Cervikovaginální imunitní reakce na 3 intramuskulární (IM) deltový sval nebo stehno TicoVac (CRC306)

Studie bude zkoumat, zda zacílení vakcinačních antigenů na lymfatické uzliny (vnitřní kyčelní), které drénují jak dolní končetinu, tak cervix/vaginu, změní následnou protilátkovou odpověď detekovanou v cervixu/vagině, ve srovnání se zacílením vakcinačních antigenů na nesouvisející lymfatické uzliny, jako je např. ty v axile, které drénují pravý deltový sval horní části paže.

Pravá paže byla specificky vybrána jako lymfatické v pravé horní části těla odtékající přímo do krevního řečiště přes pravý lymfatický kanál bez sdílených lymfatických spojení se zbytkem těla. Naproti tomu lymfa ze zbytku těla nakonec odtéká do hrudního kanálu (viz obrázek níže). Imunizací pravé paže si vědci mohou být jisti, že vakcinační antigeny a antigen prezentující buňky a aktivované lymfocyty neprojdou žádnými lymfatickými uzlinami společnými s děložním čípkem nebo vagínou. Na rozdíl od injekce do anterolaterálního stehna (pravá strana zvolená pro uniformitu) si výzkumníci mohou být jisti, že antigeny vakcíny projdou vnějšími tříselnými lymfatickými uzlinami, které také obdrží antigeny a lymfocyty reagující na vaginální nebo cervikální infekci nebo zánět. Výběr pravé nohy je pouze pro standardizaci.

Vyšetřovatelé proto předpokládají, že v důsledku prezentace antigenu a stimulace ve specificky „prostředí genitálního traktu“ budou T&B lymfocyty opouštějící vnější iliakální uzliny v důsledku imunizace do stehna vzorovány tak, aby se pravděpodobně domů zpět do děložního čípku a pochvy kvůli společné drenáži děložního hrdla, pochvy a stehna (obrázek 1) do zevních ilických a laterálních aortálních lymfatických uzlin. Naproti tomu buňky opouštějící axilární lymfatické uzliny po imunizaci pravé paže vstoupí do krve přímo přes pravý lymfatický kanál, a tak neprojdou žádnými lymfatickými uzlinami společnými s děložním čípkem a vagínou.

Výzkumníci budou detekovat účinek cílené imunizace několika způsoby:

1. Detekcí zvýšených hladin protilátek specifických pro vakcínu v cervikovaginálním sekretu v důsledku více aktivovaných B buněk (plazmablastů) nasměrovaných zpět do genitálního traktu. IgG protilátky mohou být transudovány z krve, ale mohou být také produkovány lokální slizniční IgG. Naproti tomu slizniční IgA je s největší pravděpodobností produkován lokálně, a proto může být přednostně ovlivněn cílenou imunizací. Protože se však jednotlivé hladiny slizničních protilátek mezi subjekty značně liší, zejména u IgA, výzkumníci nastaví primární koncové body spíše na základě násobku zvýšení hladin protilátek oproti výchozí hodnotě, než na základě koncentrace. Protože slizniční IgG odpovědi jsou obecně spolehlivější a většího rozsahu, výzkumníci stanovili primární cíl jako slizniční IgG specifický pro vakcínu po všech třech imunizacích. Sekundárním cílem jsou odpovědi slizničního IgA specifické pro vakcínu po všech třech imunizacích. Studie byla založena na omezených zkušenostech výzkumníků s podobnými vakcínami, aby bylo možné detekovat zdvojnásobení podílu respondentů na IgG a IgA. Výzkumníci založili násobné zvýšení slizničních IgG a IgA specifických pro vakcínu na omezených zkušenostech výzkumníků s podobnou vakcínou aplikovanou do paže (7).

