Digestibilidad de aminoácidos de proteínas de suero y zeína

La digestibilidad ileal verdadera de los aminoácidos del aislado de proteína de suero (WPI) y las proteínas de zeína se determinará en sujetos sanos. Las pérdidas endógenas de proteínas y aminoácidos se determinarán recolectando muestras de digesta después de una comida de prueba libre de proteínas en un grupo diferente de sujetos.

Se incluirán 24 voluntarios en el estudio (hombres y mujeres; de 18 a 65 años de edad; IMC de 18 a 30 kg/m2) y se evaluarán en AgroParisTech (Centro de Investigación de Nutrición Humana del Hospital de Avicenne). Debido al procedimiento invasivo de intubación, cada voluntario probará solo una comida de prueba (n=8 / comida de prueba).

Una semana antes del experimento, los voluntarios seguirán una dieta estándar adaptada a su peso corporal para controlar su aporte proteico (1,3 g de proteína/kg de peso corporal). Los voluntarios llegarán al hospital la mañana anterior al día del experimento y estarán equipados con un tubo intestinal de doble luz que se les permitirá avanzar por el tracto intestinal durante 24h. El día del experimento se comprobará radiográficamente la posición del tubo para verificar su ubicación en el íleon terminal. Se insertará un catéter en la vena del antebrazo para tomar muestras de sangre. Se iniciará una perfusión del marcador no absorbible polietilenglicol -4000 para estimar el flujo intestinal y se recogerá la muestra de íleon basal durante 30 min. Se recolectará una muestra de plasma basal. Luego, en t=0, el voluntario beberá la comida de prueba. Hasta t=9h, el contenido intestinal se recogerá de forma continua mediante aspiración y se agrupará cada 30 minutos. Se tomarán muestras de sangre cada 30 minutos durante 4 hy cada hora a partir de entonces.

La comida de prueba consistirá en una galleta sin proteínas (160 g) y una bebida (500 ml) con la proteína de prueba como única fuente de proteínas o sin proteínas para el grupo sin proteínas. Se agregará Celite a la galleta sin proteínas y se agregará inulina marcada con carbono 13 a la bebida como marcadores no digeribles de la comida para permitir la corrección de la recolección incompleta de digesta. Las proteínas de prueba serán WPI o zein.

El nitrógeno total se medirá en muestras de harina y digesta mediante el acoplamiento de análisis elemental con espectrometría de masas de relación de isótopos estables (EA-IRMS) y la concentración de aminoácidos en muestras de harina, digesta y plasma se medirá mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). ) con el fin de determinar la biodisponibilidad ileal del aminoácido zeína y proteína de suero. También se determinará el perfil hormonal del plasma para evaluar el efecto de cada fuente de proteína sobre las hormonas metabólicas como la insulina, el glucagón, la leptina, etc.