STAT3 a T-sejtekben: A gyulladás és a rák találkozásánál

Protokoll összefoglaló

A konstitutív STAT3 aktivitás számos rosszindulatú daganatban, köztük a bőr T-sejtes limfómában is szerepet játszik. Ugyancsak nélkülözhetetlen a Th17 differenciálódáshoz, amely a CD4 effektor T-sejtek egy alcsoportja, amely krónikus gyulladásos állapotokban és esetleg CTCL-ben is szerepet játszik. A HDAC-gátlók aktivitást mutattak CTCL-ben, de pontos hatásmechanizmusuk nem ismert. Ismeretes, hogy a HDAC-inhibitorok szabályozzák a STAT3 transzkripciós aktivitását, és így potenciálisan aktívak lehetnek CTCL-ben a STAT3 útvonal modulációján keresztül. A hipotézis az, hogy a Th17 citokinek hozzájárulnak a rák kialakulásához azáltal, hogy gyulladást elősegítő mikrokörnyezetet hoznak létre, amely a sejteket neoplasztikus átalakulásra hajlamosítja. Ennek vizsgálata érdekében a kutatók összehasonlítják a citokintermelés és a génexpresszió különbségeit a jóindulatú dermatózisban és CTCL-ben szenvedő betegek bőrrezidens T-sejtjeiben, valamint egészséges donorok vérében/keringő limfocitáiban és Sezary-szindrómában (SS). A kutatók azt is megvizsgálják, hogy a HDAC-inhibitorok közvetlen hatással vannak-e a Th17 sejtek számára, ezen sejtek citokintermelésére és a foszforilált STAT3 fehérjére a CTCL-ben a következő kezelési ciklusokkal.

A tanulmány célja az 1. Figyelje meg a T-sejtekben a rosszindulatú transzformáció során végbemenő epigenetikai, transzkripciós és fenotípusos változásokat 2. Ismerje meg a HDAC inhibitorok hatásmechanizmusát CTCL-ben.

Módszerek: Bőrbiopsziás mintákat bőr T-sejtes limfómában (CTCL) szenvedő betegektől és jóindulatú bőrbetegségektől, nevezetesen ekcémától, dermatitisztől és pikkelysömörtől, szabványos lyukasztásos biopsziás eljárással nyernek a bőrelváltozásból.

Ezenkívül 15 ml perifériás vért gyűjtenek Sezary-szindrómás (SS) CTCL-betegektől és jóindulatú bőrbetegségben szenvedő betegektől.

Azon CTCL-betegek esetében, akik HDAC-gátlókkal, nevezetesen Vorinostattal és Romidepsin-nel kezdik a kezelést, összesen 3 bőrbiopsziát és/vagy vérvételt kell végezni. Az első eljárás a HDAC-gátlók bármelyikével történő kezelés megkezdése előtt lenne. A kezelés első és második ciklusa után további két bőrbiopszia és/vagy vérvétel történik.

A Th17 citokinek, IL-17, IL-22 és pSTAT3 fehérje szintjét a bőrben IHC-festéssel, a vér citokinszintjét szendvics ELISA módszerrel határozzák meg. A kutatók a transzkripciós faktorok mRNS-szintjét is megvizsgálják. a különböző T-effektor sejtek qPCR-rel.