivi in ​​CTCL attraverso la modulazione della via STAT3. L'ipotesi è che le citochine Th17 contribuiscano all'insorgenza del cancro creando un microambiente pro-infiammatorio che predispone le cellule alla trasformazione neoplastica. Per sondare questo, i ricercatori confronteranno le differenze nella produzione di citochine e nell'espressione genica nelle cellule T residenti nella pelle di pazienti con dermatosi benigne e CTCL, nonché nei linfociti circolanti / circolanti di donatori sani e sindrome di Sezary (SS). I ricercatori studieranno anche se gli inibitori dell'HDAC hanno un impatto diretto sul numero di cellule Th17, sulla produzione di citochine da parte di queste cellule e sulla proteina STAT3 fosforilata in CTCL con successivi cicli di trattamento.

Gli obiettivi di questo studio sono 1. Osservare i cambiamenti epigenetici, trascrizionali e fenotipici che avvengono nelle cellule T durante la trasformazione maligna 2. Comprendere il meccanismo d'azione degli inibitori dell'HDAC nel CTCL.

Metodi: Campioni di biopsia cutanea da pazienti con linfoma cutaneo a cellule T (CTCL) e condizioni cutanee benigne come eczema, dermatite e psoriasi saranno ottenuti attraverso una procedura standard di biopsia con punzone dalla lesione cutanea.

Inoltre, verranno raccolti 15 ml di sangue periferico da pazienti affetti da CTCL con sindrome di Sezary (SS) e da pazienti con patologie cutanee benigne.

I pazienti affetti da CTCL, che stanno iniziando il trattamento con inibitori dell'HDAC, ovvero Vorinostat e Romidepsin, avranno un totale di 3 biopsie cutanee e/o prelievi di sangue. La prima procedura sarebbe prima di iniziare il trattamento con uno di questi inibitori dell'HDAC. Dopo il primo e il secondo ciclo di trattamento verranno eseguite altre due biopsie cutanee e/o prelievi di sangue.

I livelli di citochine Th17, IL-17, IL-22 e la proteina pSTAT3 saranno determinati mediante colorazione IHC nella pelle e i livelli di citochine nel sangue saranno dosati con il metodo ELISA a sandwich. I ricercatori analizzeranno anche i livelli di mRNA dei fattori di trascrizione delle diverse cellule effettrici T mediante qPCR.