   Kromě toho budou vyšetřovatelé měřit změny v dalších proměnných, které jsou svou povahou průzkumné, protože testy a kvantifikace jsou méně zavedené:

2. Detekcí "slizničního" vzoru reakcí B lymfocytů v krvi se zvýšeným počtem B lymfocytů specifických pro vakcínu po cílené imunizaci na genitálie.
3. Detekcí rozdílů ve fenotypových markerech buněčného povrchu na lymfocytech specifických pro vakcínu, což naznačuje slizniční původ.

Budou dvě léčebné skupiny:

• Skupina 1 dostane vakcínu do pravého deltového svalu (nadloktí), který odtéká do nesouvisejících lymfatických uzlin v axile.
• Skupina 2 dostane vakcínu do horního anterolaterálního pravého stehna, ze kterého se očekává odtok antigenů do tříselných lymfatických uzlin, které také drénují děložní čípek/pochvu.

Aby bylo zajištěno úplné odpojení odtokových lymfatických uzlin, bude vždy imunizována PRAVÁ paže nebo PRAVÁ noha.

Předpokládá se, že zacílení na vnitřní iliakální uzliny povede k zesílené slizniční protilátkové odpovědi v děložním čípku/vagíně, což bude detekováno zvýšeným IgA specifickým pro vakcínu v cervikovaginálních sekretech odebraných do kalíšku Softcup. Kromě toho mohou lymfocyty (B a T buňky) z vnějších iliakálních lymfatických uzlin nést povrchové markery spojené se slizničním naváděním a vylučovat různé kombinace cytokinů (Th17) než ty, které vycházejí z axilárních uzlin, které budou exprimovat systémový fenotyp. To lze detekovat průtokovou cytometrií, ELISPOT po separaci kuliček pomocí fenotypových markerů a dalšími imunologickými testy.

Hodnoty imunitní odpovědi budou IgG a IgA protilátky proti antigenům TBEV ve vakcíně, přičemž se porovnají dvě skupiny v čase, kdy se očekává maximální odpověď (28 dní po třetí imunizaci).

Protože si výzkumníci přejí prozkoumat schopnost vakcíny cíleně specificky aktivovat subjekty, účastníci musí být naivní vůči antigenům vakcíny, a proto nesmí mít vakcínu nebo infekci TBEV dříve. Vyšetřovatelé proto použijí TicoVac – vakcínu proti TBEV licencovanou ve Spojeném království, kterou dospělí ve Spojeném království obecně nedostávají, protože infekce TBEV není ve Spojeném království endemická. TicoVac je široce používán ve střední a východní Evropě, kde je TBEV endemický, ale extrémně vzácný, a je nabízen cestovatelům z Velké Británie do endemických oblastí, kteří se pravděpodobně zabývají vysoce rizikovými aktivitami (turistika, trekking).

Slizniční reakce proti TBEV nejsou relevantní, protože TBEV se přenáší kousnutím klíštěte. Imunitní reakce na TicoVac bude fungovat jako model pro jiné vakcíny, u kterých je slizniční protilátková odpověď ve vagíně důležitá pro blokování infekce (např. HIV, HPV, HSV) a u kterých může cílená imunizace zvýšit účinnost.

Ačkoli přísně vzato indukce protilátek proti TBEV v cervikovaginálním sekretu nemá žádný význam pro účinnost vakcíny TicoVac proti viru injikovanému krví, výzkumníci je označili za parametry účinnosti v tomto modelu cílené imunizace.

Účelem této studie lidské imunitní fyziologie je použití vakcíny TBEV jako modelového neoantigenu ke zkoumání imunitních hodnot po zacílení antigenu. Sběr údajů o nežádoucích účincích nebo bezpečnosti proto není relevantní pro cíle studie a nebude probíhat systematický sběr údajů o bezpečnosti, kromě údajů požadovaných pro CTIMP „typu A“ s hodnocením rizika (hlášení SUSAR MHRA/REC/Concerned Investigators , Roční seznam podezření na závažné nežádoucí účinky jako součást výroční zprávy o bezpečnosti/aktualizační zprávy o vývoji bezpečnosti).