STAT3 v T buňkách: Na křižovatce zánětu a rakoviny

Souhrn protokolu

Konstitutivní aktivita STAT3 se podílí na mnoha malignitách včetně kožního T buněčného lymfomu. Je také nezbytný pro diferenciaci Th17, podskupinu CD4 efektorových T buněk, podílejících se na chronických zánětlivých stavech a možná CTCL. Inhibitory HDAC prokázaly aktivitu u CTCL, ale jejich přesný mechanismus účinku není znám. Je známo, že inhibitory HDAC regulují transkripční aktivitu STAT3, a proto mohou být potenciálně aktivní v CTCL prostřednictvím modulace dráhy STAT3. Hypotézou je, že cytokiny Th17 přispívají k iniciaci rakoviny tím, že vytvářejí prozánětlivé mikroprostředí, které predisponuje buňky k neoplastické transformaci. Aby to bylo možné zjistit, výzkumníci budou porovnávat rozdíly v produkci cytokinů a genové expresi v kožních T buňkách pacientů s benigními dermatózami a CTCL a také v krvi/cirkulujících lymfocytech zdravých dárců a Sezaryho syndromem (SS). Vyšetřovatelé budou také zkoumat, zda inhibitory HDAC mají přímý dopad na počet buněk Th17, produkci cytokinů těmito buňkami a fosforylovaný protein STAT3 v CTCL s následnými léčebnými cykly.

Cíle této studie jsou 1. Pozorovat epigenetické, transkripční a fenotypové změny, které probíhají v T buňce při maligní transformaci 2. Pochopit mechanismus účinku inhibitorů HDAC u CTCL.

Metody: Vzorky kožní biopsie od pacientů s kožním T buněčným lymfomem (CTCL) a benigními kožními onemocněními, zejména ekzémem, dermatitidou a psoriázou, budou získány standardním postupem punčové biopsie z kožní léze.

Dále bude odebráno 15 ml periferní krve od pacientů s CTCL, kteří mají Sezaryho syndrom (SS) a od pacientů s benigním onemocněním kůže.

Pacienti s CTCL, kteří zahajují léčbu inhibitory HDAC, jmenovitě Vorinostatem a Romidepsinem, budou mít celkem 3 kožní biopsie a/nebo odběry krve. První postup by byl před zahájením léčby kterýmkoli z těchto inhibitorů HDAC. Po prvním a druhém cyklu léčby budou provedeny další dvě biopsie kůže a/nebo odběry krve.

Hladiny Th17 cytokinů, IL-17, IL-22 a proteinu pSTAT3 budou stanoveny barvením IHC v kůži a hladiny cytokinů v krvi budou testovány sendvičovou metodou ELISA. Výzkumníci budou také testovat hladiny mRNA transkripčních faktorů různých T efektorových buněk pomocí qPCR.