Técnicas de PCR de esputo seco usando un Spotcard

Las pruebas moleculares para mutaciones en los genes de M. tuberculosis asociadas con la resistencia de los medicamentos antituberculosos (TB) ya forman parte del diagnóstico de TB de laboratorio estándar.

Esto implica un conocimiento más temprano de la posible resistencia y, por lo tanto, evita tratamientos innecesarios y la posibilidad de fracaso del tratamiento o toxicidad relacionada con el tratamiento.

El diagnóstico de laboratorio molecular está ampliamente difundido en países de altos ingresos y baja endemia de TB. Sin embargo, los países de bajos ingresos carecen de instalaciones generalizadas para evaluar la susceptibilidad, ya sea genotípica o fenotípica. Realizar diagnósticos moleculares en el esputo recolectado con una tarjeta puntual podría mejorar la accesibilidad a las pruebas moleculares.

Este estudio examina si el esputo recolectado y colocado en tarjetas puntuales podría usarse para múltiples pruebas moleculares para la detección, identificación y predicción de la susceptibilidad a la TB. Esto significa que la extracción de ADN del esputo de la tarjeta de puntos debería ser factible.

El estudio es un estudio piloto con pacientes adultos del departamento de tuberculosis del Centro Médico Universitario de Groningen (UMCG) Beatrixoord, Haren como sujetos. El esputo producido se recolectará, se secará en tarjetas puntuales y se probará la extracción de ADN de la tarjeta. Si la detección molecular es positiva para la bacteria de la tuberculosis, se realizarán pruebas adicionales. En base a la presencia/ausencia de mutaciones en los genes asociados a la susceptibilidad a la resistencia que se pueda predecir, se realizarán diferentes técnicas moleculares para identificar posibles mutaciones. Además, el esputo se recogerá a medida que los pacientes lo produzcan. Las muestras de esputo con baja carga bacteriana también se pueden analizar y pueden evaluar la sensibilidad del procedimiento.

Por último, se probarán técnicas como la detección de ARN para identificar la carga bacteriana. Esto se puede hacer si se recolectó más de una muestra de pacientes.

Los sujetos serán seleccionados por edad, participación en TDM estándar y uso de drogas. Se analizarán los parámetros demográficos. Las muestras de esputo se tomarán dos veces por semana (martes y viernes).