Respuestas inmunitarias cervicovaginales a 3 deltoides o muslo intramuscular (IM) TicoVac (CRC306)

El estudio investigará si dirigir los antígenos de la vacuna a los ganglios linfáticos (ilíaca interna) que drenan tanto la extremidad inferior como el cuello uterino/la vagina altera la respuesta de anticuerpos subsiguiente detectada en el cuello uterino/la vagina, en comparación con los antígenos de la vacuna dirigidos a los ganglios linfáticos no relacionados, como los de la axila que drenan el músculo deltoides derecho de la parte superior del brazo.

El brazo derecho se ha seleccionado específicamente porque los vasos linfáticos de la parte superior derecha del cuerpo drenan directamente al torrente sanguíneo a través del conducto linfático derecho sin conexiones linfáticas compartidas con el resto del cuerpo. En contraste, la linfa del resto del cuerpo finalmente drena en el conducto torácico (ver la figura a continuación). Al inmunizar el brazo derecho, los investigadores pueden estar seguros de que los antígenos de la vacuna, las células presentadoras de antígenos y los linfocitos activados no pasarán a través de ningún ganglio linfático en común con el cuello uterino o la vagina. Por el contrario, al inyectar el muslo anterolateral (lado derecho seleccionado por uniformidad), los investigadores pueden estar seguros de que los antígenos de la vacuna pasarán a través de los ganglios linfáticos inguinales externos que también recibirán antígenos y linfocitos en respuesta a la infección o inflamación vaginal o cervical. La elección de la pierna derecha es solo para estandarizar.

Por lo tanto, la hipótesis de los investigadores es que, como resultado de la presentación y estimulación del antígeno dentro de un "medio del tracto genital" específico, los linfocitos T & B que abandonan los nódulos ilíacos externos como resultado de una inmunización en el muslo se modelarán de tal manera que más probablemente regresa al cuello uterino y la vagina debido al drenaje común del cuello uterino, la vagina y el muslo (Figura 1) hacia los ganglios linfáticos ilíacos externos y aórticos laterales. Por el contrario, las células que abandonan los ganglios linfáticos axilares después de la inmunización del brazo derecho entrarán en la sangre directamente a través del conducto linfático derecho y, por lo tanto, no pasarán a través de ningún ganglio linfático en común con el cuello uterino y la vagina.

Los investigadores detectarán un efecto de la inmunización dirigida de varias maneras:

1. Al detectar niveles elevados de anticuerpos específicos de la vacuna en las secreciones cervico-vaginales como resultado de más células B activadas (plasmablastos) que regresan al tracto genital. Los anticuerpos IgG pueden transudarse de la sangre, pero también se pueden producir IgG en la mucosa local. Por el contrario, es más probable que la IgA mucosa se produzca localmente y, por lo tanto, puede verse afectada preferentemente por la inmunización dirigida. Sin embargo, dado que los niveles individuales de anticuerpos mucosos varían ampliamente entre los sujetos, especialmente con IgA, los investigadores establecerán criterios de valoración primarios sobre la base de un aumento de veces en los niveles de anticuerpos desde el inicio, en lugar de la concentración. Dado que las respuestas de IgG de las mucosas son generalmente más fiables y de mayor magnitud, los investigadores han fijado como objetivo principal la IgG de las mucosas específica de la vacuna después de las tres inmunizaciones. Las respuestas de IgA de la mucosa específicas de la vacuna después de las tres inmunizaciones son el objetivo secundario. El estudio se basó en la experiencia limitada de los investigadores con vacunas similares para detectar una duplicación de las proporciones de respondedores para IgG e IgA. Los investigadores han basado el aumento de veces en IgG e IgA mucosas específicas de la vacuna en la experiencia limitada de los investigadores con una vacuna similar inyectada en el brazo (7).

