Estudio de la inflamación y los cambios en las vías respiratorias que se producen tras la exposición a alérgenos en asmáticos (ACE)

Este protocolo describe un estudio mecánico de un solo sitio para investigar los microARN (miARN) que se expresan diferencialmente en el epitelio de las vías respiratorias de pacientes con asma al inicio y en respuesta al desafío con alérgenos. Nuestra hipótesis es que la exposición a alérgenos mejora la contractilidad del músculo liso de las vías respiratorias y la producción de ARNm/miARN de células epiteliales como consecuencia del aumento local de la producción de citoquinas derivadas de células T. El estudio implicará tres visitas en el transcurso de aproximadamente 14 días. En la visita 1, los participantes se caracterizarán en detalle con pruebas de función pulmonar, pruebas de provocación con metacolina y pruebas de punción cutánea con alérgenos. En la Visita 2, los participantes se someterán a una broncoscopia con administración segmentaria de alérgenos de extracto de alérgeno estandarizado para gatos o ácaros del polvo. En la Visita 3 (ya sea 24 horas después o 7 días después), se realizará una broncoscopia para recolectar muestras de las vías respiratorias, incluido el lavado broncoalveolar (BAL), cepillado epitelial y biopsias endobronquiales. El análisis de muestras incluirá la medición de la expresión de miARN y ARNm en cepillados epiteliales (RNAseq y qPCR); análisis de marcadores de superficie celular en células BAL y células sanguíneas; y recolección de biopsias endobronquiales para inmunotinción de localización de células inmunes, inmunotransferencia de fosforilación de proteínas de células lisas, análisis del contenido de mucina y subcultivo de células de músculo liso. Un total de 38 sujetos (26 asmáticos con asma estable o bien controlada, 6 alérgicos no asmáticos y 6 no alérgicos no asmáticos) completarán el estudio.