Digeribilità degli amminoacidi delle proteine ​​​​del siero di latte e della zeina

La vera digeribilità degli aminoacidi ileali dell'isolato proteico del siero di latte (WPI) e delle proteine ​​zeina sarà determinata in soggetti sani. Le perdite endogene di proteine ​​e aminoacidi saranno determinate raccogliendo campioni di digesta dopo un pasto di prova privo di proteine ​​in un diverso gruppo di soggetti.

24 volontari saranno inclusi nello studio (uomini e donne; età 18-65 anni; BMI 18-30 kg/m2) e testati presso AgroParisTech (Centro di ricerca sulla nutrizione umana dell'ospedale Avicenne). A causa della procedura invasiva di intubazione, ogni volontario testerà un solo pasto di prova (n=8 / pasto di prova).

Una settimana prima dell'esperimento, i volontari seguiranno una dieta standard adattata al loro peso corporeo per controllare l'assunzione di proteine ​​(1,3 g di proteine/kg di peso corporeo). I volontari arriveranno in ospedale la mattina prima del giorno dell'esperimento e saranno dotati di un tubo intestinale a doppio lume che sarà lasciato avanzare attraverso il tratto intestinale per 24 ore. Il giorno dell'esperimento, la posizione del tubo verrà controllata mediante radiografia per verificarne l'ubicazione all'ileo terminale. Un catetere verrà inserito nella vena dell'avambraccio per il prelievo di sangue. Una perfusione del marker non assorbibile polietilenglicole -4000 inizierà a stimare il flusso intestinale e il campione ileale basale sarà raccolto per 30 min. Verrà raccolto un campione di plasma basale. Quindi, a t=0, il volontario berrà il pasto di prova. Fino a t=9h, il contenuto intestinale sarà continuamente raccolto mediante aspirazione e raggruppato ogni 30 minuti. Il sangue verrà prelevato ogni 30 minuti per 4 ore e successivamente ogni ora.

Il pasto di prova consisterà in un biscotto aproteico (160 g) e una bevanda (500 ml) con la proteina del test come unica fonte proteica o nessuna proteina per il gruppo aproteico. La celite verrà aggiunta al biscotto aproteico e l'inulina marcata con carbonio 13 verrà aggiunta alla bevanda come marcatori indigeribili del pasto per consentire la correzione per la raccolta incompleta di digesta. Le proteine ​​del test saranno WPI o zeina.

L'azoto totale sarà misurato in campioni di farina e digestato mediante l'accoppiamento dell'analisi elementare con spettrometria di massa a rapporto isotopico stabile (EA-IRMS) e la concentrazione di aminoacidi in campioni di farina, digestato e plasma sarà misurata mediante cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC ) al fine di determinare la biodisponibilità ileale dell'amminoacido della zeina e delle proteine ​​del siero di latte. Sarà inoltre determinato il profilo ormonale plasmatico per valutare l'effetto di ciascuna fonte proteica sugli ormoni metabolici come insulina, glucagone, leptina, ecc.