   Además, los investigadores medirán los cambios en otras variables que son de naturaleza exploratoria, ya que los ensayos y la cuantificación están menos establecidos:

2. Mediante la detección de un patrón "mucoso" de respuestas de células B en la sangre con un mayor número de células B específicas de la vacuna después de la inmunización dirigida a los genitales.
3. Mediante la detección de diferencias en los marcadores fenotípicos de la superficie celular en linfocitos específicos de la vacuna que indican un origen mucoso.

Habrá dos grupos de tratamiento:

• El grupo 1 recibirá la vacuna en el músculo deltoides derecho (parte superior del brazo) que drena a los ganglios linfáticos no relacionados en la axila.
• El grupo 2 recibirá la vacuna en la parte anterolateral superior del muslo derecho, desde donde se espera que los antígenos drenen a los ganglios linfáticos inguinales que también drenan el cuello uterino/la vagina.

Para asegurar la desconexión completa de los ganglios linfáticos que drenan, siempre será el brazo DERECHO o la pierna DERECHA el que esté inmunizado.

Se plantea la hipótesis de que dirigirse a los ganglios ilíacos internos conducirá a una mayor respuesta de anticuerpos en la mucosa del cuello uterino/vagina, que se detectará mediante un aumento de la IgA específica de la vacuna en las secreciones cervico-vaginales recolectadas en un Softcup. Además, los linfocitos (células B y T) de los ganglios linfáticos ilíacos externos pueden transportar marcadores de superficie asociados con la localización en la mucosa y secretar combinaciones de citocinas (Th17) diferentes de las que emanan de los ganglios axilares que expresarán un fenotipo sistémico. Esto se puede detectar mediante citometría de flujo, ELISPOT después de la separación de las perlas utilizando marcadores fenotípicos y otros ensayos inmunológicos.

Las lecturas de la respuesta inmunitaria serán anticuerpos IgG e IgA contra los antígenos TBEV en la vacuna, comparando los dos grupos en el momento en que se espera la respuesta máxima (28 días después de la tercera inmunización).

Como los investigadores desean investigar la capacidad de la vacuna para sensibilizar específicamente a los sujetos de una manera dirigida, los participantes deben ser inexpertos con los antígenos de la vacuna y, por lo tanto, no deben haber tenido la vacuna o la infección por TBEV antes. Por lo tanto, los investigadores utilizarán TicoVac, una vacuna contra el TBEV autorizada en el Reino Unido que los adultos del Reino Unido generalmente no han recibido, ya que la infección por el TBEV no es endémica en el Reino Unido. TicoVac se usa ampliamente en Europa central y oriental, donde el TBEV es endémico pero extremadamente poco común, y se ofrece a viajeros del Reino Unido a áreas endémicas que probablemente participen en actividades de alto riesgo (senderismo, trekking).

Las respuestas de las mucosas contra el TBEV no son relevantes ya que el TBEV se transmite por la picadura de garrapatas. Las respuestas inmunitarias a TicoVac actuarán como modelo para otras vacunas en las que la respuesta de anticuerpos de la mucosa de la vagina sea relevante para bloquear la infección (p. VIH, VPH, VHS) y en los que la inmunización dirigida puede aumentar la eficacia.

Aunque estrictamente hablando, la inducción de anticuerpos anti-TBEV en las secreciones cérvico-vaginales no tiene relevancia para la eficacia de la vacuna TicoVac contra un virus inyectado en sangre, los investigadores los han designado como parámetros de eficacia en este modelo de inmunización dirigida.

El propósito de este estudio de fisiología inmunitaria humana es utilizar la vacuna TBEV como un neoantígeno modelo para investigar las lecturas inmunitarias después de la selección del antígeno. Por lo tanto, la recopilación de eventos adversos o datos de seguridad no es relevante para los objetivos del estudio y no habrá una recopilación sistemática de datos de seguridad, aparte de los requeridos para un CTIMP "Tipo A" de evaluación de riesgo (informe SUSAR a MHRA/REC/Investigadores preocupados). , Lista anual de sospechas de reacciones adversas graves como parte del Informe anual de seguridad/Informe de actualización de seguridad del desarrollo).