Digestibilidade de aminoácidos de proteínas de soro de leite e zeína

A verdadeira digestibilidade ileal dos aminoácidos do isolado de proteína de soro de leite (WPI) e das proteínas zeínas será determinada em indivíduos saudáveis. As perdas endógenas de proteínas e aminoácidos serão determinadas pela coleta de amostras de digesta após uma refeição-teste sem proteína em um grupo diferente de indivíduos.

24 voluntários serão incluídos no estudo (homens e mulheres; com idades entre 18-65 anos; IMC 18-30 kg/m2) e testados no AgroParisTech (Centro de Pesquisa em Nutrição Humana do Hospital Avicenne). Devido ao procedimento invasivo de intubação, cada voluntário testará apenas uma refeição-teste (n=8/refeição-teste).

Uma semana antes do experimento, os voluntários seguirão uma dieta padrão adaptada ao seu peso corporal para controlar a ingestão de proteínas (1,3 g de proteína/kg de peso corporal). Os voluntários chegarão ao hospital na manhã anterior ao dia do experimento e serão equipados com um tubo intestinal de duplo lúmen que poderá progredir pelo trato intestinal por 24h. No dia do experimento, a posição do tubo será verificada por radiografia para verificar sua localização no íleo terminal. Um cateter será inserido na veia do antebraço para coleta de sangue. Uma perfusão do marcador inabsorvível polietileno glicol -4000 será iniciada para estimar o fluxo intestinal e a amostra basal do íleo será coletada durante 30 min. A amostra de plasma basal será coletada. Então, em t=0, o voluntário beberá a refeição-teste. Até t=9h, o conteúdo intestinal será continuamente coletado por aspiração e reunido a cada 30 minutos. Sangue será coletado a cada 30 minutos durante 4h e a cada hora a partir de então.

A refeição teste consistirá em um biscoito sem proteína (160 g) e uma bebida (500 ml) com a proteína teste como única fonte de proteína ou sem proteína para o grupo sem proteína. A celite será adicionada ao biscoito sem proteína e a inulina marcada com carbono 13 será adicionada à bebida como marcadores indigeríveis da refeição para permitir a correção da coleta incompleta da digesta. As proteínas de teste serão WPI ou zeína.

O nitrogênio total será medido em amostras de farinha e digesta pelo acoplamento de Análise Elementar com Espectrometria de Massas de Razão de Isótopos estáveis ​​(EA-IRMS) e a concentração de aminoácidos em amostras de farinha, digesta e plasma será medida por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC ) a fim de determinar a biodisponibilidade ileal do aminoácido da zeína e da proteína do soro do leite. O perfil hormonal plasmático também será determinado para avaliar o efeito de cada fonte de proteína nos hormônios metabólicos como insulina, glucagon, leptina, etc.