STAT3 em células T: na encruzilhada da inflamação e do câncer

Resumo do Protocolo

A atividade constitutiva de STAT3 está implicada em muitas malignidades, incluindo o linfoma cutâneo de células T. Também é essencial para a diferenciação de Th17, um subconjunto de células T efetoras CD4, implicado em condições inflamatórias crônicas e possivelmente CTCL. Os inibidores de HDAC mostraram atividade no CTCL, mas seu mecanismo de ação exato não é conhecido. Sabe-se que os inibidores de HDAC regulam a atividade transcricional de STAT3 e, portanto, podem ser potencialmente ativos em CTCL por meio da modulação da via STAT3. A hipótese é que as citocinas Th17 contribuem para o início do câncer ao criar um microambiente pró-inflamatório que predispõe as células à transformação neoplásica. Para sondar isso, os pesquisadores irão comparar as diferenças na produção de citocinas e na expressão gênica nas células T residentes na pele de pacientes com dermatoses benignas e CTCL, bem como no sangue/linfócitos circulantes de doadores saudáveis ​​e na síndrome de Sezary (SS). Os investigadores também investigarão se os inibidores de HDAC têm um impacto direto no número de células Th17, na produção de citocinas por essas células e na proteína STAT3 fosforilada em CTCL com ciclos de tratamento subsequentes.

Os objetivos deste estudo são 1. Observar as alterações epigenéticas, transcricionais e fenotípicas que ocorrem nas células T durante a transformação maligna 2. Compreender o mecanismo de ação dos inibidores de HDAC no CTCL.

Métodos: Espécimes de biópsia de pele de pacientes com linfoma cutâneo de células T (LCCT) e condições benignas da pele, como eczema, dermatite e psoríase, serão obtidos por meio de um procedimento padrão de biópsia por punção da lesão cutânea.

Além disso, serão coletados 15 ml de sangue periférico de pacientes com LCCT com síndrome de Sezary (SS) e de pacientes com condição cutânea benigna.

Os pacientes CTCL, que estão iniciando o tratamento com Inibidores de HDAC, nomeadamente Vorinostat e Romidepsina, terão um total de 3 biópsias de pele e/ou coletas de sangue. O primeiro procedimento seria antes de iniciar o tratamento com qualquer um desses inibidores de HDAC. Mais duas biópsias de pele e/ou coletas de sangue serão realizadas após o primeiro e o segundo ciclo de tratamento.

Os níveis de citocinas Th17, IL-17, IL-22 e proteína pSTAT3 serão determinados por coloração IHC na pele e os níveis de citocinas no sangue serão analisados ​​pelo método ELISA sanduíche. Os investigadores também irão analisar os níveis de mRNA dos fatores de transcrição das diferentes células T efetoras por qPCR.