Respostas imunes cervicovaginais a 3 TicoVac deltóide ou coxa intramuscular (IM) (CRC306)

O estudo investigará se o direcionamento de antígenos vacinais para linfonodos (ilíacos internos) que drenam tanto o membro inferior quanto o colo do útero/vagina altera a resposta subsequente de anticorpos detectada no colo do útero/vagina, quando comparado com o direcionamento de antígenos vacinais para linfonodos não relacionados, como aqueles na axila que drenam o músculo deltóide direito da parte superior do braço.

O braço direito foi especificamente selecionado, pois os vasos linfáticos na parte superior direita do corpo drenam diretamente para a corrente sanguínea através do ducto linfático direito, sem conexões linfáticas compartilhadas com o resto do corpo. Em contraste, a linfa do resto do corpo acaba drenando para o ducto torácico (veja a figura abaixo). Ao imunizar o braço direito, os investigadores podem ter certeza de que os antígenos da vacina, as células apresentadoras de antígenos e os linfócitos ativados não passarão por nenhum nódulo linfático em comum com o colo do útero ou a vagina. Em contraste, injetando na coxa anterolateral (lado direito selecionado para uniformidade), os investigadores podem ter certeza de que os antígenos da vacina passarão pelos gânglios linfáticos inguinais externos, que também receberão antígenos e linfócitos respondendo à infecção ou inflamação vaginal ou cervical. A escolha da perna direita é apenas para padronizar.

É a hipótese dos investigadores, portanto, que, como resultado da apresentação e estimulação do antígeno dentro de um "ambiente do trato genital" especificamente, os linfócitos T & B deixando os nódulos ilíacos externos como resultado de uma imunização na coxa serão padronizados de forma a mais provavelmente voltando para o colo do útero e a vagina devido à drenagem comum do colo do útero, vagina e coxa (Figura 1) para os gânglios linfáticos ilíacos externos e laterais da aorta. Em contraste, as células que saem dos gânglios linfáticos axilares após a imunização do braço direito entrarão no sangue diretamente através do ducto linfático direito e, portanto, não passarão por nenhum gânglio linfático em comum com o colo do útero e a vagina.

Os investigadores detectarão um efeito da imunização direcionada de várias maneiras:

1. Ao detectar níveis aumentados de anticorpos específicos da vacina nas secreções cérvico-vaginais como resultado de mais células B ativadas (plasmablastos) retornando ao trato genital. Os anticorpos IgG podem ser transudados do sangue, mas IgG local da mucosa também pode ser produzido. Em contraste, a IgA mucosa é mais provável de ser produzida localmente e pode, portanto, ser preferencialmente afetada pela imunização direcionada. No entanto, como os níveis individuais de anticorpos da mucosa variam amplamente entre os indivíduos, especialmente com IgA, os investigadores definirão os pontos finais primários com base em um aumento de uma vez nos níveis de anticorpos desde a linha de base, em vez da concentração. Como as respostas de IgG nas mucosas são geralmente mais confiáveis ​​e de maior magnitude, os investigadores estabeleceram o objetivo primário como IgG nas mucosas específico da vacina após todas as três imunizações. As respostas de IgA da mucosa específicas da vacina após todas as três imunizações são o objetivo secundário. O estudo foi desenvolvido com base na experiência limitada dos investigadores com vacinas semelhantes para detectar uma duplicação das proporções de respondedores para IgG e IgA. Os investigadores basearam o aumento de dobras em IgG e IgA mucosos específicos da vacina na experiência limitada dos investigadores com uma vacina semelhante injetada no braço(7).

   Além disso, os investigadores medirão as mudanças em outras variáveis ​​que são de natureza exploratória, pois os ensaios e a quantificação são menos bem estabelecidos:

2. Ao detectar um padrão "mucoso" de respostas de células B no sangue com aumento do número de células B específicas da vacina após a imunização genital direcionada.
3. Ao detectar diferenças nos marcadores fenotípicos da superfície celular em linfócitos específicos da vacina, indicando uma origem mucosa.

Haverá dois grupos de tratamento:

• O Grupo 1 receberá a vacina no músculo deltóide direito (parte superior do braço) que drena para linfonodos não relacionados na axila.
• O grupo 2 receberá a vacina na parte anterolateral superior da coxa direita, da qual se espera que os antígenos drenem para os gânglios linfáticos inguinais que também drenam o colo do útero/vagina.

Para garantir a desconexão completa dos gânglios linfáticos de drenagem, será sempre o braço DIREITO ou a perna DIREITA que está imunizado.

Supõe-se que o direcionamento dos nódulos ilíacos internos levará a uma resposta aumentada de anticorpos da mucosa no colo do útero/vagina, que será detectada pelo aumento da IgA específica da vacina nas secreções cérvico-vaginais coletadas em um Softcup. Além disso, os linfócitos (células B e T) dos linfonodos ilíacos externos podem carregar marcadores de superfície associados ao homing da mucosa e secretar diferentes combinações de citocinas (Th17) do que aqueles provenientes dos linfonodos axilares que expressarão um fenótipo sistêmico. Isso pode ser detectado por citometria de fluxo, ELISPOT após a separação do grânulo usando marcadores fenotípicos e outros ensaios imunológicos.

As leituras da resposta imune serão anticorpos IgG e IgA contra os antígenos TBEV na vacina, comparando os dois grupos no momento em que o pico de resposta é esperado (28 dias após a terceira imunização).

Como os investigadores desejam investigar a capacidade da vacina de preparar indivíduos especificamente de uma forma direcionada, os participantes devem ser virgens aos antígenos da vacina e, portanto, não devem ter recebido a vacina ou a infecção por TBEV antes. Portanto, os investigadores usarão TicoVac - uma vacina contra TBEV licenciada no Reino Unido que os adultos do Reino Unido geralmente não recebem, pois a infecção por TBEV não é endêmica no Reino Unido. O TicoVac é amplamente utilizado na Europa Central e Oriental, onde o TBEV é endêmico, mas extremamente incomum, e é oferecido a viajantes do Reino Unido para áreas endêmicas que provavelmente se envolverão em atividades de alto risco (caminhadas, trekking).

As respostas da mucosa contra o TBEV não são relevantes, pois o TBEV é transmitido por picadas de carrapatos. As respostas imunes ao TicoVac funcionarão como um modelo para outras vacinas nas quais a resposta de anticorpos da mucosa na vagina é relevante para bloquear a infecção (por exemplo, HIV, HPV, HSV) e nos quais a imunização direcionada pode aumentar a eficácia.

Embora estritamente falando, a indução de anticorpos anti-TBEV nas secreções cérvico-vaginais não seja relevante para a eficácia da vacina TicoVac contra um vírus injetado no sangue, os investigadores os designaram como parâmetros de eficácia neste modelo de imunização direcionada.

O objetivo deste estudo de fisiologia imunológica humana é usar a vacina TBEV como um neoantígeno modelo para investigar as leituras imunológicas após o direcionamento do antígeno. A coleta de eventos adversos ou dados de segurança, portanto, não é relevante para os objetivos do estudo e não haverá coleta sistemática de dados de segurança, além daqueles necessários para um CTIMP "Tipo A" com avaliação de risco (relatório do SUSAR para MHRA/REC/Investigadores preocupados , Lista Anual de Suspeitas de Reações Adversas Graves como parte do Relatório Anual de Segurança/Relatório de Atualização de Segurança do Desenvolvimento).